【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物，涉及针对白介素6蛋白的单克隆抗体及其应用。
技术介绍
1、白介素-6(interleukin-6，il-6)作为一种多效的细胞因子，参与机体内众多生理与病理过程。il-6信号通路异常活化及功能失调与多种疾病密切相关，如自身免疫疾病、慢性炎症、恶性肿瘤等。另外il-6的异常表达在新型冠状病毒感染(covid-19)细胞因子风暴综合征(css)中也扮演重要角色。有别于阻断il-6r或gp130等公共受体分子，阻断il-6蛋白的治疗性单克隆抗体特异性更高。现阶段只有1款靶向il-6蛋白的单克隆抗体药物获美国fda和中国nmpa批准上市(注射用司妥昔单抗，siltuximab)，以及超过8个治疗性单克隆抗体在临床研究阶段。注射用司妥昔单抗目前仅被批准用于治疗人体免疫缺陷病毒(hiv)阴性和人疱疹病毒8型(hhv-8)阴性的多中心castleman病(mcd)成人患者。在临床研究中，部分在研靶向il-6蛋白的治疗性单克隆抗体已经显示出其独有的治疗特点及有益的疗效(clazakizumab用于晚期抗体介导的排斥反应,doberer k,et al.jasn,2021,32(3):708-722；ziltivekimab用于动脉粥样硬化高危慢性肾脏病患者(ckd)，ridker p m,etal.the lancet,2021,397(10289):2060-2069.)。
2、研发靶向il-6的高亲和力的抗体药物，可能用于il-6信号通路异常活化及功能失调相关的多种疾病的治疗，如自身免疫疾病、慢性炎症、恶性肿
技术实现思路
1、为了解决现有技术中存在的技术问题，本专利技术提供了以下的技术方案：
2、本专利技术第一方面提供了一种抗il-6的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述单克隆抗体或其抗原结合片段被命名为3c6，所述3c6包括seq id no:1所示的重链可变区cdr1、seq id no:2所示的重链可变区cdr2、seq id no:3所示的重链可变区cdr3、seq id no:9所示的轻链可变区cdr1、seq id no:10所示的轻链可变区cdr2、和seq id no:11所示的轻链可变区cdr3。
3、术语“cdr”和“互补决定区”可互换使用，并且是指抗体的参与结合至抗原的可变链的一部分。因此，cdr是“抗原结合片段”的一部分或者是“抗原结合片段”。在一些实施例中，单克隆抗体包含共同形成抗原结合片段的三个重链可变区cdr与三个轻链可变区cdr。“cdr”可指由本领域已知的任何方法(包括方法的组合)定义的cdr。
4、进一步，所述cdr的划分方式包括但不限于kabat、imgt、chothia、abm或contact编号系统。
5、进一步，所述单克隆抗体或其抗原结合片段还包括重链可变区框架区fr1、fr2、fr3、fr4，轻链可变区框架区fr1、fr2、fr3、fr4。
6、进一步，所述单克隆抗体或其抗原结合片段的重链可变区框架区fr1、fr2、fr3、fr4的序列分别具有seq id no:4-7所述的氨基酸序列至少90％序列一致性，优选至少95％序列一致性，优选至少96％序列一致性，优选至少97％序列一致性，优选至少98％序列一致性，优选至少99％序列一致性，优选至少100％序列一致性；所述单克隆抗体或其抗原结合片段的轻链可变区框架区fr1、fr2、fr3、fr4的序列分别具有seq id no:12-15所述的氨基酸序列至少90％序列一致性，优选至少95％序列一致性，优选至少96％序列一致性，优选至少97％序列一致性，优选至少98％序列一致性，优选至少99％序列一致性，优选至少100％序列一致性。
7、进一步，所述单克隆抗体或其抗原结合片段的重链可变区框架区fr1、fr2、fr3、fr4的序列分别如seq id no:4-7所示；所述单克隆抗体或其抗原结合片段的轻链可变区框架区fr1、fr2、fr3、fr4的序列分别如seq id no:12-15所示。
8、进一步，所述单克隆抗体或其抗原结合片段的重链可变区的序列具有seq id no:8所示的氨基酸序列至少90％序列一致性，优选至少95％序列一致性，优选至少96％序列一致性，优选至少97％序列一致性，优选至少98％序列一致性，优选至少99％序列一致性，优选至少100％序列一致性；所述单克隆抗体或其抗原结合片段的轻链可变区的序列具有seqid no:16所示的氨基酸序列至少90％序列一致性，优选至少95％序列一致性，优选至少96％序列一致性，优选至少97％序列一致性，优选至少98％序列一致性，优选至少99％序列一致性，优选至少100％序列一致性。
9、进一步，所述单克隆抗体或其抗原结合片段的重链可变区的序列如seq id no:8所示；所述单克隆抗体或其抗原结合片段的轻链可变区的序列如seq id no:16所示。
10、术语“il-6”是指来自人类的全长il-6蛋白(uniprotkb p05231；genbank登录号np_000591.1)和具有交叉反应性的来自其他物种的全长il-6蛋白(包括猕猴(uniprotkbaoa1d5qm02-1；genbank登录号np_001274245.1)、小鼠(uniprotkb p08505；genbank登录号np_112445.1)和大鼠(uniprotkb p20607；genbank登录号np_036721.1)。
