包含多核苷酸-肽缀合物的免疫诱导剂及包含其的药物组合物制造技术

本发明专利技术提供一种免疫诱导剂，其包含多核苷酸

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】Effects.M.Krieg,Annu.Rev.Immunol.,20,709
‑
760(2002).
[0014]非专利文献3：The discovery of immunostimulatory DNA sequence.S.Yamamoto,T.Yamamoto,and T.Tokunaga,Springer Seminars in Immunopathology,22,11
‑
19(2000).
[0015]非专利文献4：Distinct Uptake Mechanisms but Similar Intracellular Processing of Two Different Toll
‑
like Receptor Ligand
‑
Peptide Conjugates in Dendritic Cells.Khan S.et al.,J.Biol.Chem.282,21145
‑
21159(2007).
[0016]非专利文献5：Intracellular Cleavable CpG Oligodeoxynucleotide
‑
Antigen Conjugate Enhances Anti
‑
tumor Immunity.Kramer K.et al.,Mol.Ther.25,62
‑
70(2017).
[0017]非专利文献6：Comparative Study of 5
’‑
and 3
’‑
Linked CpG
‑
Antigen Conjugates for the Induction of Cellular Immune Responses.Kramer K.et al.,ACS Omega 2(1),227
‑
235(2017)
[0018]非专利文献7：TLR
‑
9agonist immunostimulatory sequence adjuvants linked to cancer antigens,Shirota H.and Klinman D.M.,Methods Mol.Biol.1139,337
‑
344(2014)

