具有酶促可裂解基团的细胞毒性活性物质的前药制造技术

本发明专利技术涉及新的通式(Ia)的前药或缀合物其中细胞毒性活性物质例如驱动蛋白纺锤体蛋白抑制剂被通过豆荚蛋白可裂解的基团掩蔽，并且因此释放活性物质，以及涉及这些前药或缀合物用于治疗和/预防疾病的用途，以及涉及这些前药或缀合物用于制备治疗和/预防疾病的药物的用途，所述疾病尤其为过度增殖和/或血管生成病症，例如癌症。症。

【技术实现步骤摘要】
具有酶促可裂解基团的细胞毒性活性物质的前药
本申请是申请日为2017年03月21日、申请号为201780019957.2、专利技术名称为“具有酶促可裂解基团的细胞毒性活性物质的前药”的中国专利申请(其对应PCT申请的申请日为2017年03月21日、申请号为PCT/EP2017/056684)的分案申请。
[0001]引言和现有技术本专利技术涉及新的前药，其中细胞毒性活性物质(例如驱动蛋白纺锤体蛋白抑制剂)与由肿瘤相关蛋白酶选择性裂解并因此释放活性物质的基团缀合，以及这些前药或缀合物用于治疗和/或预防疾病的用途，以及这些前药用于制备药物的用途，所述药物用于治疗和/或预防疾病，尤其是过度增殖和/或血管生成病症，例如癌症。这种治疗可以作为单一疗法实施，或者与其他药物或另外的治疗措施组合实施。
[0002]癌细胞经常以比正常细胞更高的程度表达特定的蛋白酶。这导致了增加细胞毒性活性物质对癌细胞的选择性的方法，其中活性物质与由这种蛋白酶裂解的基团结合，结果释放出活性物质。
[0003]这种肿瘤相关蛋白酶是豆荚蛋白(legumain)。豆荚蛋白是天冬酰胺酰基内肽酶(S.Ishii,Methods Enzymol.1994,244,604；J.M.Chen等人J.Biol.Chem.1997,272,8090)，并且已用于加工小细胞毒性分子的前药，例如多柔比星和依托泊苷衍生物等(W.Wu等人Cancer Res.2006,66,970；L.Stern等人Bioconjugate Chem.2009,20,500；K.M.Bajjuri等人ChemMedChem 2011,6,54)。
[0004]US 2015/0343083 A1描述了式R
‑
Y
‑
Z
‑
Asn
‑
接头
‑
D的豆荚蛋白可裂解的肽
‑
活性物质缀合物，其中接头代表对氨基苄基氨基甲酰基或对氨基苄基碳酸酯，R是选自不同化学基团的基团，D是细胞毒性活性物质，Asn代表氨基酸天冬酰胺，Y代表选自Ala、Thr、Ser、Leu、Arg、Pro、Val、Tyr和Phe的氨基酸，Z代表选自Ala、Thr、Asn和Pro的氨基酸，其中这些氨基酸总是处于天然L构型。
[0005]专利技术概述本专利技术涉及提高细胞毒性活性物质的肿瘤选择性的问题。为了解决这个问题，本专利技术提供了细胞毒性活性物质分子的前药。在该上下文中，活性物质分子与通过酶豆荚蛋白可裂解的基团缀合，其中活性物质和通过豆荚蛋白可裂解基团直接通过共价键或通过自消接头连接。这些前药优选含有结合物，该结合物在与肿瘤细胞的靶分子结合后被肿瘤细胞内化并在细胞内(优选溶酶体)加工。该结合物可以任选地通过接头与活性物质分子结合，使得两个基团(豆荚蛋白可裂解的基团和结合物)必须彼此独立地加工以形成活性代谢物，或者结合物可以任选地通过接头与通过酶豆荚蛋白可裂解基团结合(使得在酶豆荚蛋白可裂解的基团裂解后，活性物质与结合物或其衍生物分开存在)。优选的活性物质分子是驱动蛋白纺锤体蛋白抑制剂(KSP抑制剂)。在与肿瘤细胞上的靶分子结合后被肿瘤细胞内化并在细胞内(优选溶酶体)加工的结合物优选是抗体。特别优选抗体
‑
活性物质缀合物(ADC)，其中抗体和活性物质通过具有豆荚蛋白可裂解基团的接头彼此连接。此外，优选前药与抗体的缀合物(APDC)，其中抗体通过接头与活性物质的前药结合，其中活性物质的作用被豆荚蛋白可裂解基团掩盖。根据本专利技术使用的豆荚蛋白可裂解基团具有结构X
‑
L
‑
Asn
或X
‑
L
‑
Asp，其中X代表D
‑
Ala、D
‑
Pro、D
‑
Val、D
‑
Nva、D
‑
Leu、D
‑
Ile、D
‑
Met、D
