一种乙型肝炎病毒多耐药基因位点分型检测试剂盒制造技术

技术编号:3811229 阅读:650 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术涉及一种乙型肝炎病毒多耐药基因位点分型的检测方法及其试剂盒,检测方法包括下列步骤:DNA抽提;所提取DNA进行PCR扩增:所用PCR引物为两对正向引物和反向引物,其PCR产物中含有所有耐药相关位点;对PCR的扩增产物进行LDR扩增:所用探针为相关位点的探针包括荧光标记探针和检测探针;测序仪对LDR产物进行分析,判断各耐药位点的基因型;所述多重耐药位点为拉米夫定,米夫定,阿德福韦和恩替卡韦的耐药位点。本发明专利技术结果可靠稳定、操作简单、快速,能够方便检出各种乙型肝炎病毒的耐药情况,对乙型肝炎病毒患者提供临床个体化用药指导,降低药物的无效性,减少患者的用药次数,从而减轻患者的痛苦和经济负担。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种乙型肝炎病毒多耐药基因位点分型的检测方法,包括如下步骤: (1)取乙型肝炎病毒血清进行DNA抽提; (2)所提取DNA进行PCR扩增:其扩增产物中含有耐药相关位点,所述耐药位点为拉米夫定、替米夫定、阿德福韦和恩替卡韦的耐药位 点;所用的PCR引物为两对,其序列3’-5’如下: 正向引物1CTACCAGCACGGGACCATGC 反向引物1CAAGATGTTGTACAGACTTGG 正向引物2GTCCCTTTTTACCTCTATTACCA  反向引物2TACATGCATATAAAGGCATTGAGG (3)对PCR的扩增产物进行LDR扩增:所用探针为相关位点的探针包括荧光标记探针和检测探针,所述耐药相关突变位点为:rtL180M,YMDD/YIDD,YVDD,rtA181 V/T,rtN236T,rtT184G,rtS202I和rtM250V; (4)用测序仪对LDR产物进行分析,判断各耐药位点的基因型。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:陆炯
申请(专利权)人:上海翼和应用生物技术有限公司
类型:发明
国别省市:31[中国|上海]

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