一种稳定的抗体制剂制造技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，本发明专利技术公开了一种稳定的抗体制剂。更具体地，本发明专利技术公开了一种包含玻璃酸酶和环糊精的高浓度的抗EGFR抗体制剂，该制剂具有良好的稳定性，尤其适合于皮下注射。可用于治疗人的头颈部鳞状上皮癌、结肠直肠癌、胰腺癌、非小细胞肺癌、膀胱癌等疾病。

Stable antibody preparation

The invention relates to the field of biotechnology, and discloses a stable antibody preparation. More particularly, the present invention discloses a high concentration of anti EGFR antibody preparation comprising a glass enzyme and a cyclodextrin, which has good stability and is especially suitable for subcutaneous injection. Can be used for the treatment of human head and neck squamous cell carcinoma, colorectal cancer, pancreatic cancer, non-small cell lung cancer, bladder cancer and other diseases.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物医药
，更具体地，本专利技术公开了一种稳定的制剂。
技术介绍
表皮生长因子受体(EGFR)是一种上皮生长因子细胞增殖和信号传导的重要受体，EGFR通过与其配体相结合来产生效应。EGFR的特异性配体为EGF和EGF相关多肽，包括转化生长因子α(TGF-α)、双调蛋白和肝素结合EGF样生长因子。为了激活EGFR，配体EGF(单体)同时结合并连接两个相邻的受体链，使受体的胞内激酶局域在多个酪氨酸上相互磷酸化，酪氨酸激酶活性提高从而可以激活数个信号通路如ras-MAPK通路，PI3激酶通路以及JAK/STAT通路等。EGFR受体过表达或突变后结构激活(不需要配体)以及自分泌刺激导致的过度EGFR功能与多种癌症发生相关。EGFR的致瘤效应包括DNA合成启动、促进细胞生长、侵袭以及转移，特异性敲除EGFR可导致细胞周期俘获、细胞凋亡以及癌细胞的分化。研究发现，EGFR在多种人上皮组织来源的癌症(如膀胱、乳腺、宫颈、结肠、头颈、肾、肺、胰腺、以及前列腺等)中有不同水平的表达，EGFR在结肠直肠癌表达率高达25－77％，且与肿瘤的恶化以及不良预后相关。正因为EGFR具有上述特点，以EGFR为靶点的抗体药物不断被开发，有的产品已被用于肿瘤治疗的临床实践：(爱必妥、cetuximab、西妥昔单抗)是Imclone公司开发的一种鼠/人嵌合的单克隆抗EGFR抗体。是一种无菌、澄明、无色液体，pH7.0至7.4，其中可能含小量容易可见、白色、无定形西妥昔单抗微粒。每小瓶Erbitux包含：2mg/mL的cetuximab、8.48mg/mL的氯化钠、1.88mg/mL的磷酸氢二钠七水、0.41mg/mL磷酸二氢钠一水合物，和注射用水(USP)。Cetuximab可以与EGFR受体以高出内源配体约5到10倍的亲和力与EGFR特异结合，从而竞争性拮抗配体与EGFR的结合，封锁受体与配体的结合继而抑制配体介导的EGFR酪氨酸激酶的激活，从而使肿瘤细胞或肿瘤微环境中的基质细胞中多种由EGFR信号通路调节的细胞过程被阻断，包括EGFR下调，细胞内信号的抑制，细胞周期的抑制，凋亡的诱导，DNA修复的抑制，血管生成的抑制，肿瘤细胞运动性、侵袭性以及转移性的抑制等等。美国FDA于2004年2月批准用于结直肠癌的治疗，2006年FDA还批准其用于治疗头颈部肿瘤。(帕尼单抗、panitumumab)是由Amgen公司开发的一种用于治疗化疗失败后转移性结直肠癌的抗EGFR全人源单克隆抗体，是一种无菌、无色、pH5.6至6.0的液体制剂，有5mL、10mL、20mL三种规格，其中5mL规格的单次用小瓶含100mg的panitumumab、29mg的氯化钠、34mg醋酸钠，和注射用水，USP；10mL规格的单次用小瓶含200mg的panitumumab、58mg的氯化钠、68mg的醋酸钠，和注射用水，USP；20mL规格的单次用小瓶含400mg帕尼单抗、117mg氯化钠、136mg醋酸钠、和注射用水，USP。2006年被美国FDA批准用于治疗转移结肠癌。201010148069.0公开了一种具有高亲和力的抗EGFR单克隆抗体和其在制备抗肿瘤药物中的用途；其中重链可变区(VH)的氨基酸序列为SEQIDNO：14，轻链可变区(VL)的氨基酸序列为SEQIDNO：6或SEQIDNO：12的抗体与EGFR的亲和力和Cetuximab相比提高至少10倍。