工程化的位点特异性抗体和使用方法技术

提供了新型抗体药物缀合物(ADC)以及使用此类ADC来治疗增殖性病症的方法。

Engineered loci specific antibodies and methods of use

A new type of antibody drug conjugates (ADC) and a method for the use of such ADC for the treatment of proliferative diseases are provided.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】工程化的位点特异性抗体和使用方法相关申请的交叉引用要求2015年3月4日提交的美国临时申请号62/128,424的优先权，将其通过引用以其全文结合于此。序列表本申请含有一份已经以ASCII格式经EFS-Web递交的序列表并且该序列表通过引用以其全文结合于此。创建于2016年3月3日的所述ASCII副本名称为“sc0004pct_030316.txt”并且大小是554KB(567,402字节)。
本申请通常涉及包含具有缀合至细胞毒素的一个或多个未配对半胱氨酸残基的位点特异性抗体或其免疫反应性片段的新型化合物，并且涉及其用于治疗或预防癌症及其任何复发或转移的用途。
技术介绍
许多常用的癌症治疗剂由于其不能选择性地靶向增殖性肿瘤细胞而倾向于引起显著的毒性。而这些传统的化学治疗剂非特异性地起作用，并且经常与肿瘤细胞一起损伤或消除正常增殖的健康组织。这种非预期的细胞毒性常常会限制患者可以忍受的剂量或方案，从而有效地限制了药剂的治疗指数。因此，已作出许多尝试从而以不同的成功程度将细胞毒性治疗剂靶向肿瘤部位。一个有希望的研究领域涉及使用抗体将细胞毒性剂引导到肿瘤，以提供治疗有效的局部药物浓度。就此而言，长期以来已经认识到，使用与所选细胞毒性剂缀合的靶向单克隆抗体(“mAb”)提供了将相对高水平的此类细胞毒性有效载荷直接递送到肿瘤部位，同时减少正常组织对其的暴露。虽然在实验室或临床前环境中广泛探索了这种抗体药物缀合物(“ADC”)的用途，但其在临床中的实际应用受到更多限制。在某些情形中，这些限制是将弱的或无效的毒素与不能充分选择性地或未能有效地和肿瘤缔合的肿瘤靶向分子相组合的结果。在其他情况下，分子构建体在给予时被证明是不稳定的，或者从血流中清除太快而不能以治疗上显著的浓度在肿瘤部位积聚。尽管这种不稳定性可以是接头选择或缀合程序的结果，但也可以是毒性有效载荷对靶向抗体过载(即，药物与抗体比例或“DAR”太高)的结果，从而在药物制剂中产生不稳定的缀合物质。在某些情况下，无论是来自设计还是来自不稳定的DAR种类，构建体不稳定性都导致不可接受的非特异性毒性，因为有效的细胞毒性有效载荷从药物缀合物中过早浸出，并在身体尝试清除未靶定的有效载荷时在注射部位或关键器官中累积。这样，联邦药物管理局迄今已经批准了相对较少的ADC，尽管目前有几种此类化合物正在进行临床试验。因此，仍然需要展现有利的治疗指数的稳定的、相对均匀的抗体药物缀合物制剂。
技术实现思路
这些和其他目的是通过本专利技术提供，在广义上，本专利技术针对提供改善的展现有利的药物代谢动力学和药效特性的位点特异性抗体和缀合物的新型方法、化合物、组合物及制品。本专利技术提供的益处可广泛地适用于抗体治疗和诊断领域，并且可以和与各种靶标反应的抗体结合使用。如以下将详细论述的，所披露的位点特异性缀合物包含具有一个或多个未配对半胱氨酸的工程化抗体构建体，其可以使用新型选择性还原技术优先缀合至治疗性或诊断性有效载荷。当与常规缀合制剂相比时，这种位点特异性缀合物制剂相对稳定，并且对于平均DAR分布和有效载荷位置是基本均匀的。如所附实例所示，所披露的位点特异性缀合物制剂的稳定性和均匀性(关于平均DAR分布和有效载荷定位)提供了有助于改善的治疗指数的有利毒性特征。在一个实施例中，本专利技术针对包含一个或多个未配对半胱氨酸残基的位点特异性工程化抗体。本领域技术人员将理解，根据此处传授，未配对半胱氨酸残基提供了药学活性部分的选择性的和受控的缀合以产生工程化缀合物。在另一个实施例中，本专利技术针对包含至少一个未配对半胱氨酸残基的位点特异性工程化IgG1同种型抗体。在一些实施例中，与重链/重链链间残基相反，该一个或多个未配对半胱氨酸残基将包含重/轻链链间残基。在其他实施例中，未配对半胱氨酸残基将由链内二硫键(或“链内二硫桥”)产生。在另一个实施例中，本专利技术提供工程化抗体，其中包含位点特异性工程化抗体的轻链的C214残基(根据Kabat的EU索引编号)被另一残基取代或缺失。在另一个实施例中，本专利技术提供工程化抗体，其中包含工程化抗体的重链的C220残基(根据Kabat的EU索引编号)被另一残基取代或缺失。在其他所选实施例中，工程化抗体将包含一个或多个未配对半胱氨酸残基，其中该一个或多个未配对半胱氨酸残基不是天然链间二硫键半胱氨酸。本专利技术的又其他方面针对包含一个或多个未配对半胱氨酸残基的工程化抗体，其中该一个或多个未配对半胱氨酸残基不包括形成天然链间二硫键的半胱氨酸。在某些其他方面，未配对半胱氨酸将不包括天然半胱氨酸。在所选实施例中，未配对半胱氨酸将存在于抗体轻链的CL结构域中，并且在某些方面将存在于CL结构域的C末端区域中。在其他所选实施例中，游离半胱氨酸残基将并入抗体轻链恒定区的暴露环结构之一中。