抗PD-L1抗体及其作为治疗剂及诊断剂的用途制造技术

本发明专利技术提供特异性结合至编程性死亡‑1(PD1、Pdcd‑1或CD279)配体(PD‑L1)并抑制免疫细胞中PD‑L1介导的细胞信号传导及活性的抗体，结合至配体结合所需要的一组氨基酸残基的抗体，及这些抗体治疗或诊断由PD‑L1介导功能所调控的癌症、传染性疾病或其它病理学病症的用途。

L1 anti PD antibody and their use as a therapeutic agent and diagnostic agent

The present invention provides specific binding to the programmed death 1 (PD1, Pdcd 1 or CD279 ligand (PD) L1) antibody and inhibits cell signal transduction and activity of immune cells in PD mediated by L1, an antibody that binds to the ligand binding groups of amino acid residues required, and use these antibody treatment or diagnosis by PD L1 mediated function regulation of cancer, infectious disease or other pathological conditions.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】专利技术背景PD-L1最初是作为B7蛋白家族中的成员(称为B7-H1)克隆(Dong等人，1999NatureMed5:1365)。PD-L1结合至编程性死亡-1(ProgrammedDeath-1；PD-1)受体及活化负调节信号传导途径，从而抑制T细胞增殖及活性(Freeman等人，2000JExpMed192:1027)。因此，PD-L1也被称为PD-1配体1(PD-L1或CD274)。迄今为止，两种序列相关配体PD-L1(B7-H1)与PD-L2(B7-DC)经鉴定为与PD-1相互作用，诱导负信号转导，且抑制TCR及CD28介导的T细胞活化、细胞增殖及生长因子与细胞因子(诸如IL-2与IFN-γ)的分泌(Riley等人，2009ImmunolRev229:114)。人类PD-L1基因编码具有前导肽的290个氨基酸残基(NCBI登录号NP_054862.1)的全长蛋白，而在细胞表面上作为成熟蛋白表达PD-L1之后移除该前导肽。全长PD-L1的计算分子量为33kD。然而，基于来自我们及其他人的Western印迹数据，由于糖基化，观察分子量为约50kD。发现PD-L1被组成性表达在人类心、肺、胸腺及血管内皮细胞中，并在许多其它人类组织及细胞类型中以低水平表达，这些细胞类型包括抗原呈递细胞、外周血单核细胞及其它免疫细胞(Freeman等人，2000JExpMed192:1027；Eppihimer等人，2002Microcirculation9:133)。当受到IFN-γ、IL-12及I型干扰素刺激时，发现那些细胞类型中的许多类型表达出升高水平的PD-L1(Bald等人，2014CancerDiscov4:674-687；Planes等人，2014JVirol88:6672-6689)。在各种涉及不同类型组织及器官的癌症方面，报告了肿瘤细胞中PD-L1表达的异常上调，这些组织及器官诸如肺(Konishi等人，2004ClinCancerRes10:5094)、肝(Shi等人，2008IntJCancer128:887；Gao等人，2009ClinCancerRes15:971)、胃(Wu等人，2006ActaHistochem108:19)、肾(Thompson等人，2004ProcNatlAcadSci101:17174；Thompson等人，2007ClinCancerRes13:1757)、乳腺(Ghebeh等人，2006Neoplasia8:190)、卵巢(Hamanishi等人，2007ProcNatlAcadSci104:3360)、胰腺(Nomi等人，2007ClinCancerRes13:2151)、黑色素细胞(Hino等人，2010Cancer116:1757)及食道(Ohigashi等人，2005ClinCancerRes11:2947)。更经常地，那些癌症中的PD-L1表达升高与患者存活结局的不良预后关联。通过B7-H1Ig或抗PD-L1抗体阻断PD-L1接合PD-1受体刺激了T细胞增殖及功能活性(Dong等人，1999NatureMed5:1365；Freeman等人，2000JExpMed192:1027；Tamura等人，2001Blood97:1809；Iwai等人，2002PNAS99:12293)，增强了对抗肿瘤生长及病毒感染的免疫应答(Iwai等人，2002PNAS99:12293)。那些观察结果提示，PD-L1/PD-1信号传导的抑制可活化免疫应答，这些免疫应答不仅对抗癌细胞生长，而且对抗人体内的病毒感染及扩增。流行性肝细胞感染病毒HBV及HCV诱导肝细胞中PD-1配体的过表达且活化T效应细胞中的PD-1信号传导，从而引起T细胞耗竭及对病毒感染的耐受性(Boni等人，2007JVirol81:4215；Golden-Mason等人，2008JImmunol180:3637)。同样地，流行HIV感染常常通过类似机制避开人类免疫系统。通过拮抗剂分子对PD-L1诱导的信号传导的治疗性调控可自耐受反转免疫细胞，并经再活化以根治癌症及慢性病毒感染(Blank等人，2005CancerImmunolImmunother54:307；Okazaki等人，2007IntImmunol19:813)。近期发现，除了结合至PD-1之外，PD-L1也与B7-1(另一个B7家族成员，也称为CD80)特异性相互作用(Butte等人，2007Immunity27:111)。初步证据提示，PD-L1与CD80的相互作用施加负调节至T细胞功能及活性，并且小鼠体内PD-L1与CD80相互作用的阻断引起对OVA抗原攻击更加强烈的免疫应答(Park等人，2010Blood116:1291)。因此，同时阻断PD-L1结合至PD-1及CD80可施加对抗癌症及病毒感染的叠加或协同效应。专利技术概述本专利技术提供通过抑制PD-L1介导的信号传导及功能达成免疫活化的方法及组合物。在一个方面中，本专利技术提供一种抗体抗原结合域，该抗体抗原结合域特异性结合人类PD-L1，且包含本文所描述的互补决定区(complementaritydeterminingregion；CDR)序列。CDR可经历重组成为重链可变区(Vh)及轻链可变区(Vk)，这些区分别包含(CDR-H1、CDR-H2及CDR-H3)及(CDR-L1、CDR-L2及CDR-L3)序列，且保留特异于PD-L1的结合及/或功能性。在特定实施方案中，域包含CDR1、CDR2及CDR3，处于选自如下(a)-(r)的组合中，其中在第一列中显示抗体(Ab)、重链(HC)或轻链(LC)及衍生CDR组合的CDR命名系统(Kabat、IMGT或复合)，且粗体字的残基为Kabat系统，而加下划线的残基为IMGT系统：在特定实施方案中，域包含重链可变区(Vh)及轻链可变区(Vk)，该重链可变区包含选自(a)-(o)的CDR1、CDR2及CDR3组合，该轻链可变区包含选自(p)-(r)的CDR1、CDR2及CDR3组合。在特定实施方案中，域包含CDR1、CDR2及CDR3，处于选自(c)、(f)、(i)、(l)、(o)及(r)的组合中，如下：在特定实施方案中，域包含重链可变区(Vh)或轻链可变区(Vk)，可变区包含以下序列：在特定实施方案中，域包含重链可变区(Vh)及轻链可变区(Vk)，可变区包含以下序列：在特定实施方案中，域包含重链可变区(Vh)或轻链可变区(Vk)，可变区包含：hu333-4B2vh(SEQIDNO：22)；或hu333-4B2vk(SEQIDNO：23)。在特定实施方案中，域包含重链可变区(Vh)及轻链可变区(Vk)，可变区包含：hu333-4A2vh及vk(SEQIDNO：21及23)；或hu333-4B2vh及vk(SEQIDNO：22及23)。在特定实施方案中，域特异性结合PD-L1残基：D26及R113。本专利技术也提供包含主题PD-L1结合域的抗体(尤其是单克隆抗体)及F(ab)或F(ab)2。本专利技术也提供编码主题PD-L1抗原结合域的新颖多核苷酸(诸如cDNA及表达载体)，及包含此类多核苷酸的细胞，及包含此类细胞的非人类动物。可将多核苷酸可操作地本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种抗体抗原结合域，其特异性结合人类PD‑L1且包含互补决定区(CDR)1、CDR2及CDR3，这些互补决定区处于选自如下(a)‑(r)的组合中，其中在第一列中显示抗体(Ab)、重链(HC)或轻链(LC)及衍生该CDR组合的CDR命名系统(Kabat、IMGT或复合)，且粗体字的残基为Kabat系统，加下划线的残基为IMGT系统：

