ＳＲＩＦ肽拮抗剂相对于其他克隆ＳＲＩＦ受体对ＳＳＴＲ２具有选择性，并以高亲和力结合克隆的人类受体ＳＳＴＲ２，但不活化该受体，具有许多有用功能。因为它们不以显著亲和力结合ＳＳＴＲ１、ＳＳＴＲ３、ＳＳＴＲ４或ＳＳＴＲ５，所以它们的施用避免了潜在不希望的副作用。因为它们阻断受体功能，所以它们可以在治疗上用于阻断某些ＳＳＴＲ２介导的生理效应。通过在这些ＳＳＴＲ２－选择性ＳＲＩＦ拮抗剂掺入放射性碘或类似物，提供了用于药物筛选方法的标记化合物。可选地，为了用于治疗，可以在其Ｎ末端偶联、络合或螯合高放射性部分。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及与生长抑素相关的肽，以及使用所述肽药物治疗哺乳动物的方法。具体说，本专利技术涉及缩短的受体-选择性生长抑素肽拮抗剂，以及赋予其受体选择性的所述肽中氨基酸取代和/或添加的加入，本专利技术涉及含有所述肽的药物组合物，本专利技术涉及与放射性核素络合或轭合的所述肽，本专利技术涉及使用所述肽、特别是与螯合剂偶联或以其他方式标记的肽诊断性和治疗性治疗肿瘤性和非肿瘤性哺乳动物疾病的方法，本专利技术还涉及使用所述肽筛选更有效药物的方法。
技术介绍
环状十四肽生长抑素-14(SRIF)最初从下丘脑分离并鉴定为生长激素(GH)从垂体前叶释放的生理抑制剂。它由Guillemin等鉴定并描述于美国专利第3,904,594号。该十四肽在3-和14-位的两个半胱氨酰氨基酸残基的巯基之间具有桥连或环化键。SRIF影响多个细胞过程，还已知抑制某些肿瘤生长。类似物-SRIF具有氨基酸序列(环3-14)H-Ala-Gly-Cys-Lys-Asn-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-Ser-Cys-OH，公开于美国专利第4,372,884号并据称具有比SRIF大很多倍的抑制GH释放的潜力。 SRIF通过与膜结合的结构上类似的受体家族相互作用而诱发其生物效应。已经克隆了5种SRIF受体并称为SSTR 1-5。全部5种受体以高亲和力结合SRIF和SRIF-28。SSTR2和SSTR5的选择性拮抗剂已经被确认并用于揭示这些受体的不同功能。据信，这两种受体是周缘组织中的主要亚型。据信，SSTR2介导生长激素、高血糖素和胃酸分泌的抑制。美国专利第5,846,934号描述了据称对SSTR2具有一定特异性的类似物。奥曲肽是一种激动剂，显示对SSTR2的一定特异性(参见Yang等，1998，PNAS USA 9510836)。相反，SSTR5似乎主要参与控制胰岛素和淀粉酶的释放。国际公布第WO 97/11962号描述了据称对SSTR5具有一定特异性的类似物。SSTR3介导胃平滑肌收缩的抑制。美国专利第6,579,967号公开了对SSTR3特异性的生长抑素类似物，其公开内容通过引用并入本文。SSTR4发现于脑下垂体、肺、胃肠道、肾和实质上排除其他SRIF受体的某些肿瘤中；据信，它在被SRIF结合后即被活化。美国公布的专利申请第2002/0137676号公开了使用生长抑素受体选择性配体治疗内皮细胞的方法，所述配体对SSTR1或SSTR4具有特异性。美国专利第5,750,499和7,019,109号公开了对SSTR1有选择性的生长抑素肽类似物，其公开内容通过引用并入本文。公布的美国专利申请第2005/0245438号公开了对SSTR4特异性的受体-选择性生长抑素肽类似物。所有这些发现说明，不同的受体亚型介导SRIF在体内不同的功能。