一种促进干细胞因子合成和分泌的化合物及其用途制造技术

本发明专利技术为一种促进干细胞因子合成和分泌的化合物及其用途。提出式(I)所示化合物或式(I)所示化合物的立体异构体、互变异构体、氮氧化物、溶剂化物、代谢产物、药学上可接受的盐或前药在促进干细胞因子合成和分泌中的用途。发明专利技术人通过实验发现，PRX能够有效提高基质细胞总SCF的表达和分泌水平，可作为有效地促进内源SCF合成和分泌的激动剂；式(I)所示化合物或式(I)所示化合物的立体异构体、互变异构体、氮氧化物、溶剂化物、代谢产物、药学上可接受的盐或前药能够显著促进干细胞因子合成和分泌。

A Compound Promoting the Synthesis and Secretion of Stem Cell Factor and Its Application

【技术实现步骤摘要】
一种促进干细胞因子合成和分泌的化合物及其用途
本专利技术涉及生物
，具体地，本专利技术涉及化合物在促进干细胞因子合成和分泌中的用途，更具体地，本专利技术涉及化合物在促进干细胞因子合成和分泌中的用途、培养基、化合物在在制备培养基或药物中的用途以及促进干细胞因子合成和分泌的方法。
技术介绍
由基质细胞、细胞因子及细胞外基质等组成的造血微环境参与调控造血干细胞的自我更新及增殖分化。在众多参与维持造血干细胞稳态的造血调控因子中，干细胞因子(Stemcellfactor，SCF，又称为Kit配体或肥大细胞生长因子)是由基质细胞所产生的一种酸性糖蛋白，在人骨髓及血清中均可被检测到。大量研究证据表明，在早期造血干/祖细胞增殖分化及动员归巢过程中，SCF均发挥关键的调控作用，并主要包括以下几方面：1.调控造血干细胞的增殖及分化。在体外培养条件下,SCF能够单独或协同其他造血细胞因子促进造血干/祖细胞的体外增殖，并支持其向特定造血谱系的定向分化。2.参与造血干细胞的动员。利用动物模型研究发现，SCF与G-CSF等细胞因子联用能够提高外周血中总有核细胞数、CD34+细胞数量及造血集落数量，表明其可能是一种潜在的造血动员剂。3.促进造血干细胞的归巢。体内外研究证据表明，SCF能够调控造血干细胞表面黏附蛋白的表达水平，与SDF-1α协同作用参与造血干细胞归巢并定植于骨髓微环境中。4.SCF能够促进辐射损伤后造血功能的恢复重建。来自动物模型的研究表明，SCF能够提高受辐照动物的生存率，缩短血小板及中性粒细胞恢复周期，表明其可能是一种效果持久、疗效广谱的抗放药。因此，筛选能激活内源性SCF因子合成分泌的激动剂，具有十分重要的临床意义和应用前景。
技术实现思路
本申请是基于专利技术人对以下事实和问题的发现和认识作出的：在本专利技术中，专利技术人利用高通量分析技术，筛选到一种能够促进骨髓基质细胞分泌SCF的小分子化合物PRX-08066Maleicacid(后简称PRX)。该小分子化合物作为一种选择性的5-HT2B受体拮抗剂，其IC50为3.4nM，作用于MCT大鼠模型，可缓解肺动脉高压的严重程度。在本申请中，专利技术人发现，在小鼠骨髓基质细胞培养体系中添加0-10μMPRX处理后，利用WesternBlot检测细胞裂解物SCF蛋白表达水平，发现与溶剂对照组相比，PRX能够显著提高细胞总SCF的表达水平，并具有剂量依赖效应；利用ELISA检测培养上清中可溶性SCF浓度同样发现，PRX能够有效刺激细胞分泌可溶型SCF蛋白。这些实验证据有力支持PRX可作为一种促进内源SCF合成分泌的激动剂，成为一种安全有效的潜在靶向药物，用于调节造血干/祖细胞增殖和/或分化、动员归巢及再生重建。为此，在专利技术的第一方面，本专利技术提出式(I)所示化合物或式(I)所示化合物的立体异构体、互变异构体、氮氧化物、溶剂化物、代谢产物、药学上可接受的盐或前药在促进干细胞因子合成和分泌中的用途，式(I)所示化合物即称为PRX-08066Maleicacid(即PRX)。根据本专利技术的实施例，式(I)所示化合物的立体异构体、互变异构体、氮氧化物、溶剂化物、代谢产物、药学上可接受的盐或前药与式(I)所示化合物在机体或细胞内具有相似或相应的理化性质。专利技术人通过实验发现，PRX能够有效提高基质细胞总SCF的表达和分泌水平，可作为有效地促进内源SCF合成和分泌的激动剂；式(I)所示化合物或式(I)所示化合物的立体异构体、互变异构体、氮氧化物、溶剂化物、代谢产物、药学上可接受的盐或前药能够显著促进干细胞因子合成和分泌。根据本专利技术的实施例，上述用途还可以进一步包括如下附加技术特征至少之一：根据本专利技术的实施例，所述干细胞因子由基质细胞合成。根据本专利技术的实施例，所述基质细胞为骨髓基质细胞。在本专利技术的第二方面，本专利技术提出了一种培养基。根据本专利技术的实施例，所述培养基包含：化合物，所述化合物为式(I)所示化合物或式(I)所示化合物的立体异构体、互变异构体、氮氧化物、溶剂化物、代谢产物、药学上可接受的盐或前药。专利技术人发现，在小鼠骨髓基质细胞培养体系中添加PRX处理后，SCF蛋白表达和分泌水平均明显提高。根据本专利技术实施例的培养基用于培养造血干细胞，可有效促进造血干/祖细胞增殖和/或分化，促进造血干细胞动员、归巢及长期植入；根据本专利技术实施例的培养基用于培养骨髓基质细胞，可有效促进干细胞因子的合成和分泌。根据本专利技术的实施例，上述培养基还可以进一步包括如下附加技术特征至少之一：根据本专利技术的实施例，所述培养基进一步包括胎牛血清或血清替代物以及碱性成纤维生长因子。干细胞因子的合成和分泌效率进一步提高。根据本专利技术的实施例，所述化合物的浓度为0-10μM，如化合物的浓度可以为0.1μM、1μM或10μM，所述胎牛血清或血清替代物的体积分数为5％，所述碱性成纤维生长因子的浓度为10ng/ml。进而利用根据本专利技术实施例的培养基培养骨髓基质细胞，干细胞因子的合成和分泌效率进一步提高。在本专利技术的第三方面，本专利技术提出了式(I)所示化合物或式(I)所示化合物的立体异构体、互变异构体、氮氧化物、溶剂化物、代谢产物、药学上可接受的盐或前药在制备培养基或药物中的用途，所述培养基或药物用于下列的至少之一：培养造血干细胞，促进干细胞因子合成和分泌，促进造血干/祖细胞增殖和/或分化，促进造血干细胞动员，促进造血干细胞移植后归巢及长期植入，促进辐射或化疗后造血功能的恢复重建。专利技术人通过实验发现，PRX能够有效提高基质细胞总SCF的表达和分泌，可作为有效地促进内源SCF合成和分泌的激动剂。利用式(I)所示化合物或式(I)所示化合物的立体异构体、互变异构体、氮氧化物、溶剂化物、代谢产物、药学上可接受的盐或前药所制备的培养基或药物用于培养造血干细胞，促进干细胞因子合成和分泌，促进造血干/祖细胞增殖和/或分化，促进造血干细胞动员，促进造血干细胞移植后归巢及长期植入，促进辐射或化疗后造血功能的恢复重建效果显著。在本专利技术的第四方面，本专利技术提出了一种促进干细胞因子合成和分泌的方法。根据本专利技术的实施例，所述方法包括：利用添加有式(I)所示化合物或式(I)所示化合物的立体异构体、互变异构体、氮氧化物、溶剂化物、代谢产物、药学上可接受的盐或前药的培养基培养基质细胞。根据本专利技术实施例的方法可显著促进基质细胞中干细胞因子合成和分泌，促进造血干/祖细胞增殖和/或分化、促进造血干细胞动员以及归巢和重建。根据本专利技术的实施例，上述方法还可以进一步包括如下附加技术特征至少之一：根据本专利技术的实施例，所述培养基为包含5％胎牛血清(或血清替代物)、10ng/ml碱性成纤维生长因子以及0-10μM所述化合物的αMEM培养基。根据本专利技术实施例的方法促进干细胞因子合成和分泌的效率进一步显著提高。根据本专利技术的实施例，所述基质细胞预先经过预培养，所述预培养的培养基为包含20％胎牛血清或血清替代物以及10ng/ml碱性成纤维生长因子的αMEM培养基，所述预培养后，所述基质细胞的汇合度不小于90％。进而用于基质细胞可处于最佳的状态，可进一步提高基质细胞中干细胞因子合成和分泌的效率。根据本专利技术的实施例，所述化合物的浓度为10μM。专利技术人发现，化合物的浓度为10μM，其促进干细胞因子合成和分泌的效率更高。根本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.式(I)所示化合物或式(I)所示化合物的立体异构体、互变异构体、氮氧化物、溶剂化物、代谢产物、药学上可接受的盐或前药在促进干细胞因子合成和分泌中的用途，

