新型调节剂及使用方法技术

本发明专利技术提供新型调节剂，包括抗体及其衍生物在内，以及使用这类调节剂治疗过度增殖障碍的方法。

Novel regulating agent and using method

The present invention provides novel modulators, including antibodies and derivatives thereof, and methods of using such modulators for the treatment of over proliferative disorders.

【技术实现步骤摘要】
新型调节剂及使用方法本申请是申请日为2011年9月2日的申请号为201180053061.9的题为“新型调节剂及使用方法”的专利技术专利申请的分案申请。交叉参考的专利申请本专利申请根据35U.S.C.119(e)要求于2010年9月3日提交的系列号为No.61/380,181的美国临时专利申请的权益，将该专利申请以引用的方式全文并入本文。
本申请案整体涉及组合物及其用于治疗或改善过度增殖障碍、它们的扩张、再发、复发或转移的方法。在一个广泛的方面，本专利技术涉及CD46调节剂(包括CD46拮抗剂和融合构建体)用于治疗或预防赘生性障碍的用途。在特别优选的实施例中，本专利技术提供抗CD46抗体用于对恶性肿瘤进行免疫治疗的用途，包括降低肿瘤起始细胞(tumorinitiatingcell)出现率。
技术介绍
干细胞和祖细胞分化及细胞增殖为一致发挥作用以支持器官发生期间的组织生长以及所有活生物体寿命期间大部分组织的细胞替换及修复的正常进程。分化和增殖决定通常受多种因素和信号控制，这些因素和信号达成平衡以维持细胞命运决定和组织架构。作为细胞对调节细胞分裂和组织成熟的微环境暗示作出响应的结果，正常组织架构得以维持。因此，细胞增殖和分化通常仅为替换受损或死亡细胞或为生长所需要而进行。遗憾的是，细胞增殖和/或分化的破坏可由多种因素引起，包括例如多种信号传导化学物质不足或过多、存在微环境改变、基因突变或它们的某种组合。当正常细胞增殖和/或分化受到扰乱或某种破坏时，其可引起多种疾病或障碍，包括癌症。常规的癌症治疗包括化学疗法、放射疗法、手术、免疫疗法(例如生物响应修饰剂、疫苗或靶向治疗剂)或它们的组合。遗憾的是，太多癌症对这类常规治疗无响应或响应极小，从而留给患者极少的选择。例如，一些患者亚群表现出使他们无响应的基因突变(例如KRAS)，尽管某些疗法具有普遍有效性。此外，取决于癌症的类型，一些可用的治疗(如手术)可能并非可行的备选方案。当试图护理先前已进行治疗而随后复发的患者时，当前的护理标准治疗剂所固有的局限性尤为明显。在这类情形中，失败的治疗方案和所导致的患者恶化可造成难治性肿瘤，其通常自身表现为更具侵袭性的疾病，最终证明不能治愈。尽管多年来癌症的诊断和治疗已有很大改进，但由于现有疗法无法预防复发、肿瘤再发和转移，许多实体瘤的总存活率仍基本保持不变。因此，开发更多靶向的且有效的疗法仍是一个挑战。一个有前景的研究领域涉及使用靶向治疗剂来追逐似乎造成许多癌症的致瘤“种子”细胞。为此，现已知大部分实体组织含有组织固有的成人干细胞群体，其产生占该组织的大部分的分化细胞类型。在这些组织中产生的肿瘤类似地由也从干细胞产生、但其总体增殖和组织化明显不同的异源细胞群体组成。虽然日益认识到大多数肿瘤细胞具有有限的增殖能力，但少数癌细胞群体(通常称为癌症干细胞或CSc)具有专有的广泛自我更新能力，由此能使它们具有肿瘤重新起始能力。更具体地讲，癌症干细胞假说认为，每一肿瘤中存在独特的细胞子集(即CSC)(约0.1-10％)，其能够无限自我更新并产生由于它们分化为肿瘤祖细胞且随后分化为最终分化的肿瘤细胞而复制能力逐渐受限的肿瘤细胞。近年来，已变得更加明显的是，这些CSC(也称为肿瘤永续细胞(tumorperpetuatingcell)或TPC)可能对传统的化学治疗剂或放射具有更大的抗性，因而在护理标准临床疗法后继续存在，随后刺激复发性肿瘤、继发性肿瘤和转移瘤的生长。