生长抑素受体以病理状态、特别是胃肠道的神经内分泌肿瘤表达。大多数起源于生长抑素靶组织的人类肿瘤保留了它们的生长抑素受体。其首先在生长激素生成腺瘤和TSH生成腺瘤中发现；约一半的非分泌型腺瘤展示生长抑素受体。90％的类癌瘤和大多数胰岛细胞癌(包括它们的转移灶)通常具有高密度的生长抑素受体。然而，仅10％的结肠直肠癌和没有外分泌型胰腺癌含有生长抑素受体。肿瘤中的生长抑素受体可以使用体外结合方法或使用体内成像技术鉴定；后者允许在患者中精确定位肿瘤及其转移灶。因为胃肠胰腺肿瘤中的生长抑素受体是功能性的，所以它们的鉴定可以用来评估类似物抑制患者过量激素释放的治疗效力。 与SSTR2强力结合、同时显示与其他4种受体仅最低结合倾向的生长抑素肽拮抗剂将值得拥有。因此，一直在寻找对SSTR2具有高度选择性但不内化入细胞的生长抑素肽拮抗剂。
技术实现思路
专利技术概述 目前已经发现了有效产生相对于其他克隆的SRIF受体对SSTR2有选择性的SRIF肽类似物的某些修饰。已经发现一类对SSTR2高选择性的生长抑素肽类似物，其是生长抑素的拮抗剂，并且尽管不内化于具有SSTR2受体的细胞，但令人惊讶地以比可比受体-选择性生长抑素肽激动剂大的量被摄取。得到的肽选择性结合至克隆的SSTR2而不活化受体，这些肽类似物被碘化或以其他方式放射标记时将保留其需要的生物性质。因此，这些新肽可用于测定受体SSTR2的组织定位和细胞表达，以及用于调控某些药理功能而无迄今施用SRIF所特有的某些伴随的副作用。这些SRIF肽拮抗剂被放射标记时，可以用于闪烁扫描法以使用SPECT或PET体外或体内定位(即局部化)表达这些受体的肿瘤；或者可使用该领域公知的其他标记，例如荧光标记。当它们包括适合的螯合的该领域已知的放射性核素时，这些类似物可以用作适合治疗此类肿瘤的放射性核素疗法的放射性药物。 本专利技术的SRIF肽拮抗剂抑制25I-SRIF和125I-SRIF-28与克隆的人类受体SSTR2的结合，但是它们不强力结合SSTR1、SSTR3、SSTR4或SSTR5。因此，未标记的拮抗剂可以被施用，以从治疗上阻断该受体发挥功能。例如已经通过螯合剂(例如DOTA或DTPA)与99mTc、111In、68Ga或90Y偶联的(或者为了连接用于诊断或治疗的部分目的而在N末端连接另一络合剂/轭合剂的)这些SRIF拮抗剂不显著结合SSTR1、3、4或5，但有效且可饱和地结合至SSTR2。 优选的SRIF拮抗剂不仅选择性结合SSTR2，而且它们以高亲和力与之结合。选择性结合是指它们表现出的与SSTR2的KD或IC50是所有4种其他受体的KD或IC50的约1％或更低。优选的类似物对SSTR2的选择性是任何其他SRIF受体的至少约200倍，更优选至少约500倍。这些SRIF类似物还可容易标记，因此有效用于药物筛选、成像、诊断和放射性核素疗法。例如，带有可检测标记的这些类似物可用于在体内定位所述受体并诊断肿瘤、特别是神经内分泌肿瘤的定位。作为放射性核素治疗剂，它们被认为特别用于抗表达SSTR2受体的肿瘤；而且，它们能够无副作用地实现该用途，即，不会由于与多种SRIF受体相互作用而破坏相邻组织的实质部分。 