‑
Phe、D
‑
Tyr、D
‑
Trp、D
‑
Ser、D
‑
Thr、D
‑
Cys、D
‑
Asn、D
‑
Gln、D
‑
Asp、D
‑
Glu、D
‑
Lys、D
‑
Arg、D
‑
瓜氨酸或D
‑
His或相应的N
‑
烷基化氨基酸(C1
‑
3烷基化，优选甲基化)，并且其中最多2个其他氨基酸可以与X以N
‑
结合形式存在。在该上下文中，在豆荚蛋白可裂解接头中引入D
‑
氨基酸导致健康器官溶酶体的稳定性增加(在C
‑
1c章节中显示)。正如通过与合适的参考实施例的代表性比较所显示的(C
‑
1a章节)，本专利技术的在接头中具有D
‑
氨基酸的ADC和APDC具有高抗肿瘤作用，所述抗肿瘤作用令人惊讶地不逊于或几乎不逊于接头中具有全L构型的差向异构体(参考实施例系列R3、4、5和9)(参见C
‑
1a章节)。
[0006]本专利技术的活性物质D的前药具有以下通式Ia：其中m为0至2；n为0或1；X为
‑
C(＝O)
‑
NH2或
‑
COOH，L
a
为自消接头，A1为源自氨基酸Gly、Pro、Ala、Val、Nva、Leu、Ile、Met、Phe、Tyr、Trp、Ser、Thr、Cys、Asn、Gln、Asp、Glu、Lys、Arg、瓜氨酸和His之一或各自的N
‑
烷基氨基酸之一的基团，A2为源自氨基酸D
‑
Ala、D
‑
Pro、D
‑
Val、D
‑
Nva、D
‑
Leu、D
‑
Ile、D
‑
Met、D
‑
Phe、D
‑
Tyr、D
‑
Trp、D
‑
Ser、D
‑
Thr、D
‑
Cys、D
‑
Asn、D
‑
Gln、D
‑
Asp、D
‑
Glu、D
‑
Lys、D
‑
Arg、D
‑
瓜氨酸或D
‑
His之一或各自的N
‑
烷基氨基酸之一的基团，R2为
‑
H或C1‑
C3‑
烷基，或者如果A2是源自D
‑
Pro的基团，R2为与脯氨酸环的亚甲基的键，D为
‑
D1‑
(L
b
)
o
‑
(LIG)
p
，D1为细胞毒性本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.下式Ia的化合物：其中m为0至2；n为0或1；X为
‑
C(＝O)
‑
NH2或
‑
COOH，L
a
为自消接头，A1为源自氨基酸Gly、Pro、Ala、Val、Nva、Leu、Ile、Met、Phe、Tyr、Trp、Ser、Thr、Cys、Asn、Gln、Asp、Glu、Lys、Arg、瓜氨酸和His之一或各自的N
‑
烷基氨基酸之一的基团，A2为源自氨基酸D
‑
Ala、D
‑
Pro、D
‑
Val、D
‑
Nva、D
‑
Leu、D
‑
Ile、D
‑
Met、D
‑
Phe、D
‑
Tyr、D
‑
Trp、D
‑
Ser、D
‑
Thr、D
‑
Cys、D
‑
Asn、D
‑
Gln、D
‑
Asp、D
‑
Glu、D
‑
Lys、D
‑
Arg、D
‑
瓜氨酸或D
‑
His之一或各自的N
‑
烷基氨基酸之一的基团，R2为
‑
H或C1‑
C3‑
烷基，或者如果A2是源自D
‑
Pro的基团，R2为与脯氨酸环的亚甲基的键，D为
‑
D1‑
(L
b
)
o
‑
(LIG)
p
，D1为细胞毒性活性物质，LIG为结合物，其在与肿瘤细胞的靶分子结合后被肿瘤细胞内化并且在细胞内和优选溶酶体加工，L
b
为接头，o和p各自彼此独立地为0或1，R为Z1‑
(C＝O)q
‑
，q为0或1，Z1为C1‑
10
‑
烷基、C5‑
10
‑
芳基或C6‑
10
‑
芳烷基、C5‑
10
‑
杂烷基、C1‑
10
‑
烷基
‑
O
‑
C6‑
10
‑
芳基、C5‑
10
‑
杂环烷基、杂芳基、杂芳基烷基、C5‑
10
‑
杂芳基烷氧基、C1‑
10
‑
烷氧基、C6‑
10
‑
芳基
‑
C1‑
10
‑
烷基氧基、C6‑
10
‑
芳基氧基或C6‑
10
‑
芳烷氧基
‑
、C5‑
10
‑
杂烷氧基、C1‑
10
‑
烷基
‑
O
‑
C6‑
10
‑
芳基氧基
‑
或C5‑
10
‑
杂环烷氧基，其可被
‑
NH2、
‑
C(＝O)
‑
、
