药物从生物活性化合物的内化缀合物的选择性释放制造技术

本发明专利技术涉及生物活性化合物的缀合物，其中这样的缀合物包含含有三肽的氨基酸序列，所述三肽赋予肿瘤组织匀浆进行的选择性切割以释放游离药物和/或与来自相同物种的正常组织匀浆相比提高到肿瘤组织的生物分布，其中所述正常组织是与向有需要的人类受试者施用治疗有效量的比较缀合物相关的不良事件的位点，所述比较缀合物的氨基酸序列是已知可被组织蛋白酶B选择性切割的二肽。酶B选择性切割的二肽。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】药物从生物活性化合物的内化缀合物的选择性释放
相关申请的交叉引用
[0001]本申请要求2019年9月19日提交的美国临时申请号62/902,888的优先权，将其公开内容通过引用以其整体并入本文。

技术介绍

[0002]本专利技术涉及配体药物缀合物(LDC)化合物及其组合物，所述配体药物缀合物包括抗体药物缀合物(ADC)并且对靶向细胞与非靶向细胞相比具有提高的选择性。
[0003]传统的配体药物缀合物对靶向细胞展现生物活性，所述靶向细胞展示被缀合物的配体单元识别的靶向部分，所述配体药物缀合物对靶向细胞展现生物活性通过与靶向部分结合然后通过结合的缀合物的内化而进入细胞来实现。对靶细胞的选择性优于非靶细胞主要是通过传统的配体药物缀合物实现的，因为与非靶正常细胞(其是不意图被缀合物作用的细胞)相比，靶向部分在靶细胞上以更大的丰度存在。当游离形式下具有细胞毒性的缀合化合物的有条件释放受到细胞内蛋白酶的影响时，结合的缀合物的内化之后是缀合物的基于肽的接头单元的酶促加工。
[0004]通过优化对特异性溶酶体蛋白酶(被认为在癌细胞中上调)的选择性来减少细胞毒性化合物从传统的基于二肽的配体药物缀合物过早释放，否则会导致不希望的副作用。由于负责传统配体药物缀合物的细胞内加工的蛋白酶对于所有细胞都是通用的，因此对靶细胞的选择性主要是由于靶向部分在意图被缀合物作用的细胞上的丰度更大，尽管靶向癌细胞和非靶向正常细胞内所述加工蛋白酶的细胞内活性水平不同。然而，该方法没有考虑释放的细胞毒性化合物在肿瘤和正常组织之间可能的暴露差异，现在本专利技术的配体药物缀合物利用了这些差异。
[0005]因此，传统的配体药物缀合物的二肽序列被设计为被细胞内蛋白酶(其在肿瘤组织的癌细胞中上调)选择性地作用，但仍然能够被限制在正常组织内的蛋白酶作用。这种作用可以在正常组织的微环境中发生，也可以在正常组织的细胞内在免疫特异性或非特异性摄取到这些细胞(分别导致中靶或脱靶毒性)中后发生。那些毒性是对于高细胞毒性化合物的靶向递送而要解决的更紧迫的问题。因此，认为与传统的基于二肽的配体药物缀合物相比，具有改进的肽序列的配体药物缀合物提供对正常组织的较低暴露，并因此减少对从配体药物缀合物释放的细胞毒性化合物的暴露，同时保持由这些传统的缀合物提供的功效，并且将提高对治疗的耐受性。
[0006]进一步认为，与由肿瘤组织和正常组织对传统的基于二肽的配体药物缀合物进行的蛋白水解相比，具有改进的肽序列的配体药物缀合物与被正常组织蛋白水解相比更容易被肿瘤组织蛋白水解，并且也将降低对释放的细胞毒性化合物的暴露，这将有助于提高对治疗的耐受性。使用组织匀浆确定那些蛋白水解差异应捕获由这些组织的微环境驱动的和/或细胞内化后的那些差异。
[0007]为了提供本领域中该问题的解决方案，本文公开了具有基于肽的接头单元的配体药物缀合物，所述基于肽的接头单元的序列导致与正常组织的细胞对游离细胞毒素的暴露
相比，肿瘤组织的靶向细胞更选择性地暴露于从缀合物释放的细胞毒性化合物，从而提高了对缀合物的耐受性，同时保留了传统的基于二肽的缀合物在治疗哺乳动物受试者的癌症中的功效。这种暴露差异可能是由于与正常组织内的蛋白水解相比，与传统的基于二肽的缀合物的蛋白水解相比，对配体药物缀合物的蛋白水解的选择性更大，所述配体药物缀合物具有赋予肿瘤组织内的肽序列的选择性。因为改变肽序列也可能影响缀合物化合物的生化特性，所以可以分别发生来自于增加的生物分布到肿瘤组织而不是正常组织中的和/或一旦分布到正常组织中就增加的布置的更大的暴露，这优先将缀合物化合物保留在肿瘤组织中和/或优先从正常组织中消除缀合物化合物。那些生物分布效应甚至可能变成优先蛋白水解的决定因素，这在体内可能难以观察到。
