增强胎肝造血干细胞CD34表达的培养液及其制备方法技术

技术编号:1738998 阅读:264 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术涉及一种生物工程技术领域的增强胎肝造血干细胞CD34表达的培养液及其制备方法。培养液组分和重量百分比为:MEM:56.5%-64.7%;RPMI-1640:29.4%-30.4%;Hanks:5.88%-13.0%等。培养液的制备方法:①制得基础培养液;②按所述比例再取相关组分依次加入基础培养液中,搅拌、溶解;③将纯化出的间充质细胞,置入培养瓶,进行培养、冲洗,混合,连续培养将上清液全部收集,经过过滤后,离心,将全部细胞碎片及非溶解性的物质去除,制得条件培养液;④将条件培养液与MEM混合后,利用碳酸氢钠将混合培养液的pH调节至7.40~7.45,经过过滤即得培养液。本发明专利技术对干细胞所具有的CD34表达特征实施强化表达,达到可标识、纯化的范围,提高了干细胞可标识数量,安全可靠,满足临床应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种生物工程
的培养液及其制备方法。具体涉及一种 增强胎肝造血干细胞CD34表达的培养液及其制备方法
技术介绍
造血干细胞在上世纪初被提出且应用于临床已经显示出它的治疗潜力,诸 多的血液系统疾病在干细胞移植治疗后使病患的临床症状得以改善,患者的生存 期显著的延长。造血干细胞的主要来源包括骨髓源造血干细胞、脐血造血干细胞、 胎肝造血干细胞。由于造血干细胞来源不同,干细胞所具备的抗原性亦不同,主 要表现为骨髓源造血干细胞的抗原性(例如HLA)强,植入体内的骨髓源造 血干细胞,如果不经配型,首先宿主的免疫系统会对植入体内的造血干细胞产生 排斥作用。输入的抗原性强的干细胞也会排斥宿主,强烈的排斥反应会引起一 系列的系统性的免疫变态反应,并导致人体器官的功能障碍和衰竭。因此,骨髓 源造血干细胞的植入必须将供体和配体的抗原型作完全比较后,在找出供体和宿 主抗原相同或极相近者才能做细胞植入的治疗,这最终导致患者只有 10万或百万分之一的机会寻找到符合自身细胞要求的供体,临床应用存在极大 困难。脐带血提供的造血干细胞由于抗原性较骨髓源造血干细胞弱,故理论上脐 血造血干细胞是理本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种增强胎肝造血干细胞CD34表达的培养液,其特征在于,组分和重量百分比为:MEM:56.5%-64.7%;RPMI-1640:29.4%-30.4%;Hanks:5.88%-13.0%;人类干细胞生长因子-2:470×10↑[-9]%-1740×10↑[-9]%;人类干细胞生长因子:1.9×10↑[-9]%-2.8×10↑[-9]%;人类粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子:2.0×10↑[-9]%-2.9×10↑[-9]%;CD135配体蛋白:9.4×10↑[-9]%-10.8×10↑[-9]%;人类促红细胞生成因子:1.4×10↑[-9]%-2.4×10↑[-9]%;人类上皮细胞生成因子:9.4...

【技术特征摘要】
1、一种增强胎肝造血干细胞CD34表达的培养液,其特征在于,组分和重量百分比为MEM56.5%-64.7%;RPMI-164029.4%-30.4%;Hanks5.88%-13.0%;人类干细胞生长因子-2470×10-9%-1740×10-9%;人类干细胞生长因子1.9×10-9%-2.8×10-9%;人类粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子2.0×10-9%-2.9×10-9%;CD135配体蛋白9.4×10-9%-10.8×10-9%;人类促红细胞生成因子1.4×10-9%-2.4×10-9%;人类上皮细胞生成因子9.4×10-9%-10.8×10-9%;人类促成纤维细胞生成因子-b9.4×10-9%-10.8×10-9%。2、 根据权利要求1所述的增强胎肝造血干细胞CD34表达的培养液,其特 征是,组分和重量百分比为MEM : 59. 36%—61%;RPMI — 1640 : 29. 7%_30. 14%;Hanks : 9. 3%—10. 5%;人类干细胞生长因子-2: 850 X 10—9 %—1260X 10—9%; 人类干细胞生长因子2.1X10—9 % — 2.5Xl(T'%; 人类粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子2. 2X l(T % — 2. 6X 10—9 %; CD135配体蛋白: 9. 8X10—9%—10. 4X10—9 %;人类促红细胞生成因子 1.7X10—、一2. 1X10—9 %;人类上皮细胞生成因子9. 7X10—9%—10. 4X10—9 %; 人类促成纤维细胞生成因子-b: 9. 6X10—、一10. 4X10—9 %。3、 一种如权利要求l所述的增强胎肝造血干细胞CD34表达的培养液的制 备方法,其特征是,包括以下步骤① 按所述比例取MEM、 RPMI 1640、 Hanks混合后,充分搅拌,制得基础培养液;② 按所述比例再取人类干细胞生长因子-2、人类干细胞生长因子、人类粒 细胞-巨噬细胞集落刺激因子、CD135配体蛋白、人类促红细...

【专利技术属性】
技术研发人员:郝晓南赵珺章永泰
申请(专利权)人:上海天生生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:31[中国|上海]

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