一种联合快速检测流行性乙型脑炎病毒、登革病毒和西尼罗病毒试剂盒及其检测方法技术

本发明专利技术涉及一种联合快速检测流行性乙型脑炎病毒、登革病毒和西尼罗病毒试剂盒，由主反应液和特异性引物组成。主反应液包括反应缓冲液、禽类成髓细胞瘤病毒反转录酶、核酸酶抑制剂、Ｂｓｔ　ＤＮＡ聚合酶、ｄＮＴＰ、硫酸镁、酣菜碱、焦碳酸二乙脂和处理水；特异性引物包括特异性扩增乙脑病毒引物、特异性扩增登革病毒引物和特异性扩增西尼罗病毒引物。本发明专利技术用环介导等温扩增技术，设计高度特异性引物，快速检测３种黄病毒，达到高效特异性扩增的目的。本发明专利技术提供了检测方法，利用紫外－可见光分光光度计检测反应体系的吸光度值，间接反应目的基因的ＤＮＡ扩增情况。适于基层和现场快速检测，有较大的应用价值。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种联合快速检测流行性乙型脑炎病毒、登革病毒和西尼罗病毒试剂盒，其特征在于所述试剂盒由主反应液和特异性引物组成：　所述主反应液的组成：１０×等温反应缓冲液、浓度为５Ｕ／μｌ的禽类成髓细胞瘤病毒反转录酶、浓度为４０Ｕ／μｌ的核酸酶抑制剂 、浓度为８Ｕ／μｌ的Ｂｓｔ　ＤＮＡ聚合酶、浓度为１０ｍＭ的ｄＮＴＰ、浓度为１００ｍＭ的硫酸镁、和浓度为５Ｍ的酣菜碱和１．２５μｌ焦碳酸二乙脂处理水，总体积量为１６μｌ；　所述特异性引物：包括特异性引物１，特异性引物２，特异性引物３；每 组特异性引物都共有３对引物，它们分别为内引物１ＦＩＰ和内引物２ＢＩＰ；外引物１Ｆ３和外引物２Ｂ３；环引物１ＦＬＰ和环引物２ＢＬＰ。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：曹广文，李淑华，刘世建，常文军，张宏伟，
申请(专利权)人：中国人民解放军第二军医大学，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]