用于位点特异性偶联的工程改造的Fc区制造技术

提供用于位点特异性偶联于多种药剂的Fc区。还提供用于设计、制备、筛选、选择和使用所述Fc区的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于位点特异性偶联的工程改造的Fe区I.相关申请的交叉参考本申请要求2009年6月22日提交的美国临时申请No. 61/219，225的优先权，所述申请的全部内容以引用的方式并入本文。2.序列表参考本申请以引用的方式并入以文本文件形式与本申请一起提交的序列表，所述文本文件的名称为“MED0455. PCT_ST25”，于2010年6月14日创建并且大小为69千字节。3.专利
本专利技术涉及产生用于偶联反应的基团的Fe区。还提供设计、修饰、制备和使用所述Fe区的方法。4.
技术介绍
4. I癌症和癌症疗法每年有超过一百二十万美国人患上癌症。在美国癌症是死亡的第二主要病例，并且如果按照当前趋势继续下去，那么预期到2010年，癌症将成为死亡的主要原因。在美国，肺癌和前列腺癌是男性的最大癌症杀手。而肺癌和乳癌是美国女性的最大癌症杀手。在美国，每两名男性中就有一名在他生命中的某一时间被诊断患有癌症。而在美国，每三名女性中就有一名在她生命中的某一时间被诊断患有癌症。当前的治疗选择，如手术、化学疗法和辐射治疗，经常无效或者存在严重的副反应。开发抗转移剂的一个障碍是用于设计和评估这些药物的测定系统。最常规的癌症疗法靶向快速生长的细胞。然而，癌细胞并不一定生长得较快，而是能够在不允许正常细胞存活和生长的条件下存活和生长(Lawrence和Steeg, 1996, World J. Urol. 14 124-130)。正常细胞和恶性细胞行为之间的这些基本差异对于治疗靶向提供了机会。微转移肿瘤已在体内散布的范例强调需要在外来和三维微环境的情形中评估潜在化学治疗药物。许多标准癌症药物测定测量在典型细胞培养条件(即，单层生长)下的肿瘤细胞生长或存活。然而，二维测定中的细胞行为通常并不能可靠地预测体内的肿瘤细胞行为。当前，癌症疗法可能涉及手术、化学疗法、激素疗法和/或辐射治疗来根除患者体内的赞生性细胞(参见，例如 Stockdale, 1998, “Principles of Cancer PatientManagement”，Scientific American :Medicine,第 3 卷，Rubenstein 和 Federman 编著，第12章，第IV节)。所有这些方法都对患者造成明显的缺陷。例如，手术可能因患者的健康原因而不能使用或者可能不为患者所接受。另外，手术可能不能完全去除赘生性组织。辐射疗法仅在赘生性组织显示比正常组织对辐射的敏感性高的时候有效，并且辐射疗法通常也会引起严重的副作用。激素疗法极少作为单一药剂给予，并且尽管可能有效，但通常用于在其它治疗已去除了大部分癌细胞后预防或延迟癌症的复发。关于化学疗法，有多种可用于治疗癌症的化学治疗剂。很大部分的癌症化学治疗剂是通过抑制DNA合成来起作用(参见,例如Gilman等，Goodman and Gilman’ s ThePharmacological Basis of Therapeutics,第八版(Pergamon Press, New York, 1990))。因而，化学治疗剂在本质上是非特异性的。此外，几乎所有的化学治疗剂都是有毒性的，并且化学疗法会引起明显的并且通常是危险的副作用，包括严重恶心、骨髓抑制、免疫抑制等(参见，例如 Stockdale, 1998,“Principles Of Cancer Patient Management”，ScientificAmerican Medicine,第 3 卷，Rubenstein 和 Federman 编著,第 12 章,第 10 节)。此外，即使是在施用化学治疗剂的组合时，许多肿瘤细胞也对化学治疗剂具有抗性或者是发展出抗性。癌症疗法现在也可包括生物疗法或免疫疗法。生物疗法/免疫疗法的数量有限，并且尽管相比于化学治疗剂更具特异性，但许多仍同时靶向健康细胞和癌细胞。另外，这些疗法可能产生副作用，如皮疹或肿胀、流感样症状(包括发热、寒颤和疲劳)、消化道问题或过敏反应。4. 2用于治疗癌症的抗体抗体是结合特定抗原的免疫蛋白质。在大多数哺乳动物(包括人和小鼠)中，抗体由成对的多肽重链和轻链构成。各条链由两个不同区构成，称为可变(Fv)区和恒定(Fe)区。轻链和重链Fv区含有分子的抗原结合决定簇并且负责结合靶抗原。Fe区界定抗体(例如IgG)的类别(或同种型)并且负责结合多种天然蛋白质以引发重要的生物化学事件。抗体的Fe区与多种配体(包括Fe受体和其它配体)相互作用，从而赋予一系列重要的功能性能力，称为效应功能。IgG类别的一个重要的Fe受体家族是Fe Y受体(FcyR)。这些受体介导抗体与免疫系统的细胞免疫部分之间的通信(Raghavan等，1996, Annu Rev Cell Dev Biol 12 :181-220 ;Ravetch 等，2001, Annu Rev Tmmunol 19:275-290)。在人中，此蛋白质家族包括Fe Y RI (CID64)，包括亚型Fe Y RIA、Fe Y RIB和Fe Y RIC ；Fc Y RII (CD32)，包括亚型 Fe y RIIA,Fe y RIIB 和 Fe y RIIC ;和 Fe y RIII (CD16)，包括亚型 Fe Y RIIIA 和 Fe YRIIBCJefferis 等，2002，Immunol Lett 82:57-65)。这些受体通常具有介导与Fe的结合的细胞外结构域、跨膜区和可能介导细胞内的一些信号转导事件的细胞内结构域。这些不同的Fe Y R亚型在不同的细胞类型上表达(在Ravetch等，1991，Annu Rev Immunol 9 :457-492中综述)。例如，在人中，Fe Y RIIIB仅发现于嗜中性粒细胞，而Fe Y RIIIA发现于巨噬细胞、单核细胞、天然杀伤(NK)细胞和T细胞亚群上。Fc/Fc Y R复合物的形成将效应细胞募集到被结合抗原的位点，通常在细胞内产生信号转导事件并产生重要的后续免疫反应，如炎症介质释放、B细胞活化、内吞作用、吞噬作用和细胞毒性攻击。介导细胞毒性和吞噬效应功能的能力是抗体破坏靶细胞的潜在机制。其中表达Fe Y R的非特异性细胞毒性细胞识别靶细胞上结合的抗体并随后引起靶细胞溶解的细胞介导的反应称为抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC) (Raghavan等，1996，Annu Rev Cell Dev Biol 12 :181-220 ;Ghetie 等，2000, Annu Rev Tmmunol 18:739-766;Ravetch 等，2001，Annu Rev Immunol 19:275-290)。很明显，介导 ADCC 的原代细胞(NK 细胞)仅表达 Fe Y RIIIA，而单核细胞表达 FcyRI, Fcy RII 和 Fe y RIII (Ravetch 等，1991，同上)。另一重要的Fe配体是补体蛋白Clq。与Clq结合的Fe介导称为补体依赖性细胞毒性(CDC)的过程(在Ward等，1995，Ther Immunol 2 :77-94中综述)。Clq能够结合六个抗体，不过与两个IgG结合即足以活化补体级联。Clq与Clr和Cls丝氨酸蛋白酶形成复合物以本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：N·迪马斯，C·高，
申请(专利权)人：米迪缪尼有限公司，
类型：发明
国别省市：