【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药，具体涉及一种治疗sars-cov-2及其变体感染的多功能组合物及其制备方法。
技术介绍
1、新型冠状病毒主要感染呼吸系统，导致流感样疾病，主要临床表现有咳嗽，发热，寒战，肌痛，腹泻，精神症状，呼吸困难等。同时，该病毒可能会导致免疫细胞过度活化，免疫细胞过度活化产生大量炎症因子，这些炎症因子会召集并激活更多免疫细胞，从而产生更多炎症因子，通过正反馈循环的机制形成炎症因子风暴。以肺部为例，由于肺组织高表达ace2又直接接触外界，所以成为了新型冠状病毒的主要入侵对象。过度活化的肺部免疫细胞会释放大量炎症因子，导致免疫细胞和组织液在肺部积聚，阻塞肺泡与毛细血管之间的气体交换，从而引发急性呼吸窘迫综合征。一旦导致细胞因子风暴就会导致免疫系统无差别的攻击肺部正常细胞与病毒，致使肺部换气功能严重损坏，造成严重的肺损伤和呼吸衰竭，大片白色区域出现在肺部ct上，患者容易发生缺氧并导致死亡。此外，由于所有表达ace2的器官都可能成为新型冠状病毒与免疫系统的交战地，因此感染可能导致多器官衰竭并危及生命。
2、目前，新型冠状病毒有很多突变株，开发出一种针对各变异毒株均有效的抗新型冠状病毒药物势在必行。为此，有一些研究者设计了基于ace2细胞膜的纳米载体，以期实现包括变异株在内的sars-cov-2的有效中和，并取得了满意效果；另有些研究者设计了基于巨噬细胞(如thp-1)膜修饰的纳米载体，以期获得炎症因子的有效中和，获得了较为满意的炎症抑制效果。然而，该类纳米载体仅针对游离病毒以及炎症因子，对于感染细胞内的病毒无抑制
技术实现思路
1、为获得针对sars-cov-2及其变异病毒的普适性抗病毒效果，同时解决游离病毒中和、炎症因子中和以及感染细胞内病毒抑制问题，本专利技术提供了一种治疗sars-cov-2及其变体感染的多功能组合物及其制备方法，该多功能组合物具有彻底清除sars-cov-2及其变体的潜力。
2、为解决上述技术问题，本专利技术提供了以下技术方案：
3、本专利技术提供一种治疗sars-cov-2及其变体感染的多功能组合物，所述组合物按照6ml总体积计，包括如下重量份组分：1～100od针对sars-cov-2变体固定序列的核酸药物、0.5～2.5ml表达ace2蛋白的细胞膜和/或0.5～2.5ml表达细胞因子受体的细胞膜、20～100mg磷脂材料、25～100μg阳离子材料、0.5～10mg胆固醇。
4、优选的，所细胞膜的使用浓度为1×105～1×1010个细胞的细胞膜/ml。
5、优选的，所述针对sars-cov-2及其变体固定序列的核酸药物包括sirna、mrna、mirna、适配体中的一种或多种。
6、优选的，所述表达ace2蛋白的细胞膜包括由表面可表达ace2蛋白的细胞提取纯化得到的细胞膜。
7、优选的，所述表达细胞因子受体的细胞膜包括由表面可表达细胞因子受体的细胞提取纯化得到的细胞膜。
8、优选的，所述磷脂材料包括氢化大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂、二油酰基卵磷脂、二棕榈酰基卵磷脂、二硬脂酰基磷脂酰胆碱、2-棕榈酰磷脂酰甘油、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇及其衍生物中的一种或几种。
9、优选的，所述阳离子材料包括能够协助核酸药物实现内涵体/溶酶体逃逸功能的材料。
10、本专利技术提供所述多功能组合物的制备方法，包括如下步骤：将阳离子材料用hepes溶液稀释后加入到溶有sirna的hepes溶液中，室温孵育，得阳离子材料/sirna复合物；将磷脂材料和胆固醇溶解在氯仿中，真空旋转蒸发形成薄膜，将磷脂薄膜干燥，干燥后的磷脂薄膜使用溶有阳离子材料/sirna复合物的hepes溶液水化处理，然后将所制得的脂质纳米颗粒进行超声处理，得包封有阳离子材料/sirna复合物的脂质纳米颗粒；将表达ace2蛋白的细胞膜与包封有阳离子材料/sirna复合物的脂质纳米颗粒混合，然后将混合溶液依次通过聚碳酸酯膜的脂质体挤出器，反复挤压，即得表达ace2蛋白的细胞膜-sirna/lp；将表达细胞因子受体的细胞膜与包封有阳离子材料/sirna复合物的脂质纳米颗粒混合，然后将混合溶液通过聚碳酸酯膜的脂质体挤出器，反复挤压，即得表达细胞因子受体的细胞膜-sirna/lp；将表达ace2蛋白的细胞膜-sirna/lp与表达细胞因子受体的细胞膜-sirna/lp混合，超声，然后与包封有阳离子材料/sirna复合物的脂质纳米颗粒混合，然后将混合溶液通过聚碳酸酯膜的脂质体挤出器，反复挤压，即得表达ace2蛋白的细胞膜/表达细胞因子受体的细胞膜-sirna/lp。