此外，越来越多的证据表明，调节器官发生和/或正常组织固有干细胞自我更新的途径在CSC中失调或改变，从而导致自我更新癌细胞不断扩张和肿瘤形成。一般参见Al-Hajj等人，2004,PMID:15378087；和Dalerba等人，2007,PMID:17548814；将这些参考文献的每一者以引用的方式全文并入本文。因此，传统的以及较新的靶向治疗方法的有效性显然受抗性癌细胞的存在和/或出现所限制，这类抗性癌细胞即使面对这些各式各样的治疗方法仍能够延续癌症。Huff等人，EuropeanJournalofCancer(《欧洲癌症杂志》)42:1293-1297(2006)以及Zhou等人，NatureReviewsDrugDiscovery(《自然评论：药物发现》)8:806-823(2009)，将这些参考文献每一者以引用的方式全文并入本文。这些观察结果由当患有实体肿瘤时传统减积剂(debulkingagent)一直无法实质上提高患者存活率以及对肿瘤如何生长、复发和转移的了解逐渐深入得到证实。因此，治疗赘生性障碍的最新策略已认识到消除、消耗、沉默肿瘤永续细胞或促进其分化以降低肿瘤再发、转移或患者复发的可能性的重要性。开发这类策略的努力已整合了涉及非传统异种移植(NTX)模型的最新工作，在所述模型中将原发性人实体肿瘤样本专门植入免疫功能降低的小鼠中并进行继代。这类技术证实存在具有产生异源肿瘤并无限刺激其生长的独特能力的细胞亚群。如先前所假设，在NTX模型中进行的工作已证实，所鉴别的肿瘤细胞CSC亚群表现出对诸如化学疗法和放射治疗的减积方案具有更大的抗性，这潜在地解释临床响应率与总存活率之间的不一致。此外，在CSC研究中使用NTX模型已引起了药物发现及候选药物临床前评价的根本变化，这个变化可产生对肿瘤再发和转移具有重大影响从而改善患者存活率的CSC靶向疗法。虽然已取得了进展，但与处理原发性和/或异种移植肿瘤组织相关的固有技术困难以及表征CSC特征及分化潜力的实验平台的缺乏构成重大的挑战。因此，仍十分需要选择性地靶向癌症干细胞并开发可用于治疗、预防和/或管理过度增殖障碍的诊断性、预防性或治疗性化合物或方法。
技术实现思路
这些及其他目标由本专利技术提供，本专利技术在广泛意义上涉及可用于治疗CD46相关障碍(例如过度增殖障碍或赘生性障碍)的方法、化合物、组合物和制品。为此，本专利技术提供有效靶向癌症干细胞且可用于治疗患有各种恶性肿瘤的患者的新型CD46调节剂。在某些实施例中，所公开的CD46调节剂可包含任何识别CD46多肽、其配体或其基因、与它们竞争、对它们进行激动、拮抗、与它们相互作用、与它们结合或与它们缔合，并调节、调整、改动、改变或改善CD46蛋白对一个或多个生理学途径的影响的化合物。在本专利技术的所选的实施例中，CD46调节剂可包含CD46自身或其片段，所述CD46自身或其片段呈分离形式或与其他部分融合或缔合(例如Fc-CD46、PEG-CD46或与靶向部分缔合的CD46)。在其他所选的实施例中，CD46调节剂可包含CD46拮抗剂，出于本申请案的目的，CD46拮抗剂应视为意指任何识别CD46、与其竞争、与其相互作用、与其结合或与其缔合，并中和、消除、减少、敏化、重新程序化赘生性细胞(包括肿瘤起始细胞)、抑制或控制所述细胞生长的构建体或化合物。在优选的实施例中，本专利技术的CD46调节剂包含抗CD46抗体或其片段或衍生物，意外地发现其可沉默、中和、减少、降低、消耗、缓和、减弱、重新程序化、消除肿瘤起始细胞或者抑制其繁殖、维持、扩张、增殖赘生性细胞或以别的方式促进赘生性细胞存活、再发、再生和/或转移的能力。在一个实施例中，CD46调节剂可包含人源化抗体，其中所述抗体包含SEQIDNO:199中所示的重链可变区氨基本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的CD46调节剂。

【技术特征摘要】