在一个具体方面本专利技术提供选择性结合SRIF受体SSTR2而不引发内化入细胞的环状生长抑素(SRIF)肽拮抗剂，所述肽包括氨基酸序列(环3-14)Xaa1-Xaa2-D-Xaa3-Xaa4-Xaa5-Xaa6-Xaa7-Xaa8-Xaa9-Xaa10-Xaa11-Xaa12-Xaa13-Xaa14-Xaa15，其中Xaa1是des-Xaa；Xaa2是Trp(A)、Phe(B)、Nal或Tyr，其中A是H、Cl、F、Br、Me、NO2、OMe或N-甲酰基且B是H、卤素、CH3、NO2或OCH3；D-Xaa3是D-Cys、D-Pen、D-HCys或具有SH侧链的另一种D-异构体α-氨基酸Xaa4、Xaa5和Xaa6是des-Xaa；Xaa7是APh(Q1)、Tyr(X)、Ala(噻吩基)或Trp(A)，其中Q1是Cbm、OH-Cbm、CH3-Cbm、OCH3-Cbm、OEt-Cbm、Cbm-Et(OEt)2或Hor，且X是H或卤素；Xaa8是D-Trp(A)、Trp(A)、Tyr、D-Tyr、Phe(B)、D-Phe(B)、L或D-BzlHis、L或D-(DNP)His、L或D本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种选择性结合ＳＲＩＦ受体ＳＳＴＲ２而不引发内化入细胞的环状生长抑素（ＳＲＩＦ）肽拮抗剂，所述肽包括氨基酸序列（环３－１４）Ｘａａ↓［１］－Ｘａａ↓［２］－Ｄ－Ｘａａ↓［３］－Ｘａａ↓［４］－Ｘａａ↓［５］－Ｘａａ↓［６］－Ｘａａ↓［７］－Ｘａａ↓［８］－Ｘａａ↓［９］－Ｘａａ↓［１０］－Ｘａａ↓［１１］－Ｘａａ↓［１２］－Ｘａａ↓［１３］－Ｘａａ↓［１４］－Ｘａａ↓［１５］，其中Ｘａａ↓［１］是ｄｅｓ－Ｘａａ；Ｘａａ↓［２］是Ｔｒｐ（Ａ）、Ｐｈｅ（Ｂ）、Ｎａｌ或Ｔｙｒ，其中Ａ是Ｈ、Ｃｌ、Ｆ、Ｂｒ、Ｍｅ、ＮＯ↓［２］、ＯＭｅ或Ｎ－甲酰基，且Ｂ是Ｈ、卤素、ＣＨ↓［３］、ＮＯ↓［２］或ＯＣＨ↓［３］；Ｄ－Ｘａａ↓［３］是Ｄ－Ｃｙｓ、Ｄ－Ｐｅｎ、Ｄ－ＨＣｙｓ或具有ＳＨ侧链的另一种Ｄ－异构体α－氨基酸Ｘａａ↓［４］、Ｘａａ↓［５］和Ｘａａ↓［６］是ｄｅｓ－Ｘａａ；Ｘａａ↓［７］是ＡＰｈ（Ｑ１）、Ｔｙｒ（Ｘ）、Ａｌａ（噻吩基）或Ｔｒｐ（Ａ），其中Ｑ↓［１］是Ｃｂｍ、ＯＨ－Ｃｂｍ、ＣＨ↓［３］－Ｃｂｍ、ＯＣＨ３－Ｃｂｍ、ＯＥｔ－Ｃｂｍ、Ｃｂｍ－Ｅｔ（ＯＥｔ）↓［２］或Ｈｏｒ，且Ｘ是Ｈ或卤素；Ｘａａ↓［８］是Ｄ－Ｔｒｐ（Ａ）、Ｔｒｐ（Ａ）、Ｔｙｒ、Ｄ－Ｔｙｒ、Ｐｈｅ（Ｂ）、Ｄ－Ｐｈｅ（Ｂ）、Ｌ或Ｄ－ＢｚｌＨｉｓ、Ｌ或Ｄ－（ＤＮＰ）Ｈｉｓ、Ｌ或Ｄ－Ａｐｈ（Ｃｂｍ）；Ｘａａ↓［９］是Ｌｙｓ、ＮαＭｅＬｙｓ、ｈＬｙｓ、ＮαＭｅｈＬｙｓ、Ｏｒｎ或ＮαＭｅＯｒｎ；Ｘａａ↓［１０］是Ｔｈｒ、Ｓｅｒ或Ｖａｌ；Ｘａａ↓［１１］、Ｘａａ↓［１２］和Ｘａａ↓［１３］是ｄｅｓ－Ｘａａ；Ｘａａ↓［１４］是Ｃｙｓ、Ｐｅｎ、ｈＣｙｓ或具有ＳＨ侧链的另一种Ｌ－异构体α－氨基酸；并且Ｘａａ↓［１５］是２Ｎａｌ、Ｄ－２Ｎａｌ、Ａｐｈ（Ｑ↓［２］）、Ｄ－Ａｐｈ（Ｑ↓［２］）、（Ｒ↓［１］）Ｃｈａ、（Ｒ↓［１］）Ｄ－Ｃｈａ、（Ｒ↓［１］）Ｌｅｕ、（Ｒ↓［１］）Ｄ－Ｌｅｕ、Ｔｙｒ、Ｄ－Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｄ－Ｔｒｐ或ｄｅｓ－Ｘａａ；其中Ｒ↓［１］是Ｈ或Ｃ↑［α］Ｍｅ，且Ｑ↓［２］是Ｃｂｍ、ＯＨ－Ｃｂｍ、ＣＨ↓［３］－Ｃｂｍ、ＯＣＨ↓［３］－Ｃｂｍ或ＯＥｔ－Ｃｂｍ。...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：JEF瑞维尔，J尔学艺，JC儒贝，HR马克夫，
申请(专利权)人：索尔克生物学研究院，伯尔尼大学，巴塞尔医学院，
类型：发明
国别省市：US[美国]
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