[0008]因此，具有提供释放的游离细胞毒性化合物对肿瘤组织与正常组织相比增强的暴露的肽序列的缀合物化合物应展现降低的不希望的毒性，因为所述肽序列总体上对正常组织或其细胞内的蛋白水解与肿瘤内的蛋白水解相比更不敏感，和/或由于掺有那些更喜欢肿瘤组织超过正常组织的肽序列的缀合物化合物的药代动力学特性得到改进。
[0009]因此，本专利技术的配体药物缀合物对靶向细胞相对于非靶向正常细胞具有两个选择性水平：(1)选择性进入靶向细胞，和(2)与肿瘤组织相比，正常组织对缀合物化合物的暴露降低。从第二个选择性水平来看，正常组织毒性的降低有望减少与常规靶向治疗相关的不良事件。

技术实现思路

[0010]本专利技术的一个主要实施方案提供了由式1表示的配体药物缀合物组合物：L
‑
[LU
‑
D
’
]p
ꢀꢀꢀ
(1)或其盐，特别是药学上可接受的盐，其中L是配体单元；LU是接头单元；并且D
’
代表式
‑
LU
‑
D
’
的每个药物接头部分中的1至个药物单元(D)；并且下标p是从1至12、从1至10或从1至8的数字，或者是约4或约8，其中所述配体单元是抗体或抗体的抗原结合片段，所述抗体或抗体的抗原结合片段能够选择性地结合肿瘤组织的抗原以随后释放所述药物单元作为游离的细胞毒性化合物，其中所述组合物的每种配体药物缀合物化合物中的式
‑
LU
‑
D
’
的药物接头部分具有式1A的结构：或其盐，特别是药学上可接受的盐，其中波浪线表示与L共价附接；D是所述细胞毒性化合物的药物单元；L
B
是配体共价结合部分；A是第一任选的延伸子单元；
下标a是0或1，分别表示A不存在或存在；B是任选的分支单元；下标b是0或1，分别表示B不存在或存在；L
O
是二级接头部分，其中所述二级接头具有下式：其中与Y相邻的波浪线表示L
O
与所述药物单元共价附接的位点，并且与A
’
相邻的波浪线表示与所述药物接头部分的剩余部分共价附接的位点；A
’
是第二任选的延伸子单元，其在B不存在的情况下变成A的亚基，下标a
’
是0或1，分别表示A
’
不存在或存在，W是肽可切割单元，其中所述肽可切割单元是多达12个(例如，3
‑
12或3
‑
10个)氨基酸的连续序列，其中所述序列包含赋予选择性的三肽，与从比较配体
‑
药物缀合物组合物的配体药物缀合物化合物释放的细胞毒性化合物相比，所述三肽提供对肿瘤组织相对于正常组织暴露于从所述组合物的配体药物缀合物化合物释放的游离细胞毒性化合物的改进的选择性，所述比较配体
‑
药物缀合物组合物的肽可切割单元的肽序列是二肽
‑
缬氨酸
‑
瓜氨酸
‑
或
‑
缬氨酸
‑
丙氨酸
‑
；其中所述肿瘤组织和正常组织属于啮齿动物物种，并且其中所述式1组合物提供所述提高的暴露选择性，其通过以下方式证明：当以先前本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种由式1表示的配体药物缀合物组合物：L
‑
[LU
‑
D
’
]
p
ꢀꢀꢀ
(1)或其药学上可接受的盐，其中L是配体单元；LU是接头单元；D
’
代表式
‑
LU
‑
D'的每个药物接头部分中的1至4个药物单元(D)；并且下标p是从1至12、从1至10或从1至8的数字，或者是约4或约8，其中所述配体单元来自抗体或抗体的抗原结合片段，所述抗体或抗体的抗原结合片段能够选择性地结合肿瘤组织的抗原以随后释放所述一个或多个药物单元作为游离药物，其中所述组合物的每种配体药物缀合物化合物中的式
‑
LU
‑
D
’
的药物接头部分具有式1A的结构：或其盐，其中波浪线表示与L共价附接；D是所述药物单元；L
B
是配体共价结合部分；A是第一任选的延伸子单元；下标a是0或1，分别表示A不存在或存在；B是任选的分支单元；下标b是0或1，分别表示B不存在或存在；L
O
