来自脂肪或胎盘组织的粘附细胞及其在治疗中的用途制造技术

公开了治疗需要其的受试者中缺血的方法。该方法包括给予受试者治疗有效量的选自胎盘和脂肪组织的组织的粘附细胞，藉此治疗受试者的缺血。也公开了治疗需要结缔组织再生和／或修复的医学状况的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】来自脂肪或胎盘组织的粘附细胞及其在治疗中的用途专利
和背景本专利技术涉及使用来自脂肪或胎盘组织的粘附细胞治疗疾病的方法，更具体而言，涉及使用粘附细胞治疗缺血和/或需要结缔组织再生和/或修复的医学状况。在日益发展的医学界，越来越需要大量的成体干细胞用于细胞移植物植入和组织工程。此外，成体干细胞疗法正持续发展用以治疗和治愈各种状况，例如造血障碍、心脏病、帕金森病、阿耳茨海默病、中风、烧伤、肌肉萎缩症、自身免疫性病症、糖尿病和关节炎。近些年来，大量的研究活动集中在间充质基质细胞(MSCs)用于包括受损器官例如大脑、心脏、骨骼和肝的组织修复以及支持骨髓移植(BMT)在内的各种医学应用的治疗潜能。MSCs是获自例如骨髓、脂肪组织、胎盘和血液的异源细胞群，可依靠来自各种生物活性因子的影响分化成不同类型的间充质成熟细胞(例如，网状内皮细胞、成纤维细胞、脂肪细胞、成骨前体细胞)。因此，MSCs已在再生医学中被广泛研究作为构造新组织例如骨、软骨和脂肪的基础用于损伤修复或病变组织的置换以及用于治疗遗传和获得性疾病[Fibbe和Noort，AnnNYAcadSci(2003)996：235-44；Horwitz等，Cytotherapy(2005)7(5)：393-5；Zimmet和Hare，BasicResCardiol(2005)100(6)：471-81]。而且，MSCs的多能性、它们的易于分离和培养以及它们的先体外后体内(exvivo)高增殖潜能使它们成为有吸引力的治疗工具[Fibbe和Noort，上文；Minguell等ExpBiolMed(Maywood)(2001)226(6)：507-20]。源自胎盘的MSCs显示出许多与分离自其它组织的MSCs共有的标记，例如CD105、CD73、CD90和CD29，以及缺少造血细胞、内皮细胞和滋养层-特异细胞标记的表达。已在适当条件下培养源自胎盘的MSCs之后完成成脂性、成骨性和神经原性分化[Yen等，StemCells(2005)23(1)：3-9]。而且，分离自胎盘并体外培养的MSCs已被证明以与MSCs相似的方式免疫赦免。因此，胎盘为实验和临床应用提供伦理上无争议的并且易于获得的MSCs来源[Zhang等，ExpHematol(2004)32(7)：657-64]。本专利技术人之前已设计了适于源自胎盘的MSCs扩增的三维(3D)培养条件(PCT申请第IL2007/000380号)，其完整内容通过引用并于本文。MSCs的主要临床用途总结于下文。缺血外周动脉病(PAD)外周动脉病(PAD)为一种慢性疾病，其可进行性限制肢体的血流从而可导致严重的医学并发症。这一疾病通常与其他临床状况相关，包括高血压、心血管病、高血脂症、糖尿病、肥胖症和中风。严重肢体缺血(CLI)用于描述患有慢性缺血诱导的疼痛、溃疡、组织缺损或肢体坏疽的患者。CLI代表PAD患者的末期，它们需要通过血管外科或血管专家的综合治疗。与冠状动脉和大脑动脉病相反，外周动脉病(PAD)仍然是未被完全了解的状况，尽管病情严重且非常流行但很少被诊断出并且甚至更少被治疗。结果，CLI经常导致截肢或死亡且PAD患者的死亡率超过心肌梗塞和中风患者的死亡率。为了治疗缺血状况已使用了多种成体干细胞。因此，源自脂肪组织的基质细胞(ADSC)和内皮细胞(EC)的共培养主要通过VEGE和HGF的分泌引起EC存活率、迁移和管腔形成的显著增加。将基质细胞移植到缺血小鼠后肢四周后血管生成评分得到改善[Nakagami等，JAtherosclerThromb(2006)13(2)：77-81]。Moon等[CellPhysiolBiochem.(2006)17：279-90]已检测源自脂肪组织的祖细胞(ADSC)治疗免疫缺陷小鼠肢体缺血的能力并证明了ADSC-移植组中激光多普勒灌注指数的显著增加。此外，当源自脐带血(UCB)的间充质干细胞被移植到四名已接受药物治疗和手术疗法的伯格氏病患者中时，他们患肢的缺血性静息痛突然消失[Kim等，StemCells(2006)24(6)：1620-6]。