2010.09.03 US 61/3801811.一种分离的CD46调节剂。2.根据权利要求1所述的分离的CD46调节剂，其中所述CD46调节剂包含CD46拮抗剂。3.根据权利要求1所述的分离的CD46调节剂，其中所述CD46调节剂包含抗体或其免疫反应性片段。4.根据权利要求3所述的分离的CD46调节剂，其中所述抗体或其免疫反应性片段包含单克隆抗体。5.根据权利要求4所述的分离的CD46调节剂，其中所述单克隆抗体选自嵌合抗体、人源化抗体和人抗体。6.根据权利要求4所述的分离的CD46调节剂，其中所述单克隆抗体包含具有三个互补决定区的轻链可变区和具有三个互补决定区的重链可变区，其中所述重链和轻链互补决定区包含图11B中所示的互补决定区。7.根据权利要求6所述的分离的CD46调节剂，其中所述单克隆抗体是人源化抗体。8.根据权利要求4所述的分离的CD46调节剂，其中所述单克隆抗体包含轻链可变区和重链可变区，其中所述轻链可变区包含与选自SEQIDNO：17、SEQIDNO：21、SEQIDNO：25、SEQIDNO：29、SEQIDNO：33、SEQIDNO：37、SEQIDNO：41、SEQIDNO：45、SEQIDNO：49、SEQIDNO：53、SEQIDNO：57、SEQIDNO：61、SEQIDNO：65、SEQIDNO：69、SEQIDNO：73、SEQIDNO：77、SEQIDNO：81和SEQIDNO：85中所示氨基酸序列的氨基酸序列具有至少60％同一性的氨基酸序列，并且其中所述重链可变区包含与选自SEQIDNO：15、SEQIDNO：19、SEQIDNO：23、SEQIDNO：27、SEQIDNO：31、SEQIDNO：35、SEQIDNO：39、SEQIDNO：43、SEQIDNO：47、SEQIDNO：51、SEQIDNO：55、SEQIDNO：59、SEQIDNO：63、SEQIDNO：67、SEQIDNO：71、SEQIDNO：75、SEQIDNO：79和SEQIDNO：83中所示氨基酸序列的氨基酸序列具有自身60％同一性的氨基酸序列。9.一种核酸，所述核酸编码根据权利要求8所述的氨基酸重链可变区或氨基酸轻链可变区。10.一种载体，所述载体包含根据权利要求9所述的核酸。11.一种人源化抗体，所述抗体衍生自根据权利要求8所述的单克隆抗体。12.根据权利要求1所述的分离的CD46调节剂，所述调节剂包含来自CD46变体A的氨基酸序列或其片段。13.根据权利要求12所述的分离的CD46调节剂，其中所述CD46调节剂还包含免疫球蛋白恒定区的至少一部分。14.根据权利要求1所述的分离的CD46调节剂，其中所述调节剂在施用给受试者后降低肿瘤起始细胞的出现率。15.根据权利要求14所述的分离的CD46调节剂，其中所述出现率的降低是使用对已知用于富集肿瘤起始细胞的肿瘤细胞表面标记物的流式细胞术分析或对已知用于富集肿瘤起始细胞的肿瘤细胞表面标记物的免疫化学检测来测定。16.根据权利要求14所述的分离的CD46调节剂，其中所述出现率的降低是使用体外或体内有限稀释分析来测定。17.根据权利要求16所述的分离的CD46调节剂，其中所述出现率的降低是使用体内有限稀释分析来测定的，所述体内有限稀释分析包括将活的人肿瘤细胞移植进免疫能力降低的小鼠中。18.根据权利要求17所述的分离的CD46调节剂，其中所述出现率的降低是使用体内有限稀释分析来测定的，所述体内有限稀释分析包括用泊松分布统计对肿瘤起始细胞出现率进行定量。19.根据权利要求16所述的分离的CD46调节剂，其中所述出现率的降低是使用体外有限稀释分析来测定的，所述体外有限稀释分析包括将活的人肿瘤细胞有限稀释沉积进体外集落支持条件中。20.根据权利要求19所述的分离的CD46调节剂，其中所述出现率的降低是使用体外有限稀释分析来测定的，所述体外有限稀释分析包括用泊松分布统计对肿瘤起始细胞出现率进行定量。21.根据权利要求14所述的分离的CD46调节剂，其中所述肿瘤起始细胞包含肿瘤永续细胞。22.