室温稳定的疫苗的干燥制剂制造技术

本发明专利技术公开了包含活的减毒病毒、糖稳定剂和氨基酸稳定剂的室温稳定的疫苗的干燥制剂。本发明专利技术还公开了此类疫苗的制造和通过施用此类疫苗保护动物的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】相关申请的交叉引用本申请根据35U.S.C.§119(e)要求2013年9月27日提交的临时申请美国序列号61/883,611的优先权，其内容在此处以其整体通过引用并入。专利
本专利技术涉及包含一种或多种活的减毒病毒的疫苗的室温稳定的干燥制剂。本专利技术还涉及此类疫苗的干燥制剂的制造和用所述疫苗接种动物受试者的方法。背景当在室温下储存长时间段时，活的减毒病毒是不稳定的。因此，大多数活的减毒病毒疫苗在使用前冷冻干燥和冷藏。然而，此类疫苗的运输和储存导致必须传递至疫苗诊所、兽医、家畜操作者/农民且最终传递至宠物所有者或消费者的显著额外费用。此类费用可证明在贫困社区和第三世界国家中是禁止性的。因此，对于人BCG疫苗，WHO需要在37℃下28天之后的>20%的最小存活率[参见例如，Jin等人,Vaccine29:4848-4852(2011)]。存在大量可以感染伴侣动物(诸如狗、猫和马)或家畜(诸如家禽、牛和猪)的病毒。例如，虽然由于相应的病毒感染的症状例如可以包括轻度感冒样症状，但其它可以是快速致命的，如犬瘟热病毒(CDV)感染的情况[参见例如US2010/0196420]。事实上，CDV触发可以涉及眼、呼吸道、胃肠道、皮肤和神经系统的多系统感染。来自犬细小病毒(CPV)的死亡率也相对高[参见例如US2009/0010955]。CPV主要是肠病原体，其感染犬，尤其是幼犬，并且特征在于在超过4至5周龄的犬和幼犬中的急性腹泻、发热和白细胞减少症。甚至更年幼的犬可患有心肌疾病。犬瘟热病毒和犬细小病毒是需要保护幼犬/犬不受其害的两种最重要的犬病毒。其它犬病毒包括：犬副流感(CPI)病毒，其是引起促成上呼吸道疾病和传染性气管支气管炎传染的呼吸系统疾病的高度传染性病毒；导致传染性肝炎的犬1型腺病毒(CAV1)；和高度传染性且可以引起严重类型的呼吸系统疾病的犬流感病毒(CIV)。已报道，CIV能够引起100%感染，伴随80%发病率，和在严重感染中高达5-8%的死亡率[Crawford等人，Science310(5747)：482-485(2005)；U.S.7,959,929B2]。类似地，存在困扰猫的许多猫病毒，包括猫杯状病毒(FCV)、猫白血病病毒(FeLV)、猫泛白细胞减少症病毒(FPLV)、猫冠状病毒(FCoV)和猫鼻气管炎(FVR)病毒。还存在大量可以感染牛的病毒。此类病毒包括牛病毒性腹泻病毒1型和2型(BVDV1和BVDV2)、感染性牛鼻气管炎(IBR)病毒、副流感3型(PI3)、牛呼吸道合胞病毒(BRSV)和牛呼吸道冠状病毒(BRCV)。此外，存在许多也可以感染牛的细菌，包括多杀性巴氏杆菌(Pasteurellamultocida)、溶血性曼氏杆菌(Mannheimiahaemolytica)、睡眠嗜组织菌(Histophilussomni)和牛支原体(Mycoplasmabovis)。类似地，存在大量可以感染家禽的病毒。此类病毒包括感染性支气管炎病毒(IBV)、感染性法氏囊病病毒(IBDV)、鸡新城疫病毒(NDV)、感染性喉气管炎(ILTV)、马立克氏病病毒(MDV)、火鸡疱疹病毒(HVT)(其也被称为MDV3)和禽类偏肺病毒(aMPV)。