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.07.03 CN PCT/CN2014/0815811.一种抗体抗原结合域，其特异性结合人类PD-L1且包含互补决定区(CDR)1、CDR2及CDR3，这些互补决定区处于选自如下(a)-(r)的组合中，其中在第一列中显示抗体(Ab)、重链(HC)或轻链(LC)及衍生该CDR组合的CDR命名系统(Kabat、IMGT或复合)，且粗体字的残基为Kabat系统，加下划线的残基为IMGT系统：2.如权利要求1所述的抗体抗原结合域，其包含重链可变区(Vh)及轻链可变区(Vk)，该重链可变区包含选自(a)-(o)的CDR1、CDR2及CDR3组合，该轻链可变区包含选自(p)-(r)的CDR1、CDR2及CDR3组合。3.如权利要求1所述的抗体抗原结合域，其包含CDR1、CDR2及CDR3，其处于选自(c)、(f)、(i)、(l)、(o)及(r)的组合中，如下：4.如权利要求1所述的抗体抗原结合域，其包含重链可变区(Vh)或轻链可变区(Vk)，该可变区包含以下的序列：5.如权利要求1所...

【专利技术属性】
技术研发人员：康延申，李康，宋兢，张彤，李玉成，任志英，
申请(专利权)人：百济神州有限公司，
类型：发明
国别省市：开曼群岛;KY