抗CEACAM6抗体及其用途制造技术

本公开提供重组抗原结合区和抗体以及包含此类抗原结合区的功能片段，所述抗原结合区对人和食蟹猴CEACAM6(癌胚抗原相关细胞粘附分子6、CD66c、非特异性交叉反应抗原、NCA、NCA‑50/90)是特异性的，并且所述重组抗原结合区和抗体以及功能片段不与密切相关的人CEACAM1、人CEACAM3和人CEACAM5显著交叉反应。本公开进一步提供生成这种抗体的方法。因此，所述抗体可用于治疗与CEACAM6的表达相关的癌症和其他病症和病况。本公开还提供编码前述抗体的核酸序列、含有所述核酸序列的载体、药物组合物和具有使用说明书的药剂盒。

Anti CEACAM6 antibody and its use

The present invention provides recombinant antigen binding regions and antibodies and antigen binding fragments containing the functional area, the antigen binding region of human and cynomolgus monkey CEACAM6 (carcinoembryonic antigen related cell adhesion molecule 6, CD66c, nonspecific cross reacting antigen NCA, NCA, 50/90) is specific, and the recombinant the antigen binding region and antibodies and functional fragments and closely related to human CEACAM1, CEACAM3 and CEACAM5 were cross reaction. The present disclosure further provides a method for generating this antibody. Therefore, the antibody can be used for related cancers and other disorders and conditions and therapy of CEACAM6. The present disclosure also provides a sequence of nucleic acids encoding the preceding antibody, a carrier containing the sequence of the nucleic acid, a pharmaceutical composition, and a drug box with a description of the use.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗CEACAM6抗体及其用途本专利技术提供重组抗原结合区和抗体以及包含此类抗原结合区的功能片段，所述抗原结合区对人和食蟹猴(Macacafascicularis)CEACAM6(癌胚抗原相关细胞粘附分子6、CD66c、非特异性交叉反应抗原、NCA、NCA-50/90)是特异性的，并且因此不与密切相关的人CEACAM1、人CEACAM3和人CEACAM5显著交叉反应。本专利技术进一步提供生成这种抗体的方法。因此，所述抗体可用于治疗与CEACAM6的表达相关的癌症和其他病症和病况。本专利技术还提供编码前述抗体的核酸序列、含有所述核酸序列的载体、药物组合物和具有使用说明书的药剂盒。专利技术背景基于抗体的疗法是有效和临床上确立的各种癌症(包括实体瘤)的治疗。例如，HERCEPTIN®已成功地用于治疗乳腺癌，且RITUXAN®在B细胞相关的癌症类型中是有效的。对于开发新颖的成功的基于抗体的疗法核心的是分离针对发现在靶细胞(例如，癌细胞、免疫细胞等)上优先表达的细胞-表面蛋白的抗体，其能够在功能上改变相应受体的活性。用于免疫细胞活化和因此用于癌症免疫治疗的免疫检测点分子的抗体阻断是临床上验证的方法。在2011年，CTLA-4阻断抗体伊匹单抗(Ipilimumab)已被FDA批准用于转移性黑色素瘤的2线治疗(Yervoy)。另一个实例是阻断PD-1/PD-L1轴，对此已批准数种药物或目前处于临床开发且在黑色素瘤、RCC和肺癌中已报道令人印象深刻的临床反应(Henick等人,ExpertOpinTherTargets.2014Dec;18(12):1407-20))。癌胚抗原相关细胞粘附分子(CEACAM)家族的蛋白属于免疫球蛋白(Ig)超基因家族且一般表现出经鉴定为N结构域的可变(V)样结构域。N结构域随后为无或至多6个恒定C2样Ig结构域(称为A或B)。