‑
NH
‑
烷基、
‑
N(烷基)2、
‑
NH
‑
C(＝O)
‑
烷基、
‑
N(烷基)
‑
C(＝O)
‑
烷基、
‑
S(＝O)3‑
H、
‑
S(＝O)2‑
NH2、
‑
S(＝O)2‑
N(烷基)2、
‑
COOH、
‑
C(＝O)NH2、
‑
C(＝O)
‑
N(烷基)2或
‑
OH单取代或多取代，或者为
‑
H或
‑
(CH2)0‑1‑
O
x
‑
(CH2CH2O)
v
‑
R1基团，x为0或1，v为1
‑
20的数字，R1为
‑
H、
‑
烷基、
‑
CH2‑
COOH、
‑
CH2‑
CH2‑
COOH或
‑
CH2‑
CH2‑
NH2，
或者R为LIG
‑
(L
c
)
r
‑
,LIG为结合物，其在与肿瘤细胞上的靶分子结合后被肿瘤细胞内化并且在细胞内和优选溶酶体加工，L
c
为接头，和r为0或1。2.根据权利要求1的化合物，其中A2为源自氨基酸D
‑
Ala、D
‑
Pro、D
‑
Asp、D
‑
Asn、D
‑
His或D
‑
Ser之一的基团。3.根据前述权利要求中任一项或多项的化合物，其中R2为
‑
H或甲基，优选
‑
H。4.根据前述权利要求中任一项或多项的化合物，其中m为1。5.根据前述权利要求中任一项或多项的化合物，其中A1为L构型或D构型。6.式IIIa'的化合物其中m、n、r、L
a
、L
c
、D1、X、R2、A2和A1具有与权利要求1相同的定义，AB为抗体或抗原结合抗体片段，和s为1至20，优选2
‑
8，特别优选2
‑
6。7.式IVa'的化合物其中m、n、o、R、L
a
、L
b
、D1、X和A1具有与权利要求1相同的定义，AB为抗体或抗原结合抗体片段，和
s为1至20，优选2
‑
8，特别优选2
‑
6。8.式(X)的缀合物，其由结合物或其衍生物(优选抗体或抗原结合抗体片段)与根据前述权利要求中任一项或多项的化合物构成其中AK为结合物，优选抗体或抗原结合抗体片段，n为数字1
‑
50，优选1
‑
20，特别优选2
‑
8和尤其是2
‑
6，X1为N，X2为N，和X3为C；或者X1为N，X2为C，和X3为N；或者X1为CH或CF，X2为C，和X3为N；或者X1为NH，X2为C，和X3为C；或者X1为CH，X2为N，和X3为C，A为
‑
C(＝O)
‑
、
‑
S(＝O)
‑
、
‑
S(＝O)2‑
或
‑
S(＝O)2‑
NH
‑
，
M为基团(*)
‑
C(＝O)
‑
NH
‑
(CH2)3‑
C(＝O)
‑
(**)、(*)
‑
C(＝O)
‑
NH
‑
(CH2)2‑
NH
‑
C(＝O)
‑
(CH2)3‑
C(＝O)
‑
(**)、(*)
‑
C(＝O)
‑
NH
‑
(CH2)2‑
NH
‑
C(＝O)
‑
CH2‑
NH
‑
C(＝O)
‑
(CH2)3‑
C(＝O)
‑
(**)、(*)
‑
NH
‑
C(＝O)
‑
CH(CH2‑
CH2‑
COOH)
‑
NH
‑
C(＝O)
‑
CH(CH3)
‑
NH
‑
C(＝O)
‑
CH(CH3)
‑
NH
‑
C(＝O)
‑
(CH2)3‑
C(＝O)
‑
(**)、(*)
‑
NH
‑
C(＝O)
‑
CH(CH2‑
C(＝O)
‑
NH2)
‑
NH
‑
C(＝O)
‑
CH(CH3)
‑
NH
‑
C(＝O)
‑
CH(CH3)
‑
NH
‑
C(＝O)
‑
(**)、
(*)
‑
C(＝O)
‑
NH
‑
(CH2)2‑
NH
‑
C(＝O)
‑
CH2‑
NH
‑
R
12
，(*)
‑
NH
‑
C(＝O)
‑
CH(CH3)
‑
NH
‑
C(＝O)
‑
CH(CH3)
‑
NH
‑
C(＝O)
‑
CH2‑
NH
‑
R
12
，(*)
‑
NH
‑
C(＝O)
‑
CH(CH2‑
C(＝O)
‑
NH2)
‑
NH
‑
C(＝O)
‑
CH(CH3)
‑...

【专利技术属性】
技术研发人员：HG莱兴，AS雷布施托克，L马克斯，SAL约翰内斯，B施特尔特路德维希，L迪茨，C特容，C马莱特，S格雷文，A佐默，S伯恩特，
申请(专利权)人：拜耳制药股份公司，
类型：发明
国别省市：