技术实现思路

[0019]专利技术要解决的问题
[0020]在专利文献1中，本专利技术人们通过使用OVA来源的具有抗原性的肽的研究示出了CpG DNA
‑
肽缀合物具有高的细胞杀伤性T细胞(CTL)诱导能力。另一方面，获知在对其它抗原肽制备同样的CpG DNA
‑
肽缀合物时有时得不到充分的CTL诱导能力。本专利技术的目的在于，关于更广泛的抗原肽，提供能够诱导CTL活性的免疫诱导剂等。
[0021]用于解决问题的方案
[0022]本专利技术人们对制成CpG DNA
‑
肽缀合物时未得到充分的CTL诱导能力的肽进行了研究，结果发现，若为了缀合物化而在肽的N末端添加半胱氨酸等氨基酸，则本来与MHC分子有结合性的肽(MHC结合肽)会变得无法与MHC分子结合。还发现，通过使用将不包括锚残基(anchor residues)在内的N末端的1个或多个连续氨基酸置换为半胱氨酸等氨基酸而成的肽、而不是使用在MHC结合肽的N末端直接添加了半胱氨酸等氨基酸的肽，能够制备具有高的CTL诱导能力的CpG DNA
‑
肽缀合物。本专利技术人们进一步进行了深入研究，从而完成了本专利技术。
[0023]即，本专利技术包括以下专利技术。
[0024][1]一种免疫诱导剂，其包含多核苷酸
‑
肽缀合物或其药学上可接受的盐作为有效成分，
[0025]上述多核苷酸
‑
肽缀合物由包含CpG基序的单链多核苷酸或多核苷酸衍生物、肽和间隔基构成，所述间隔基以一端侧与上述多核苷酸或多核苷酸衍生物共价键合且以另一端侧与上述肽共价键合，
[0026]上述肽是MHC结合肽的N末端的1个或多个连续氨基酸被置换成具有用于与上述间隔基形成共价键的反应性官能团的氨基酸的肽，这里，上述1个或多个连续氨基酸不包括用
于结合MHC的锚残基。
[0027][2]根据[1]所述的免疫诱导剂，其中，上述间隔基与上述多核苷酸或多核苷酸衍生物之间的共价键以及上述间隔基与上述肽之间的共价键中的一者或两者为可在生物体环境中断裂的共价键。
[0028][3]根据[1]或[2]所述的免疫诱导剂，其中，具有用于与上述间隔基形成共价键的反应性官能团的氨基酸为半胱氨酸或具有硫醇基的半胱氨酸类似物。
[0029][4]根据[1]至[3]中任一项所述的免疫诱导剂，其中，上述间隔基与上述肽之间的共价键为二硫键。
[0030][5]根据[1]至[4]中任一项所述的免疫诱导剂，其中，上述MHC结合肽为MHC
‑
1结合肽。
[0031][6]根据[5]所述的免疫诱导剂，其中，上述MHC
‑
1结合肽为HLA
‑
A结合肽或HLA
‑
B结合肽。
[0032][7]根据[5]或[6]所述的免疫诱导剂，其中，上述MHC
‑
1结合肽的氨基酸长度为8以上且11以下。
[0033][8]根据[1]至[4]中任一项所述的免疫诱导剂，其中，上述MHC结合肽为MHC
‑
2结合肽。
[0034][9]根据[1]至[8]中任一项所述的免疫诱导剂，其中，上述多核苷酸或多核苷酸衍生物为包含2个以上CpG基序的多脱氧核糖核苷酸(DNA)或DNA衍生物。
[0035][10]根据[1]至[9]中任一项所述的免疫诱导剂，其中，上述多核苷酸或多核苷酸衍生物的碱基长度为15以上且40以下。
[0036][11]根据[10]所述的免疫诱导剂，其中，上述多核苷酸或多核苷酸衍生物的碱基长度为20以上且30以下。
[0037][12]根据[1]至[11]中任一项所述的免疫诱导剂，其中，上述多核苷酸或多核苷酸衍生物是磷酸二酯键的至少一部分被置换成硫代磷酸酯键的多核苷酸衍生物。
[0038][13]根据[12]所述的免疫诱导剂，其中，在上述磷酸二酯键的至少一部分被置换成硫代磷酸酯键的多核苷酸衍生物中，磷酸二酯键的50％以上被硫代磷酸酯键置换。
[0039][14]根据[13]所述的免疫诱导剂，其中，在上述磷酸二酯键的至少一部分被置换成硫代磷酸酯键的多核苷酸衍生物中，磷酸二酯键的90％以上被硫代磷酸酯键置换。
[0040][15]根据[1]至[14]中任一项所述的免疫诱导剂，其中，上述间隔基包含下式所示的重复单元。
[0041][0042]上述式中，
[0043]X表示氧原子或硫原子(这里，各X任选相同或不同)，
[0044]本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种免疫诱导剂，其包含多核苷酸
‑
肽缀合物或其药学上可接受的盐作为有效成分，所述多核苷酸
‑
肽缀合物由包含CpG基序的单链多核苷酸或多核苷酸衍生物、肽和间隔基构成，所述间隔基以一端侧与所述多核苷酸或多核苷酸衍生物共价键合且以另一端侧与所述肽共价键合，所述肽是MHC结合肽的N末端的1个或多个连续氨基酸被置换成具有用于与所述间隔基形成共价键的反应性官能团的氨基酸的肽，这里，所述1个或多个连续氨基酸不包括用于结合MHC的锚残基。2.根据权利要求1所述的免疫诱导剂，其中，所述间隔基与所述多核苷酸或多核苷酸衍生物之间的共价键以及所述间隔基与所述肽之间的共价键中的一者或两者为可在生物体环境中断裂的共价键。3.根据权利要求1或2所述的免疫诱导剂，其中，具有用于与所述间隔基形成共价键的反应性官能团的氨基酸为半胱氨酸或具有硫醇基的半胱氨酸类似物。4.根据权利要求1至3中任一项所述的免疫诱导剂，其中，所述间隔基与所述肽之间的共价键为二硫键。5.根据权利要求1至4中任一项所述的免疫诱导剂，其中，所述MHC结合肽为MHC
‑
1结合肽。6.根据权利要求5所述的免疫诱导剂，其中，所述MHC
‑
1结合肽为HLA
‑
A结合肽或HLA
‑
B结合肽。7.根据权利要求5或6所述的免疫诱导剂，其中，所述MHC
‑
1结合肽的氨基酸长度为8以上且11以下。8.根据权利要求1至4中任一项所述的免疫诱导剂，其中，所述MHC结合肽为MHC
‑
2结合肽。9.根据权利要求1至8中任一项所述的免疫诱导剂，其中，所述多核苷酸或多核苷酸衍生物为包含2个以上CpG基序的多脱氧核糖核苷酸(DNA)或DNA衍生物。10.根据权利要求1至9中任一项所述的免疫诱导剂，其中，所述多核苷酸或多核苷酸衍生物的碱基长度为15以上且40以下。11.根据权利要求10所述的免疫诱导剂，其中，所述多核苷酸或多核苷酸衍生物的碱基长度为20以上且30以下。12.根据权利要求1至11中任一项所述的免疫诱导剂，其中，所述多核苷酸或多核苷酸衍生物是磷酸二酯键的至少一部分被置换成硫代磷酸酯键的多核苷酸衍生物。13.根据权利要求12所述的免疫诱导剂，其中，在所述磷酸二酯键的至少一部分被置换成硫代磷酸酯键的多核苷酸衍生物中，磷酸二酯键的50％以上被硫代磷酸酯键置换。14.根据权利要求13所述的免疫诱导剂，其中，在所述磷酸二酯键的至少一部分被置换成硫代磷酸酯键的多核苷酸衍生物中，磷酸二酯键的90％以上被硫代磷酸酯键置换。15.根据权利要求1至14中任一项所述的免疫诱导剂，其中，所述间隔基包含下式所示的重复单元，
所述式中，X表示氧原子或硫原子，这里，各X任选相同或不同，R表示(CH2)
p
O、(CH2)
q
NH和(CH2CH2O)
m
中的任意者，m、p和q分别独立地表示10以下的自然数，n表示10以下的自然数。16.根据权利要求1至15中任一项所述的免疫诱导剂，其中，所述间隔基具有下述任意式所示的结构，17.根据权利要求1至14中任一项所述的免疫诱导剂，其中，所述间隔基具有下述任意式所示的结构，
18.一种免疫诱导剂，其包含权利要求1所述的多核苷酸
‑
肽缀合物或其药学上可接受的盐作为有效成分，所述间隔基与所述多核苷酸或多核苷酸衍生物之间的共价键以及所述间隔基与所述肽之间的共价键中的一者或两者为可在生物体环境中断裂的共价键，所述多核苷酸或多核苷酸衍生物为包含2个以上CpG基序的多脱氧核糖核苷酸(DNA)或DNA衍生物，所述多核苷酸或多核苷酸衍生物为磷酸二酯键的至少一部分被置换成硫代磷酸酯键的多核苷酸衍生物。19.一种免疫诱导剂，其包含权利要求1所述的多核苷酸
‑
肽缀合物或...

【专利技术属性】
技术研发人员：望月慎一，小泉诚，森田浩司，
申请(专利权)人：第一三共株式会社，
类型：发明
国别省市：