【技术特征摘要】
1.式(I)所示化合物或式(I)所示化合物的立体异构体、互变异构体、氮氧化物、溶剂化物、代谢产物、药学上可接受的盐或前药在促进干细胞因子合成和分泌中的用途，2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述干细胞因子由基质细胞合成；任选地，所述基质细胞为骨髓基质细胞。3.一种培养基，其特征在于，包含：化合物，所述化合物为式(I)所示化合物或式(I)所示化合物的立体异构体、互变异构体、氮氧化物、溶剂化物、代谢产物、药学上可接受的盐或前药。4.根据权利要求3所述的培养基，其特征在于，进一步包括胎牛血清或血清替代物以及碱性成纤维生长因子。5.根据权利要求4所述的培养基，其特征在于，所述化合物的浓度为0-10μM，所述胎牛血清或血清替代物的体积分数为5％，所述碱性成纤维生长因子的浓度为10ng/ml。6.式(I)所示化合物或式(I)所示化合物的立体异构体、互变异构体、氮氧化物、溶剂化物、代谢产物、药学上可接受的盐或前药在制备培养基或药物中的用途，所述培养基或药物用于...

【专利技术属性】
技术研发人员：李艳华，裴雪涛，张博文，何丽娟，覃金华，
申请(专利权)人：中国人民解放军军事科学院军事医学研究院，华南生物医药研究院，
类型：发明
国别省市：北京,11