这些胞外结构域作为同嗜性和异嗜性细胞间粘附分子(Obrinck,CurrOpinCellBiol.1997Oct;9(5):616-26)或作为人类和啮齿类病原体受体(Kuespert等人,CurrOpinCellBiol.2006Oct;18(5):565-71;Voges等人,PLoSOne.2012;7(6):e39908)为CEACAM功能性所需。CEACAM受体缔合成二聚体或寡聚体和与其他配偶体在细胞膜多重缔合且因此调节重要功能。除了在人类组织中的表达外，CEACAM基因家族在27种其他哺乳动物物种中高度保守且最好地描述于小鼠、大鼠、牛、狗、鸭嘴兽和负鼠中(Kammerer和Zimmermann,BMCBiol.2010Feb4;8:12)。CEACAM的最好表征的生物功能是通过其同嗜性和异嗜性相互作用来支持细胞-细胞粘附，包括在三维组织结构的分化和形成、血管生成、细胞凋亡、肿瘤抑制和转移中的作用(Kuespert等人,CurrOpinCellBiol.2006Oct;18(5):565-71)。关于家族成员的更多细节描述于其他综述(Horst和Wagener,HandbExpPharmacol.2004;(165):283-341;Gray-Owen和Blumberg,NatRevImmunol.2006Jun;6(6):433-46)。CEACAM6(癌胚抗原相关细胞粘附分子6，CD66c，非特异性交叉反应抗原，NCA，NCA-50/90)是具有一个N-结构域和2个C2样结构域的糖基磷脂酰肌醇(GPI)-连接的细胞表面蛋白，其通过其具有各种膜受体(已鉴定其中的一些)的胞外结构域介导许多可能的顺式或反式引导的CEACAM相互作用(Beauchemin和Arabzadeh,CancerMetastasisRev.2013Dec;32(3-4):643-71)。CEACAM6表达于各种正常人类组织、诸如结肠(Blumenthal等人,BMCCancer,2007,Jan3;7:2.)、肺(Kolla等人,AmJPhysiolLungCellMolPhysiol296:L1019-L1030)和粒细胞(Kuroki等人,BiochemBiophysResCommun.1992Jan31;182(2):501-6)的上皮中。在粒细胞谱系中，CEACAM6表达在粒细胞成熟的所有阶段，除了早期谱系特化的前体细胞(Strickland等人,JPathol.2009Jul;218(3):380-90);Schölzel等人,AmericanJournalofPathology,156(2),595-605)。CEACAM6在啮齿类中不表达(Beauchemin等人,ExpCellRes.1999Nov1;252(2):243-9)。对于几种癌症，已描述了CEACAM6表达。在结肠癌中，CEACAM6在55%的病例上调并且是允许将患者再细分成低风险和高风险组的独立预后因子(Jantscheff等人,JClinOncol.2003Oct1;21(19):3638-46)。在胰腺癌中，发现92%(n=82)的分析样品是阳性的，同时CEACAM6表达在高级PanIN病变中比在低级PanIN病变中更普遍(Duxbury等人,AnnSurg.2005Mar;241(3):491-6)。这在另一个研究中得到证实，其中>90%的侵入性胰腺癌(测试的115个中的110个)显示CEACAM6的强烈(过度)表达(Strickland等人,JPathol.2009Jul;218(3):380-90)。此外，Blumenthal等人报道了在乳腺肿瘤、胰腺肿瘤、卵巢腺癌、肺腺癌、淋巴结转移和从乳腺、结肠和肺肿瘤的转移中的CEACAM6表达(Blumenthal等人,BMCCancer.2007Jan3;7:2)。其他人还报道了乳腺癌中的CEACAM6表达(Maraqa等人,ClinCancerRes.2008Jan15;14(2):405-11;Poola等人,ClinCancerRes.2006Aug1;12(15):4773-83;Balk-Moller等人,AmJPathol.2014Apr;184(4):1198-208);Tsang等人,BreastCancerResTreat.2013Nov;142(2):311-22)。此外，已报道了多发性骨髓瘤(Witzens-Harig等人,Blood2013May30;121(22):4493-503)、胃癌(Deng等人,GenetMolRes.2014Sep26;13(3):7686-97)和头颈癌(Cameron等人,MolCancer.2012Sep28;11:74)中的CEACAM6表达。实验证据支持了CEACAM6作为转移的重要调节因子的作用。Kim等人已显示，分别使用CEACAM6-特异性siRNA减弱LoVo细胞中的CEACAM6表达或增加其在HCT116细胞中的表达，通过胞外基质阻碍或扩大侵入性(Kim等人,ClinChimActa.2013Jan16;415:12-9)。CEACAM6表达的抑制导致E-钙粘素(E-cadherin)启动子活性升高。Blumenthal等人显示，CEACAM5和CEACAM6促本文档来自技高网...

