一种抗体组合物及其应用制造技术

本发明专利技术属于生物技术领域，公开了抗体组合物及其应用。本发明专利技术抗体组合物，含有BLC特异性抗体，或者含有Fractalkine特异抗体、Mig特异抗体及C4d特异抗体及BLC特异性抗体。利用本发明专利技术抗体组合物，可以一次性诊断肾移植后的急性排斥，并可准确诊断急性排斥的类型为细胞性排斥或是抗体介导的排斥。利用本发明专利技术抗体组合物制备的检测试剂克服了目前对于急性排斥类别的诊断仅限于肾组织活检的缺陷，为临床诊断移植肾急性排斥反应及移植肾急性排斥类别提供了一种无创性方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，涉及一种抗体组合物及其应用，特别涉及可用于制备肾移植急性排斥反应诊断和鉴别诊断试剂的抗体组合物及其应用。
技术介绍
肾脏移植是治疗终末期肾病最理想的肾脏替代疗法。随着移植手术技术的进步和新型免疫抑制剂的应用，肾移植术后人和肾的存活率都有了很大的提高，但肾移植后的排斥反应仍然是影响肾移植预后的主要因素，并与移植肾和移植受者的长期存活率明显相关。排斥反应的诊断主要依靠肾组织病理活检，然而目前的病理活检还存在很多问题，首先它是有创性检查，不可避免存在活检相关并发症(如出血、移植物破裂)的危险，无法在短期内反复检查，也无法在门诊动态观察随访，而且随着移植术后的时间延长，为了监测移植受者的免疫状态的变化，需要定期的程序活检，但活检的费用和移植受者的接受程度也制约活检的开展；其次目前的移植病理缺乏敏感的手段发现早期的急性排斥，诊断往往是在出现明显的移植物损伤后，不能早期指导临床医生抗排斥治疗；第三病理检查较难预测抗排斥治疗的反应，不能有效预测移植物的长期存活；另外活检标本还存在代表性问题，穿刺局部的组织有时候并不能很好的代表整个移植物的状态。正是由于目前的病理活检还无法满足临床医生的要求，寻求无创性检查来辅助移植物功能监测，对病理活检进行补充，尿液检查无疑是监测移植肾功能较好的选择，近年来尿蛋白组学研究发现正常尿蛋白除了 30 %来自血浆蛋白，其余70 %均来自肾脏本身，能够很好的反映肾脏的病理生理过程，在生理性和病理性刺激下，肾小球和肾小管相应作出反应，引起尿蛋白排出的变化。如果通过尿液就可以无创性诊断移植肾排斥并区分排斥类型，从而取代病理活检将具有极大的应用前景，已有一些较少样本的研究显示了尿液细胞因子检测诊断急性排斥的可能。本专利技术人对67例急性排斥和119例肾功能稳定者的尿液细胞因子的分析的前期结果显示，Fractalkine诊断急性排斥的敏感性和特异性分别为82. 和76. 5% (Peng WH et al,Kidney International 2008 74,1454-1460)。Granzyme B 诊断急性排斥的敏感性和特异性分别为 59. 7%和 91. 6%。Hu 等(American Journal of Transplantation 2004 ； 4 :432-437)研究针对44例急性肾功能障碍( 例急性排斥，10例急性肾小管坏死和6例 BK病毒肾病)，20例慢性移植肾排斥，26例肾功能稳定的尿液Mig测定分析显示，Mig区分急性肾功能障碍和慢性排斥、肾功能稳定者的敏感性和特异性分别为79. 5%和93. 5%。Hu 等(Transplantation2009 ；87 =1814-1820)后来的研究同样证实尿液Mig诊断移植肾肾损伤(包括急性排斥，急性肾小管坏死，BK病毒肾病和慢性移植肾肾病)的敏感性和特异性分别为85. 2%和89. 7%。但是Hu等的研究说明尿液Mig可诊断移植肾功能障碍，并没有特异性针对急性排斥的诊断结果。Ingeborg A. Hauser 等(J Am SocNephrol 16 =1849-1858, 2005)对M例正常肾功能者和15例急性排斥者的研究显示尿液Mig可预测急性排斥，具有较好的诊断价值，但是该研究样本量少，只纳入了 15例急性排斥者。Stephan R. Lederer 等(N印hron Clin Pract2003 ；94 :cl9_c26)等研究显示急性排斥和慢性移植肾失功时尿液C4d含量较正常者显著升高，尿液C4d分泌有可能成为诊断急性排斥的指标。