此外，存在许多也可以感染家禽的细菌，包括多杀性巴氏杆菌(Pasteurellamultocida)、沙门氏菌属(Salmonellassp.)、大肠杆菌、支原体属(Mycoplasmassp.)、paragallinararum禽杆菌(Avibacteriumparagallinararum)、丹毒菌属(Erysipelasssp.)、弯曲杆菌属(Campylobacterssp.)、弧菌属(Vibriossp.)、产气荚膜梭状芽孢杆菌(Clostridiumperfringens)和寄生虫诸如艾美球虫。而且，存在许多可以感染猪的病毒。此类病毒包括猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRS)、猪圆环病毒(PCV)、传染性胃肠炎病毒(TGE)、猪伪狂犬病病毒(PPRV)、猪细小病毒(PPV)、猪流感病毒(SIV)、猪轮状病毒(PRV)和猪流行性腹泻病毒(PED)。此外，存在许多也可以感染猪的细菌，包括多种血清型的多杀性巴氏杆菌(Pasteurellamultocida)、沙门氏菌属(Salmonellassp.)、多种菌毛(pillus)类型的大肠杆菌、副猪嗜血杆菌(Haemophilusparasuis)、胞内劳森氏菌(Lawsoniaintracellularis)、支原体属(Mycoplasmassp.)、支气管炎博德特氏菌(Bordetellabronchiseptica)、丹毒菌属(Erysipelasssp.)、弯曲杆菌属(Campylobacterssp.)、胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacilluspleuropneumonia)、产气荚膜梭状芽孢杆菌(Clostridiumperfringens)和艰难梭状芽孢杆菌(Clostridiumdifficile)。目前广泛接受的是，预防由于动物中的病毒感染的疾病的最佳方法是针对这些病毒接种该动物。仅作为一个实例，在狗中，犬瘟热病毒疫苗已显著降低相应疾病的流行率。类似地，传染性犬肝炎已被犬腺病毒-2疫苗(CAV2)极大限制。在疫苗中使用活的减毒CAV2代替紧密相关的CAV1消除了关于以下的担忧，即在已用活的减毒CAV1接种的犬中观察到的间质性肾炎和角膜混浊[Taguchi等人，CanVetJ.52(9)：983–986(2011)]。此外，可以安全地施用多价活的减毒病毒疫苗，其限制需要的疫苗注射次数。因此，存在几种商购可得的多价活的减毒犬病毒疫苗，其防御犬瘟热、传染性犬肝炎、犬细小病毒和犬副流感病毒。此外，更新的多价疫苗还进一步防御犬流感病毒。然而，仍然非常需要可以在室温下运输和储存的减毒活病毒疫苗，诸如犬病毒疫苗。本文任何参考文献的引用不应解释为承认此参考文献可用作本申请的“现有技术”。专利技术概述为了克服现有疫苗的缺陷，本专利技术提供可以在室温下运输和/或储存的活的减毒疫苗(例如病毒疫苗)的新型稳定的干燥制剂，以及其相应的免疫原性组合物。这些干燥制剂在27℃下持续长时间诸如12个月、18个月或甚至更长(例如，1.5至3年)保持有效。在某些实施方案中，活的减毒疫苗是禽类疫苗。在这种类型的具体实施方案中，活的减毒禽类疫苗是包含活的减毒家禽病毒的家禽疫苗。在这种类型的更具体实施方案中，活的减毒家禽疫苗是包含活的减毒鸡病毒的鸡疫苗。在这种类型的替代实施方案中，活的减毒本文档来自技高网...