【技术保护点】
分离的抗体或其抗原结合片段，其特异性结合人CEACAM6和食蟹猴(Macaca fascicularis) CEACAM6。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.03.23 EP 15160292.71.分离的抗体或其抗原结合片段，其特异性结合人CEACAM6和食蟹猴(Macacafascicularis)CEACAM6。2.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其结合由SEQ-IDNO:179的氨基酸35-142和SEQ-IDNO:177的氨基酸35-142代表的CEACAM6结构域1。3.根据权利要求1或2所述的抗体或其抗原结合片段，其不与人CEACAM1、人CEACAM3和人CEACAM5显著交叉反应。4.根据权利要求1至3中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其干扰CEACAM6和CEACAM1相互作用。5.根据权利要求1至4中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其能够朝向更加活化的表型改变肿瘤抗原特异性T细胞的细胞因子概况，所述更加活化的表型的特征在于IFN-γ分泌相比于对照样品增加，优选≥1.5倍增加。6.根据前述权利要求中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其结合人CEACAM6的表位，其中所述表位包含一个或多个选自SEQIDNO:17的Gln60、Asn61、Arg62、Ile63、Val83、Ile84、Gly85、Thr90、Ser127、Asp128和Leu129的氨基酸残基。7.根据权利要求6所述的抗体或其抗原结合片段，其结合人CEACAM6的表位，其中所述表位包含SEQIDNO:179的氨基酸残基Gln60、Asn61、Arg62、Ile63、Val83、Ile84、Gly85、Thr90、Ser127、Asp128和Leu129。8.根据权利要求6或7所述的抗体或其抗原结合片段，其结合包含Ile63Leu突变的人CEACAM6蛋白，且其不结合根据SEQIDNO:179的包含Ile63Phe突变的人CEACAM6蛋白。9.根据权利要求1至5中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其包含i.含有包含SEQIDNO:48的H-CDR1、包含SEQIDNO:49的H-CDR2和包含SEQIDNO:50的H-CDR3的重链抗原结合区以及含有包含SEQIDNO:52的L-CDR1、包含SEQIDNO:53的L-CDR2和包含SEQIDNO:54的L-CDR3的轻链抗原结合区，或ii.含有包含SEQIDNO:106的H-CDR1、包含SEQIDNO:107的H-CDR2和包含SEQIDNO:108的H-CDR3的重链抗原结合区以及含有包含SEQIDNO:110的L-CDR1、包含SEQIDNO:111的L-CDR2和包含SEQIDNO:112的L-CDR3的轻链抗原结合区，或iii.含有包含SEQIDNO:4的H-CDR1、包含SEQIDNO:5的H-CDR2和包含SEQIDNO:6的H-CDR3的重链抗原结合区以及含有包含SEQIDNO:8的L-CDR1、包含SEQIDNO:9的L-CDR2和包含SEQIDNO:10的L-CDR3的轻链抗原结合区，或iv.含有包含SEQIDNO:34的H-CDR1、包含SEQIDNO:35的H-CDR2和包含SEQIDNO:36的H-CDR3的重链抗原结合区以及含有包含SEQIDNO:38的L-CDR1、包含SEQIDNO:39的L-CDR2和包含SEQIDNO:40的L-CDR3的轻链抗原结合区，或v.含有包含SEQIDNO:120的H-CDR1、包含SEQIDNO:121的H-CDR2和包含SEQIDNO:122的H-CDR3的重链抗原结合区以及含有包含SEQIDNO:124的L-CDR1、包含SEQIDNO:125的L-CDR2和包含SEQIDNO:126的L-CDR3的轻链抗原结合区，或vi.含有包含SEQIDNO:24的H-CDR1、包含SEQIDNO:25的H-CDR2和包含SEQIDNO:26的H-CDR3的重链抗原结合区以及含有包含SEQIDNO:28的L-CDR1、包含SEQIDNO:29的L-CDR2和包含SEQIDNO:30的L-CDR3的轻链抗原结合区，或vii.含有包含SEQIDNO:76的H-CDR1、包含SEQIDNO:77的H-CDR2和包含SEQIDNO:78的H-CDR3的重链抗原结合区以及含有包含SEQIDNO:80的L-CDR1、包含SEQIDNO:81的L-CDR2和包含SEQIDNO:82的L-CDR3的轻链抗原结合区，或viii.含有包含SEQIDNO:134的H-CDR1、包含SEQIDNO:135的H-CDR2和包含SEQIDNO:136的H-CDR3的重链抗原结合区以及含有包含SEQIDNO:138的L-CDR1、包含SEQIDNO:139的L-CDR2和包含SEQIDNO:140的L-CDR3的轻链抗原结合区，或ix.含有包含SEQIDNO:148的H-CDR1、包含SEQIDNO:149的H-CDR2和包含SEQIDNO:150的H-CDR3的重链抗原结合区以及含有包含SEQIDNO:152的L-CDR1、包含SEQIDNO:153的L-CDR2和包含SEQIDNO:154的L-CDR3的轻链抗原结合区，或x.含有包含SEQIDNO:14的H-CDR1、包含SEQIDNO:15的H-CDR2和包含SEQIDNO:16的H-CDR3的重链抗原结合区以及含有包含SEQIDNO:18的L-CDR1、包含SEQIDNO:19的L-CDR2和...

【专利技术属性】
技术研发人员：J维卢达，M特劳特魏因，U格里灿，C弗赖贝格，F迪特默，D舍恩菲尔德，JM格吕克，J平克特，EM古蒂雷斯，S戈尔菲尔，S霍尔顿，P贝克霍夫，葛英姿，
申请(专利权)人：拜耳制药股份公司，
类型：发明
国别省市：德国,DE