是二级接头部分，其中所述二级接头具有下式：其中与Y相邻的波浪线表示L
O
与所述药物单元共价附接的位点，并且与A
’
相邻的波浪线表示与所述药物接头部分的剩余部分共价附接的位点；A
’
是第二任选的延伸子单元，其在B不存在的情况下变成A的亚基，下标a
’
是0或1，分别表示A
’
不存在或存在，W是肽可切割单元，其中所述肽可切割单元包含具有序列
‑
P3
‑
P2
‑
P1
‑
的三肽，其中P1、P2和P3各自是氨基酸，其中：所述氨基酸P1、P2或P3中的第一个是带负电的；所述氨基酸P1、P2或P3中的第二个具有疏水性不大于亮氨酸的疏水性的脂肪族侧链；并且所述氨基酸P1、P2或P3中的第三个的疏水性低于亮氨酸的疏水性，其中所述氨基酸P1、P2或P3中的第一个对应于P1、P2或P3中的任一个，所述氨基酸P1、P2或P3中的第二个对应于两个剩余的氨基酸P1、P2或P3中的一个，并且所述氨基酸P1、P2或P3中的第三个对应于最后剩余的氨基酸P1、P2或P3，条件是
‑
P3
‑
P2
‑
P1
‑
不是
‑
Glu
‑
Val
‑
Cit
‑
或
‑
Asp
‑
Val
‑
Cit
‑
；
Y是自杀式间隔子单元；下标y是0、1或2，分别表示Y不存在或存在1个或2个Y；并且下标q是范围从1至4的整数，条件是当下标b是0时，下标q是1，并且当下标b是1时，下标q是2、3或4；并且其中所述组合物的配体药物缀合物化合物具有式1的结构，其中下标p被下标p
’
替换，其中下标p'是从1至12、1至10或1至8的整数，或者是4或8。2.根据权利要求1所述的配体药物缀合物组合物，其中所述配体药物缀合物组合物中的配体药物缀合物化合物主要具有式1H的药物接头部分：或其药学上可接受的盐，并且所述配体药物缀合物组合物任选地具有少数如下配体药物缀合物化合物，其中每种此类化合物中的一个或多个药物接头部分具有呈已水解形式的琥珀酰亚胺环，并且其中HE是水解增强单元；A
’
当存在时是所示的第一延伸子单元(A)的亚基；下标a
’
是0或1，表示A
’
不存在或存在；并且波浪线表示与所述配体单元的硫原子共价结合的位点。3.根据权利要求2所述的配体药物缀合物组合物，其中HE是
‑
C(＝O)。4.根据权利要求1
‑
3中任一项所述的配体药物缀合物组合物，其中
‑
Y
y
‑
D具有以下结构：其中
‑
N(R
y
)D
’
代表D，其中D
’
是D的剩余部分；波浪线表示与P1共价附接的位点；虚线表示R
y
到D
’
的任选环化；R
y
在没有环化到D
’
的情况下是任选取代的C1‑
C6烷基，或者当环化到D
’
时是任选取代的C1‑
C6亚烷基；每个Q独立地选自
‑
C1‑
C8烷基、
‑
O
‑
(C1‑
C8烷基)、卤素、硝基和氰基；并且下标m是0、1或2。5.根据权利要求1
‑
4中任一项所述的配体药物缀合物组合物，其中D是细胞毒性药物，其中所述细胞毒性药物是含仲胺的澳瑞他汀化合物，其中所述仲胺的氮原子是与所述药物
接头部分共价附接的位点，并且所述含仲胺的澳瑞他汀化合物具有式D
F/E
‑3的结构：其中剑号表示提供氨基甲酸酯官能团的氮原子的共价附接位点；R
10
和R
11
中的一个是氢并且另一个是甲基；R
13
是异丙基或
‑
CH2‑
CH(CH3)2；并且R
19B
是
‑
CH(CH3)
‑
CH(OH)
‑
Ph、
‑
CH(CO2H)
‑
CH(OH)
‑
CH3、
‑
CH(CO2H)
‑
CH2Ph、
‑
CH(CH2Ph)
‑2‑
噻唑基、
‑
CH(CH2Ph)
‑2‑
吡啶基、
‑
CH(CH2‑
p
‑
Cl
‑
Ph)、
‑
CH(CO2Me)
‑
CH2Ph、
‑
CH(CO2Me)
‑
CH2CH2SCH3、
‑
CH(CH2CH2SCH3)C(＝O)NH
‑
醌醇
‑3‑
基、
‑
CH(CH2Ph)C(＝O)NH
‑
p
‑
Cl
‑
Ph，或者R
19B