11、本专利技术第二方面提供了一种核酸分子，所述核酸分子编码前面所述的单克隆抗体或其抗原结合片段。
12、进一步，所述核酸分子包括编码重链可变区的cdr1、cdr2、cdr3的核苷酸序列，和编码轻链可变区的cdr1、cdr2、cdr3的核苷酸序列。
13、进一步，所述编码重链可变区的cdr1、cdr2、cdr3的核苷酸序列具有与seq id no：17-19所示的核苷酸序列至少90％序列一致性，优选至少95％序列一致性，优选至少96％序列一致性，优选至少97％序列一致性，优选至少98％序列一致性，优选至少99％序列一致性，优选至少100％序列一致性。
14、进一步，所述编码轻链可变区的cdr1、cdr2、cdr3的核苷酸序列具有与seq id no:25-27所示的核苷酸序列至少90％序列一致性，优选至少95％序列一致性，优选至少96％序列一致性，优选至少97％序列一致性，优选至少98％序列一致性，优选至少99％序列一致性，优选至少100％序列一致性。
15、进一步，所述核酸分子还包括编码重链可变区框架区的fr1、fr2、fr3、fr4的核苷酸序列，和编码轻链可变区框架区的fr1、fr2、fr3、fr4的核苷酸序列。...
【技术保护点】
1.一种抗IL-6的单克隆抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述单克隆抗体或其抗原结合片段被命名为3C6，所述3C6包括SEQ ID NO:1所示的重链可变区CDR1、SEQ ID NO:2所示的重链可变区CDR2、SEQ ID NO:3所示的重链可变区CDR3、SEQ ID NO:9所示的轻链可变区CDR1、SEQ ID NO:10所示的轻链可变区CDR2、和SEQ ID NO:11所示的轻链可变区CDR3；
2.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码权利要求1所述的单克隆抗体或其抗原结合片段；
3.一种载体，其特征在于，所述载体包括权利要求2所述的核酸分子；
4.一种细胞，其特征在于，所述细胞包括权利要求1所述的单克隆抗体或其抗原结合片段、权利要求2所述的核酸分子、或权利要求3所述的载体；
5.一种组合物，其特征在于，所述组合物包括权利要求1所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，和可检测标记物；
6.一种产品，其特征在于，所述产品包括权利要求1所述的单克隆抗体或其抗原结合片段、权利要求2所述的核酸分子、或权利要求3所
7.如下任一项所述的应用，其特征在于，所述应用包括：
8.一种生产权利要求1所述的单克隆抗体或其抗原结合片段的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：将权利要求2所述的核酸分子或权利要求3所述的载体转化到细胞，培养细胞，细胞培养液中分离提纯得到权利要求1所述的单克隆抗体或其抗原结合片段。
9.一种体外抑制IL-6的方法，其特征在于，所述方法包括将权利要求1所述的单克隆抗体或其抗原结合片段、权利要求2所述的核酸分子，或权利要求3所述的载体导入到生物体细胞中，通过表达权利要求1所述的单克隆抗体或其抗原结合片段抑制IL-6的活性。
10.一种非诊断和非治疗目的的检测待测样品中IL-6的方法，其特征在于，所述方法包括将待测样品与权利要求1所述的单克隆抗体或其抗原结合片段接触，或将待测样品与权利要求5所述的组合物接触；检测IL-6与前述的单克隆抗体或其抗原结合片段的结合情况，或检测IL-6与前述组合物的结合情况。
...【技术特征摘要】
1.一种抗il-6的单克隆抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述单克隆抗体或其抗原结合片段被命名为3c6，所述3c6包括seq id no:1所示的重链可变区cdr1、seq id no:2所示的重链可变区cdr2、seq id no:3所示的重链可变区cdr3、seq id no:9所示的轻链可变区cdr1、seq id no:10所示的轻链可变区cdr2、和seq id no:11所示的轻链可变区cdr3；
2.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码权利要求1所述的单克隆抗体或其抗原结合片段；
3.一种载体，其特征在于，所述载体包括权利要求2所述的核酸分子；
4.一种细胞，其特征在于，所述细胞包括权利要求1所述的单克隆抗体或其抗原结合片段、权利要求2所述的核酸分子、或权利要求3所述的载体；
5.一种组合物，其特征在于，所述组合物包括权利要求1所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，和可检测标记物；
6.一种产品，其特征在于，所述产品包括权利要求1所述的单克隆抗体或其抗原结合片段、权利...
【专利技术属性】
技术研发人员：王晶，李开通，冯健男，蔡军雨，肖鹤，陈国江，乔春霞，李新颖，罗龙龙，于吉军，刘成华，沈倍奋，
申请(专利权)人：中国人民解放军军事科学院军事医学研究院，
类型：发明
国别省市：
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