一种治疗CD46相关障碍的方法，所述方法包括施用治疗有效量的CD46调节剂给有需要的受试者。23.根据权利要求22所述的方法，其中所述CD46调节剂包含CD46拮抗剂。24.根据权利要求22所述的方法，其中所述CD46调节剂包含抗体或其免疫反应性片段。25.根据权利要求24所述的方法，其中所述抗体或其免疫反应性片段包含单克隆抗体。26.根据权利要求25所述的方法，其中所述单克隆抗体选自嵌合抗体、人源化抗体和人抗体。27.根据权利要求25所述的方法，其中所述单克隆抗体包含具有三个互补决定区的轻链可变区和具有三个互补决定区的重链可变区，其中所述重链和轻链互补决定区包含图11B中所示的互补决定区。28.根据权利要求25所述的方法，其中所述单克隆抗体包含轻链可变区和重链可变区，其中所述轻链可变区包含与选自SEQIDNO：17、SEQIDNO：21、SEQIDNO：25、SEQIDNO：29、SEQIDNO：33、SEQIDNO：37、SEQIDNO：41、SEQIDNO：45、SEQIDNO：49、SEQIDNO：53、SEQIDNO：57、SEQIDNO：61、SEQIDNO：65、SEQIDNO：69、SEQIDNO：73、SEQIDNO：77、SEQIDNO：81和SEQIDNO：85中所示氨基酸序列的氨基酸序列具有至少60％同一性的氨基酸序列，并且其中所述重链可变区包含与选自SEQIDNO：15、SEQIDNO：19、SEQIDNO：23、SEQIDNO：27、SEQIDNO：31、SEQIDNO：35、SEQIDNO：39、SEQIDNO：43、SEQIDNO：47、SEQIDNO：51、SEQIDNO：55、SEQIDNO：59、SEQIDNO：63、SEQIDNO：67、SEQIDNO：71、SEQIDNO：75、SEQIDNO：79和SEQIDNO：83中所示氨基酸序列的氨基酸序列具有自身60％同一性的氨基酸序列。29.根据权利要求25所述的方法，其中所述单克隆抗体包含泛CD46抗体。30.根据权利要求25所述的方法，其中所述单克隆抗体与一种或多种CD46剪接变体免疫特异性缔合。31.根据权利要求30所述的方法，其中所述一种或多种CD46剪接变体包含选自CD46D、CD46F和CD46J的剪接变体。32.根据权利要求22所述的方法，其中所述过度增殖障碍包含赘生性障碍。33.根据权利要求32所述的方法，其中所述赘生性障碍包含实体瘤。34.根据权利要求32所述的方法，其中所述赘生性障碍包含肾上腺癌、膀胱癌、子宫颈癌、子宫内膜癌、肾癌、肝癌、肺癌、卵巢癌、结肠直肠癌、胰腺癌、前列腺癌或乳腺癌。35.根据权利要求22所述的方法，所述方法还包括降低肿瘤起始细胞在所述受试者中的出现率的步骤。36.根据权利要求35所述的方法，其中所述出现率的降低是使用对已知用于富集肿瘤起始细胞的肿瘤细胞表面标记物的流式细胞术分析来测定的。37.根据权利要求35所述的方法，其中所述出现率的降低是使用对已知用于富集肿瘤起始细胞的肿瘤细胞表面标记物的免疫化学检测来测定。38.根据权利要求35所述的方法，其中所述出现率的降低是使用体外或体内有限稀释分析来测定。39.根据权利要求38所述的方法，其中所述出现率的降低是使用体内有限稀释分析来测定的，所述体内有限稀释分析包括将活的人肿瘤细胞移植进免疫能力降低的小鼠中。40.根据权利要求39所述的方法，其中所述出现率的降低是使用体内有限稀释分析来测定的，所述体内有限稀释分析包括用泊松分布统计对肿瘤起始细胞出现率进行定量。41.根据权利要求38所述的方法，其中所述出现率的降低是使用体外有限稀释分析来测定的，所述体外有限稀释分析包括将活的人肿瘤细胞有限稀释沉积进体外集落支持条件中。42.根据权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：SJ戴拉，O富尔德，RA斯图尔，WC安德森，S奥施马，
申请(专利权)人：艾伯维施特姆森特克斯有限责任公司，
类型：发明
国别省市：美国,US