……但是，现有的这些抗EGFR抗体的制剂均是低浓度的制剂，其并不适合于皮下注射，因为用于皮下注射的药物溶液的体积比静脉内输注体积小得多，所以其要求抗体制剂浓度通常高达几十、甚至几百mg/ml的水平。而皮下注射给药与静脉注射给药相比，使用更为方便快捷、安全可靠，且有助于提高患者的生活质量、减少病人的就诊时间，目前已成为未来的发展方向。但是，高浓度的抗体溶液相对于低浓度的制剂来说更不稳定，易发生蛋白质聚集，而聚集易造成活性抗体的生物利用率减少、药物代谢动力学改变、不利的免疫原性等问题的发生(Frokjaer，S.和Otzen，D.Ε.，Nat.Rev.Drug.Discov.4:298_306(2005)；Jiskoot,W.和Crommelin，D.J.A.，EJHPPractice12：20-21(2006))。目前防止聚集常见策略一是通过添加赋形剂至蛋白质溶液，常使用的稳定剂包括糖、盐、游离氨基酸、多元醇、聚乙二醇(PEG)和可以减少蛋白质-蛋白质相互作用的其他聚合物，如聚山梨酯(polysorbates)或泊洛沙姆(Nema,S.^A,PDAJournalofPharmaceuticalScienceandTechnology51:166-171(1997))；或者通过加入适当的赋形剂(包括冻干保护剂)低压冻干来防止蛋白质聚集。但是，这些策略应用于需要上百mg/ml以上的高浓度注射制剂时，效果不是很理想。因此，如何开发一种适于皮下注射用的高浓度的稳定的抗体制剂仍是非常必要的。
技术实现思路
本专利技术的申请人经过大量的研究实验，开发了一种高浓度的稳定的抗体制剂，该制剂包含玻璃酸酶和环糊精；该制剂配方尤其适合于制备注射用的高浓度抗EGFR抗体制剂。具体地，本专利技术公开了：1、一种稳定的高浓度抗体制剂，其包含：抗体、玻璃酸酶和环糊精。2、上述1所述的制剂，其还包括一种或多种稳定剂、非离子型表面活性剂或缓冲剂。3、一种稳定的高浓度抗体制剂，其包含：a.浓度50mg/ml以上的抗体；b.1至150mM缓冲剂；c.15至250mM糖；d.0.01至0.1％的非离子型表面活性剂；e.40000个U/ml以上的玻璃酸酶；和f.20％至50％的环糊精。4、上述1-3任一所述制剂，其特征在于，所述玻璃酸酶为rHuPH20。5、上述1-4任一所述制剂，所述环糊精为HP-β环糊精。6、上述1-4任一所述制剂，所述糖为80至150mM蔗糖。7、上述1-6任一所述制剂，所述非离子型表面活性剂选自下组：聚山梨酯20、聚山梨酯80、和聚乙烯-聚丙烯共聚物。8、上述7所述的非离子型表面活性剂为浓度是0.02％至0.08％的聚山梨酯80。9、上述1-5任一所述制剂，所述抗体为浓度100至250mg/ml的抗EGFR抗体。10、一种稳定的高浓度抗体制剂，其包含：a.浓度100到300mg/ml的抗EGFR抗体；b.50至150mM的组氨酸缓冲剂；c.100至150mM蔗糖；d.0.02％至0.08％的聚山梨酯80；e.40000个U/ml至70000个U/ml的rHuPH20；和f.15％至40％的HP-β环糊精。实验结果表明，本专利技术的制剂可有效防止高浓度抗体在长期储存过程中发生聚集，从而提供了一种具有良好稳定性的抗体制剂，该制剂即使在常温下也具有较好的稳定性，保证制剂合理的保质期。本专利技术的抗EGFR抗体制剂，其可用于治疗人的头颈部鳞状上皮癌、结肠直肠癌、胰腺癌、非小细胞肺癌、膀胱癌等。优选地可作为注射用水性溶液制剂使用，更优选的可将溶液充装在预充式注射器中通过皮下注射使用。具体实施方式下面的实施例是为了举例说明本专利技术并帮助本领域技术人员进行和使用本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种稳定的高浓度抗体制剂，其包含：抗体、玻璃酸酶和环糊精。

【技术特征摘要】
1.一种稳定的高浓度抗体制剂，其包含：抗体、玻璃酸酶和环糊精。2.根据权利要求1所述的制剂，其还包括一种或多种稳定剂、非离子型表面活性剂或缓冲剂。3.一种稳定的高浓度抗体制剂，其包含：a.浓度50mg/ml以上的抗体；b.1至150mM缓冲剂；c.15至250mM糖；d.0.01至0.1％的非离子型表面活性剂；e.40000个U/ml以上的玻璃酸酶；和f.20％至50％的环糊精。4.根据权利要求1-3任一所述制剂，其特征在于，所述玻璃酸酶为rHuPH20。5.根据权利要求1-3任一所述制剂，所述环糊精为HP-β环糊精。6.根据权利要求1-3任一所述制剂，所述糖为80至150mM蔗糖。7.根据权利要求1-3任一所述制剂，所述非离子型表面活性剂选自下组：聚山梨...

【专利技术属性】
技术研发人员：黎健荣，张彦，胡湘丽，董玮婷，顾云凯，
申请(专利权)人：上海抗体药物国家工程研究中心有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31