一种枯草芽孢杆菌脂肪酶及制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种枯草芽孢杆菌脂肪酶及制备方法和应用，一种枯草芽孢杆菌脂肪酶，大肠杆菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ?ｃｏｌｉ）ＢＬ２１／ｐＥＴ２８ａ－Ｌｉｐ?Ａ?ｆ１２－Ｃ２（Ｒ３３Ｗ／Ｌ１４０Ｆ），ＣＣＴＣＣ?ＮＯ：Ｍ２０１００５７。这种高活力脂肪酶突变体的编码基因具有ＳＥＱ?ＩＤ?ＮＯ．１所示的核苷酸序列，其编码的蛋白具有ＳＥＱ?ＩＤ?ＮＯ．２所示的氨基酸序列，其步骤是：第一是通过ＰＣＲ扩增出枯草芽孢杆菌脂肪酶Ｌｉｐ?Ａ结构基因；第二是设计二对诱变引物，通过重叠ＰＣＲ法将两个突变位点依次引入脂肪酶Ｌｉｐ?Ａ基因；第三获得高活力脂肪酶产生菌ＢＬ２１（ＤＥ３）／Ｌｉｐ?Ａ（Ｒ３３Ｗ／Ｌ１４０Ｆ）；第四是在大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中诱导表达目的蛋白；第五是纯化蛋白。一种枯草芽孢杆菌脂肪酶在皮革加工中的应用。本发明专利技术方法易行，成本低廉，高酶活脂肪酶突变株蛋白在食品、化工和医药等行业具有重要应用价值。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种枯草芽孢杆菌脂肪酶，其特征在于：该酶在大肠杆菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ）ＢＬ２１／ｐＥＴ２８ａ－ＬｉｐＡｆ↓［１２］－Ｃ↓［２］（Ｒ３３Ｗ／Ｌ１４０Ｆ）的表达，ＣＣＴＣＣＮＯ：Ｍ２０１００５７。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张先恩，周亚凤，王晓英，张治平，王殿冰，危宏平，崔宗强，
申请(专利权)人：中国科学院武汉病毒研究所，
类型：发明
国别省市：83[中国|武汉]