【技术保护点】
疫苗的干燥制剂，其包含活的减毒病毒、30%至80% (w/w)的非还原性寡糖、5%至40% (w/w)的氨基酸稳定剂、2%至20% (w/w)的蛋白稳定剂和具有6.0至8.0的pH的缓冲剂。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2013.09.27 US 61/8836111.疫苗的干燥制剂，其包含活的减毒病毒、30%至80%(w/w)的非还原性寡糖、5%至40%
(w/w)的氨基酸稳定剂、2%至20%(w/w)的蛋白稳定剂和具有6.0至8.0的pH的缓冲剂。
2.权利要求1的干燥制剂，其进一步包含2%至25%(w/w)的填充稳定剂，且其中所述填
充稳定剂与所述非还原性寡糖的比率为0.05至0.40。
3.权利要求1或2的干燥制剂，其中所述活的减毒病毒是选自犬瘟热病毒、腺病毒、副流
感病毒、编码和表达异源抗原的重组病毒载体及其任何组合的活的减毒病毒。
4.权利要求3的干燥制剂，其中所述活的减毒病毒是选自犬瘟热病毒(CDV)、犬腺病毒2
型(CAV2)、犬副流感病毒(CPI)和编码和表达异源抗原的重组犬副流感病毒载体(rCPI)及
其任何组合的活的减毒犬病毒。
5.权利要求4的干燥制剂，其进一步包含犬细小病毒(CPV)和2%至5%(w/w)山梨糖醇。
6.权利要求3的干燥制剂，其进一步包含细小病毒(CPV)和2%至5%(w/w)山梨糖醇。
7.权利要求1至6的干燥制剂，其中所述非还原性寡糖选自蔗糖、海藻糖、棉子糖及其任
何组合；且其中pH为6.2至7.5。
8.权利要求1至7的干燥制剂，其中所述填充稳定剂是甘露糖醇。
9.权利要求1至8的干燥制剂，其中所述氨基酸稳定剂是精氨酸。
10.权利要求9的干燥制剂，其中所述氨基酸稳定剂进一步包含谷氨酸盐。
11.权利要求1至10的干燥制剂，其进一步包含0.02%至1%(w/w)的二价阳离子的盐，所
述二价阳离子选自Mg++、Ca++和Zn++。
12.权利要求1至11的干燥制剂，其在被干燥之前，所述疫苗已经通过选自以下的方法
处理：将其应用于膜，将其冷冻为珠粒，将其在小瓶中冷冻，喷雾干燥，喷雾冷冻干燥，和将
其诱导以起泡。
13.权利要求1至12的干燥制剂，其中所述蛋白稳定剂选自明胶、全酪蛋白的蛋白水解
水解产物及其组合。
14.权利要求1至13的干燥制剂，其中所述非还原性寡糖是20%至80%(w/w)蔗糖和18%
至66%(w/w)海藻糖的组合；所述填充稳定剂是5%至17%(w/w)甘露糖醇；所述氨基酸稳定
剂是9%至34%(w/w)；其中所述蛋白稳定剂包含2%至5%(w/w)明胶和2%至6%(w/w)的全酪
蛋白的蛋白水解水解产物；且其中所述填充稳定剂与所述非还原性寡糖的比率为0.08至
0.37。
15.权利要求14的干燥制剂，其中所述非还原性寡糖是45%至60%(w/w)蔗糖和15%至
25%(w/w)海藻糖的组合；所述填充稳定剂是5%至17%(w/w)甘露糖醇；所述氨基酸稳定剂
是10%至25%(w/w)精氨酸；且其中所述蛋白稳定剂包含1.5%至3.5%(w/w)明胶和2%至4%
(w/w)的全酪蛋白的蛋白水解水解产物。
16.针对选自犬瘟热病毒、腺病毒、副流感病毒和细小病毒的病毒接种动物的方法，其
包括将权利要求1至15的干燥制剂与药学上可接受的载体混合以形成液体疫苗，然后将所
述液体疫苗施用于犬。
17.针对选自犬瘟热病毒(CDV)、犬腺病毒2型(CAV2)、犬副流感病毒(CPI)和犬细小病
毒(CPV)的犬病毒接种犬的方法，其包括将权利要求1至15的干燥制剂与药学上可接受的载
体混合以形成液体疫苗，然后将所述液体疫苗施用于犬。
18.制备室温稳定的疫苗的干燥制剂的方法，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：乔志松，K奥康内尔，
申请(专利权)人：英特维特国际股份有限公司，
类型：发明
国别省市：荷兰;NL