11、本专利技术提供所述的多功能组合物或所述的制备方法获得的多功能组合物在制备治疗sars-cov-2及其变体感染产品中的应用。
12、与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：
13、本专利技术一方面利用体内细胞表面同时表达自体识别分子cd47的特点实现所构成组合物/载体逃避体内单核巨噬细胞摄取清除的功能，实现长循环效果，另一方面利用ace2高表达细胞膜的sars-cov-2及其变异病毒天然靶标特点，以及thp-1细胞膜的炎症因子天然靶标特点，同时引入针对sars-cov-2及其变异病毒固定核酸序列的治疗sirna，共同构建组合物/载体，实现组合物/载体表面同时携载ace2和炎症因子中和受体，而且可以将针对sars-cov-2及其变异病毒固定核酸序列的治疗sirna精准递送至感染细胞内，实现游离病毒中和、炎症因子中和以及感染细胞内病毒抑制的多角度治疗，不仅可以保证sars-cov-2及其变异病毒的稳定治疗能力，而且可以显著提升新型冠状病毒患者的治疗效果，大幅降低其用药剂量，降低其毒副反应。
14、本专利技术提出的多功能组合物主要由ace2高表达的基因工程改造293t细胞膜、富含细胞因子受体的thp-1细胞膜、针对sars-cov-2及其变体固定序列的sirna、磷脂材料以及阳离子材料组成。相较于单纯由ace2高表达的基因工程改造293t细胞膜、单纯富含细胞因子受体的thp-1细胞膜，以及由ace2高表达的基因工程改造293t细胞膜和富含细胞因子受体的thp-1细胞膜组成的杂化膜，该组合物除由于细胞膜的引入而具有自体识别功能、游离病毒中和功能以及炎症因子中和功能外，还同时具备感染细胞内sars-cov-2及其变体抑制功能，因此更具有彻底清除sars-cov-2及其变体的潜力。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种治疗SARS-CoV-2及其变体感染的多功能组合物，其特征在于，所述组合物按照6ml终体积计，包括如下重量份组分：1～100OD针对SARS-CoV-2变体固定序列的核酸药物、0.5～2.5ml表达ACE2蛋白的细胞膜和/或0.5～2.5ml表达细胞因子受体的细胞膜、20～100mg磷脂材料、25～100μg阳离子材料、0.5～10mg胆固醇。
2.根据权利要求1所述的多功能组合物，其特征在于，所细胞膜的使用浓度为1×105～1×1010个细胞的细胞膜/ml。
3.根据权利要求1所述的多功能组合物，其特征在于，所述针对SARS-CoV-2及其变体固定序列的核酸药物包括siRNA、mRNA、miRNA、适配体中的一种或多种。
4.根据权利要求1所述的多功能组合物，其特征在于，所述表达ACE2蛋白的细胞膜包括由表面可表达ACE2蛋白的细胞提取纯化得到的细胞膜。
5.根据权利要求1所述的多功能组合物，其特征在于，所述表达细胞因子受体的细胞膜包括由表面可表达细胞因子受体的细胞提取纯化得到的细胞膜。
6.根据权利要求1所述
7.根据权利要求1所述的多功能组合物，其特征在于，所述阳离子材料包括能够协助核酸药物实现内涵体/溶酶体逃逸功能的材料。
8.权利要求1-7任意一项所述的多功能组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
9.权利要求1～7任意一项所述的多功能组合物或权利要求8所述的制备方法获得的多功能组合物在制备治疗SARS-CoV-2及其变体感染产品中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种治疗sars-cov-2及其变体感染的多功能组合物，其特征在于，所述组合物按照6ml终体积计，包括如下重量份组分：1～100od针对sars-cov-2变体固定序列的核酸药物、0.5～2.5ml表达ace2蛋白的细胞膜和/或0.5～2.5ml表达细胞因子受体的细胞膜、20～100mg磷脂材料、25～100μg阳离子材料、0.5～10mg胆固醇。
2.根据权利要求1所述的多功能组合物，其特征在于，所细胞膜的使用浓度为1×105～1×1010个细胞的细胞膜/ml。
3.根据权利要求1所述的多功能组合物，其特征在于，所述针对sars-cov-2及其变体固定序列的核酸药物包括sirna、mrna、mirna、适配体中的一种或多种。
4.根据权利要求1所述的多功能组合物，其特征在于，所述表达ace2蛋白的细胞膜包括由表面可表达ace2蛋白的细胞提取纯...
【专利技术属性】
技术研发人员：高春生，李志平，李林，杨阳，王玉丽，龚伟，杨美燕，
申请(专利权)人：中国人民解放军军事科学院军事医学研究院，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。