在这些实施例中，游离半胱氨酸残基将被定位(通过并入或取代)在残基121-128、残基182-191或残基201-213(Kabat编号)。在其他优选实施例中，游离半胱氨酸残基将包含(通过并入或取代)CL区的β片层上的暴露残基。在某些所选方面，本专利技术的位点特异性抗体将包含含至少一个非天然半胱氨酸的轻链恒定区。在此类实施例中，轻链恒定区可以包含含至少一个非天然半胱氨酸的κ轻链恒定区或含至少一个非天然半胱氨酸的λ轻链恒定区。再其他实施例将包含在残基位置122、190、206、208、210、211、212或213处包含至少一个非天然半胱氨酸的κ轻链恒定区。在其他优选实施例中，位点特异性工程化抗体将包含重链和轻链，其中轻链包含具有选自下组的氨基酸序列的轻链恒定区，该组由以下各项组成：SEQIDNO:550、SEQIDNO:551、SEQIDNO:552、SEQIDNO:553、SEQIDNO:554、SEQIDNO:555、SEQIDNO:556、SEQIDNO:557、SEQIDNO:558、SEQIDNO:559、SEQIDNO:560、SEQIDNO:561、SEQIDNO:562、SEQIDNO:563和SEQIDNO:564。在其他实施例中，工程化抗体将包含位于抗体重链上的未配对半胱氨酸残基。在又其他实施例中，游离半胱氨酸残基将位于CH1结构域内。在再其他实施例中，游离半胱氨酸残基将位于CH2结构域中。在又其他实施例中，游离半胱氨酸残基将位于CH3结构域中。在优选的实施例中，位点特异性工程化抗体将与存在于肿瘤发生细胞上的抗原性标记物发生免疫特异性反应。因此，在特别优选的实施例中，本专利技术针对包含一个或多个未配对半胱氨酸残基的工程化抗体，其中该工程化抗体与选自下组的决定簇发生免疫特异性反应，该组由以下各项组成：DLL3、SEZ6和CD324，其各自已知为肿瘤标记物。在相关实施例中，位点特异性抗体用于制造工程化缀合物，其中该一个或多个游离半胱氨酸与治疗剂或诊断剂缀合。就此而言，本专利技术包含具有下式的抗体药物缀合物：Ab-[L-D]n或其药学上可接受的盐，其中Ab包括包含一个或多个未配对半胱氨酸残基的抗体，其中该一个或多个未配对半胱氨酸残基不包含形成天然链间二硫键的半胱氨酸；L包括任选的接头；D包括药物；并且n是从约1到约12的整数。除了上述抗体药物缀合物之外，本专利技术还提供通常包含所披露的ADC的药物组合物和使用此类ADC来诊断本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种包含一个或多个未配对半胱氨酸残基的工程化抗体，其中该一个或多个未配对半胱氨酸残基不包含形成天然链间二硫键的半胱氨酸。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.03.04 US 62/1284241.一种包含一个或多个未配对半胱氨酸残基的工程化抗体，其中该一个或多个未配对半胱氨酸残基不包含形成天然链间二硫键的半胱氨酸。2.根据权利要求1所述的工程化抗体，其中该工程化抗体包括IgG1抗体。3.根据权利要求1或2所述的工程化抗体，其中该工程化抗体包含CL结构域，并且该CL结构域包含κCL结构域。4.根据权利要求1或2所述的工程化抗体，其中该工程化抗体包含CL结构域，并且该CL结构域包含λCL结构域。5.根据权利要求1至4中任一项所述的工程化抗体，其中该工程化抗体包括单克隆抗体。6.根据权利要求1至5中任一项所述的工程化抗体，其中该工程化抗体包含人源化抗体或CDR移植的抗体。7.根据权利要求1至6中任一项所述的工程化抗体，其中该工程化抗体包含两个未配对半胱氨酸残基。8.根据权利要求7所述的工程化抗体，其包含两条轻链，其中每条轻链包含该两个未配对半胱氨酸残基之一。9.根据权利要求8所述的工程化抗体，其中该两个未配对半胱氨酸残基中的每一个存在于这些轻链的CL结构域中。10.如权利要求8所述的工程化抗体，其中该两个未配对半胱氨酸残基中的每一个存在于这些轻链的CL结构域的C末端区域中。11.如权利要求8所述的工程化抗体，其中该两个未配对半胱氨酸残基中的每一个位于该CL结构域的暴露的环结构中。12.如权利要求8所述的工程化抗体，其中两个未配对半胱氨酸残基中的每一个位于选自该CL结构域的残基121-128、残基182-191或残基201-213中任一个的位置处，其中这些残基根据Kabat进行编号。13.如权利要求8所述的工程化抗体，其中该抗体轻链包含具有选自下组的氨基酸序列的CL，该组由以下各项组成：SEQIDNO:550、SEQIDNO:551、SEQIDNO:552、SEQIDNO:553、SEQIDNO:554、SEQIDNO:555、SEQIDNO:556、SEQIDNO:557、SEQIDNO:558、SEQIDNO:559、SEQIDNO:560、SEQIDNO:561、SEQIDNO:562、SEQIDNO:563和SEQIDNO:564。14.如权利要求7所述的工程化抗体，其包含两条重链，其中每条重链包含该两个未配对半胱氨酸残基之一。15.如权利要求14所述的工程化抗体，其中该两个未配对半胱氨酸残基中的每一个位于选自下组的抗体结构域内，该组由以下各项组成：CH1结构域、CH2结构域和CH3结构域。16...

【专利技术属性】
技术研发人员：D刘，VN西索迪亚，J梁，
申请(专利权)人：艾伯维施特姆森特克斯有限责任公司，
类型：发明
国别省市：美国,US