从以上这些已有研究结果可见，利用尿液单个指标来诊断急性排斥，不能同时保证较好的敏感性和特异性；同时，目前的研究结果大都源于少量的研究样本，这样的研究结论因样本量少而使其结果具有很多的不确定因素，因此更适合于作为理论研究而使用，其与真正的应用于临床诊断还有较大的距离，无法应用于临床诊断。BLC是B淋巴细胞特异性趋化因子，又称为CXCL13，BCAl,已有研究报道移植肾急性排斥时，免疫组化染色肾间质有BLC阳性B细胞浸润，但目前尚未有尿液BLC细胞因子含量用于鉴别急性排斥类别(细胞性排斥还是抗体介导的排斥)的相关报道。目前对于急性排斥的诊断和排斥类型(细胞性排斥还是抗体介导的排斥)的鉴别仅依赖于肾组织活检， 而上所述活检具有局限性和创伤性的缺点。因此利用无创性技术手段，联合尿液多个细胞因子达到急性排斥和排斥类型的无创性诊断具有非常重大的意义。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种可用于制备无创性肾急性排斥反应诊断和/或肾移植急性排斥类型鉴别试剂中的抗体组合物。本专利技术的另一目的是提供该抗体组合物的应用。本专利技术的又一目的是提供含有该抗体组合物的试剂盒。本专利技术的又一目的是提供制备含有该抗体组合物的试剂盒的方法。本专利技术的目的可通过如下技术方案实现一种抗体组合物，含有BLC特异抗体。一种抗体组合物，含有Fractalkine特异抗体、Mig特异抗体及C4d特异抗体，在这三个特异抗体的基础上还可包含Granzyme B特异抗体。一种抗体组合物，含有BLC特异抗体、Fractalkine特异抗体、Mig特异抗体及C4d 特异抗体。一种抗体组合物，含有BLC特异抗体、Fractalkine特异抗体、Mig特异抗体、 GranzymeB特异抗体及C4d特异抗体。所述的特异抗体为单克隆抗体、多克隆抗体、重组抗体或抗体片段。所述的特异抗体优选单克隆抗体。所述的含有BLC特异抗体的抗体组合物在制备肾移植急性排斥类型鉴别试剂中的应用。所述的含有Fractalkine特异抗体、Mig特异抗及C4d特异抗体组合物在制备肾移植急性排斥反应诊断试剂中的应用。所述的含有Fractalkine特异抗体、Mig特异抗体、Granzyme B特异抗体及C4d特异抗体组合物在制备肾移植急性排斥反应诊断试剂中的应用。B LC特异抗体、Fractalkine特异抗体、Mig特异抗体及C4d特异抗体组合物在制备肾移植急性排斥反应诊断和/或肾移植急性排斥类型鉴别试剂中的应用。BLC特异抗体、Fractalkine特异抗体、Mig特异抗体、Granzyme B特异抗体及C4d特异抗体组合物在制备肾移植急性排斥反应诊断和/或肾移植急性排斥类型鉴别试剂中的应用。一种含有抗体组合物的试剂盒，所述的抗体组合物为BLC特异抗体。一种含有抗体组合物的试剂盒，为Fractalkine特异抗体、Mig特异抗体及C4d特异抗体。一种含有抗体组合物的试剂盒，为Fractalkine特异抗体、Mig特异抗体、 Granzyme B特异抗体及C4d特异抗体。一种含有抗体组合物的试剂盒，所述的抗体组合物为BLC特异抗体、Fractalkine 特异抗体、Mig特异抗体及C4d特异抗体。一种含有抗体组合物的试剂盒，所述的抗体组合物为BLC特异抗体、Fractalkine 特异抗体、Mig特异抗体、Granzyme B特异抗体及C4d特异抗体。以上的抗体组合物的试剂盒，是采用ELISA、放射免疫分析、自动化免疫分析、免疫沉淀、流式微珠测定或液态芯片技术(LUMINEX)平台制备和测定的。本专利技术的有益效果本专利技术联合FractalkinhMi本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种抗体组合物，其特征在于该抗体组合物含有ＢＬＣ特异抗体。

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈江华，彭文翰，茅幼英，寿张飞，姜虹，陈大进，
申请(专利权)人：浙江大学医学院附属第一医院，
类型：发明
国别省市：86