具有结构其中波浪线表示与所述澳瑞他汀化合物的剩余部分共价附接。6.根据权利要求5所述的配体药物缀合物组合物，其中所述含仲胺的澳瑞他汀化合物是一甲基澳瑞他汀E(MMAE)或一甲基澳瑞他汀F(MMAF)。7.根据权利要求1所述的配体药物缀合物组合物，其中下标q是1，并且所述配体药物缀合物组合物中的配体药物缀合物化合物主要具有式1H
‑
MMAE的药物接头部分：或其药学上可接受的盐，并且所述配体药物缀合物组合物任选地具有少数如下配体药物缀合物化合物，其中每种此类化合物中的一个或多个药物接头部分具有呈已水解形式的琥珀酰亚胺环，并且其中：下标a
’
是0，并且A
’
不存在；并且波浪线表示与所述配体单元的硫原子共价结合的位点。8.根据权利要求1
‑
7中任一项所述的配体药物缀合物组合物或其药学上可接受的盐，其中所述肽可切割单元是具有序列
‑
P3
‑
P2
‑
P1
‑
的三肽，其中P1、P2和P3各自是氨基酸，其中：所述三肽的P3氨基酸呈D
‑
氨基酸构型；所述P2和P1氨基酸中的一个具有疏水性低于亮氨酸的疏水性的脂肪族侧链；并且所述P2和P1氨基酸中的另一个是带负电的。9.根据权利要求1
‑
8中任一项所述的配体药物缀合物组合物或其药学上可接受的盐，
其中所述P3氨基酸是D
‑
Leu或D
‑
Ala。10.根据权利要求1
‑
9中任一项所述的配体药物缀合物组合物或其药学上可接受的盐，其中所述P2或P1氨基酸中的一个具有疏水性不大于缬氨酸的脂肪族侧链，并且所述P2或P1氨基酸中的另一个在血浆生理pH下带负电荷。11.根据权利要求1
‑
10中任一项所述的配体药物缀合物组合物或其药学上可接受的盐，其中所述P2氨基酸具有疏水性不大于缬氨酸的脂肪族侧链，并且所述P1氨基酸在血浆生理pH下带负电荷。12.根据权利要求1
‑
11中任一项所述的配体药物缀合物组合物或其药学上可接受的盐，其中
‑
P2
‑
P1
‑
是
‑
Ala
‑
Glu
‑
或
‑
Ala
‑
Asp
‑
。13.根据权利要求1
‑
12中任一项所述的配体药物缀合物组合物或其药学上可接受的盐，其中
‑
P3
‑
P2
‑
P1
‑
是
‑
D
‑
Leu
‑
Ala
‑
Asp
‑
、
‑
D
‑
Leu
‑
Ala
‑
Glu
‑
、
‑
D
‑
Ala
‑
Ala
‑
Asp
‑
、或
‑
D
‑
Ala
‑
Ala
‑
Glu
‑
。14.根据权利要求1
‑
10中任一项所述的配体药物缀合物组合物或其盐，其中所述P3氨基酸是D
‑
Leu或D
‑
Ala，所述P2氨基酸是Ala、Glu或Asp，并且所述P1氨基酸是Ala、Glu或Asp。15.根据权利要求1所述的配体药物缀合物化合物，其中所述化合物具有以下结构：或其药学上可接受的盐，其中L是配体单元，并且下标p
’
是从1至12的整数。16.根据权利要求1
‑
15中任一项所述的配体药物缀合物组合物，其中L是完整抗体或其抗原结合片段的抗体配体单元。17.根据权利要求16所述的配体药物缀合物组合物，其中所述完整抗体或其片段能够选择性地结合癌细胞抗原。
18.根据权利要求16所述的配体药物缀合物组合物，其中所述完整抗体是嵌合抗体、人源化抗体或人抗体，其中所述抗体能够选择性地结合癌细胞抗原，或者所述抗体是非结合对照抗体从而限定非结合对照缀合物组合物。19.根据权利要求1
‑
18中任一项所述的配体药物缀合物组合物，其中下标p范围从约2至约12、或从约2至约10、或从约2至约8，或者下标p是约2、约4或约8。20.一种药学上可接受的配制品，其中所述配制品包含有效量的根据权利要求1
‑
15中任一项所述的配体药物缀合物组合物或等量的非结合对照缀合物以及至少一种药学上可接受的赋形剂。21.根据权利要求20所述的药学上可接受的配制品，其中所述至少一种药学上可接受的赋形剂是提供液体配制品的液体载体，其中所述液体配制品适合于冻干或施用于有需要的受试者。22.根据权利要求20所述的药学上可接受的配制品，其中所述配制品是来自冻干法的固体或根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：N，
申请(专利权)人：思进股份有限公司，
类型：发明
国别省市：