而且，将分离自足月胎盘胎膜的人间充质干细胞(FMhMSC)移植入梗塞的大鼠心脏与毛细血管密度增加、左心室功能正常化以及瘢痕组织的显著减少相关，这些情况在将干细胞与透明质烷与丁酸和视黄酸形成的混合酯预处理时被增强[Ventura等，(2007)J.Biol.Chem.，282：14243-52]。中风中风是全世界死亡的主要诱因之一，引起约9％的所有死亡并消耗约2-4％的总医疗费用。尽管很可能因为提高了对中风危险因素(尤其是高血压、糖尿病和吸烟)的控制，发达国家的中风死亡率已持续降低，但是中风仍然可导致永久性损伤(例如，组织损伤、神经损伤)。新的中风治疗方案包括干细胞疗法。已设想将干细胞或祖细胞局部或通过静脉内途径移植入受损位点以替代无功能细胞、增强内源干细胞或祖细胞的增殖和/或分化且提供必要的免疫调节子，并作为主要的以细胞为基础的策略。干细胞/祖细胞的潜在来源包括胎儿神经干细胞、胚胎干细胞、神经畸胎癌细胞、源自脐带血的非造血干细胞、源自骨髓的干细胞以及源自胎盘的间充质干细胞[Andres等，NeurosurgFocus(2008)24(3-4)：E16]。在一项最近的研究中，Koh等[Koh等，BrainRes.(2008)]检测了移植的源自人脐带血的间充质干细胞(hUC-MSCs)在缺血中风大鼠模型中的神经保护作用和机制。体外诱导神经元分化二十天后，hUC-MSCs显示出神经元的形态学特征并表达神经元细胞标记和神经元因子(例如，源自神经胶质细胞系的神经营养因子、源自脑的神经营养因子)。而且，将hUC-MSCs体内移植到免疫抑制的缺血中风大鼠的受损脑半球可相对于对照大鼠改善神经行为功能且减少梗塞体积。移植后三周，hUC-MSCs出现在受损半球中并表达神经元-特异标记，但这些细胞没有成为功能活性神经元细胞。矫形外科应用多种状况和病理需要结缔组织(例如，骨、腱和韧带)的再生和/或修复。这些包括，例如，骨折、烧伤、烧伤创面、深度创伤、退化骨、各种癌症相关的结缔组织损失(例如，骨癌、骨肉瘤、骨转移)以及关节软骨缺损。使用自体BM-MSCs增强骨愈合已被描述用于兽医和人的矫形外科应用且包括经皮注射骨髓用于韧带愈合(Carstanjen等，2006)、矫形临床中通过骨髓的自体移植物或同种异体移植物治疗骨缺损(Horwitz等，1999，Horwitz等，2002)、使用负载于由羟基磷灰石-磷酸三钙组成的陶瓷圆柱体上的同种异体的[ArinzehTL，等，JBoneJointSurgAm.2003，85-A(10)：1927-35]或自体的[BruderSP等，JBoneJointSurgAm.1998Jul；80(7)：985-96]骨髓-MSCs在狗中，或使用同种异体的源自外周血的MSCs(Chao等，2006.)在兔子中进行临界大小骨缺损的再生，以及使用MSCs移植在狒狒中进行大量的骨形成(Livingston等，2003)。在马矫形外科领域中，BM和脂肪组织来源的间充质干细胞已实验性用于手术治疗软骨下骨囊肿、骨折修复[Kraus和Kirker-Head，本文档来自技高网...

【技术保护点】
治疗需要其的受试者中缺血的方法，该方法包括给予受试者治疗有效量的选自胎盘和脂肪组织的组织的粘附细胞，藉此治疗受试者的缺血。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】US 2007-9-19 60/960,1841.培养的粘附基质细胞在制备治疗缺血的药物中的用途，其中所述基质细胞来源于胎盘，并使其粘附到粘附材料上，藉此分离粘附细胞，并随后转移至三维(3D)条件，在三维(3D)培养中增殖。2.权利要求1的用途，其中所述培养的粘附基质细胞能够抑制受试者中的免疫反应。3.权利要求1的用途，其中至少10％的所述培养的粘附基质细胞处于增殖期。4.权利要求1的用途，其中所述三维培养包括三维生物反应器。5.权利要求1或4的用途，其中所述培养的粘附基质细胞在所述三维培养中的培养在灌注下实现。6.权利要求1...

【专利技术属性】
技术研发人员：M梅伦，A托伦，R奥菲尔，Z阿伯曼，N德罗里卡米，
申请(专利权)人：普拉里斯坦有限公司，
类型：发明
国别省市：IL[以色列]