γ-分泌酶抑制剂制造技术

本发明专利技术公开了一种作为γ－分泌酶抑制剂的化合物或其药物上可接受的盐，其由氨基酸序列组成，所述序列由氨基酸序列Ｖａｌ－Ｖａｌ－Ｉｌｅ－Ａｌａ－Ｔｈｅ－Ｖａｌ－Ｉｌｅ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｖａｌ－Ｍｅｔ－Ｌｅｕ－Ｌｙｓ－ｌｙｓ－ｌｙｓ（ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：１）的包括１１位Ｌｅｕ的至少３个连续的氨基酸所组成，其中在Ｌｅｕ与紧接其前或后的一个或前后两个氨基酸之间的肽键“－ＣＯ－ＮＨ－”被羟亚乙基、－ＣＨＯＨ－ＣＨ↓［２］－所取代，而任何其他的中间氨基酸间的键是肽键，其中Ｎ末端具有基于Ｃ１－１０烷基的烷氧羰基，所述烷基可带有苯基或萘基作为取代基，其中Ｃ末端被转化成基于Ｃ１－１０烷基的烷基酯或烷基酰胺，所述烷基可带有苯基或萘基作为取代基，并且，其中第１０位的Ｔｈｒ的羟基的氢原子可被Ｃ１－４疏水基团或Ｚ基团所取代。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及抑制γ-分泌酶的化合物，所述酶是一种从淀粉样前体蛋白中产生淀粉样蛋白的裂解酶。更具体而言，本专利技术涉及这些化合物或其药物上可接受的盐、含有这些化合物的γ-分泌酶抑制剂、这些化合物在筛选抗衰老药物或抗痴呆药物中的用途、以及针对这些化合物的抗体。
技术介绍
淀粉样蛋白沉积是一种组织病理学改变，其不仅发生在患有阿尔茨海默氏病或唐氏综合症的那些人的脑组织中，也发生在那些经历正常衰老的人的脑组织中。淀粉样蛋白由40-42/43个氨基酸组成，所述氨基酸多数是疏水性氨基酸，这种蛋白由它的前体——淀粉样前体蛋白(下文中称为APP)——通过水解切割所产生。APP由695、751或770个氨基酸组成，是跨越膜1次的1型膜蛋白酶，其氨基末端部分暴露于细胞外面。氨基酸数量上的差别与所称Kunitz型蛋白酶抑制剂活性位点的存在或缺乏相一致，所述位点位于细胞外的区域。在神经细胞中，一种由695个氨基酸所组成的APP(下文中称为“APP695”，其氨基酸序列表示为SEQ ID NO7)占主要地位。APP695由695个氨基酸所组成，起始于1位的蛋氨酸、并一直延伸到695位的天冬酰胺，APP695是一种主要产生于神经细胞中的同工型，并且是具有跨细胞膜1次的跨膜结构域(由从625位甘氨酸延伸到648位亮氨酸的24个氨基酸所组成)1型膜蛋白。淀粉样蛋白含有由40个氨基酸组成的较短形式的蛋白质分子，所述氨基酸从暴露于细胞外的APP695部分的597位天冬氨酸延伸到位于细胞膜内的636位缬氨酸；和由42或43个氨基酸组成的较长蛋白质分子，所述氨基酸一直延伸到638位丙氨酸或639位苏氨酸。另一方面，一种由770个氨基酸组成的APP(下文中称为“APP770”，其编码区的核苷酸序列表示为SEQ ID NO8且氨基酸序列表示为SEQ IDNO9)是一种由770个氨基酸组成APP基因产物，从1位蛋氨酸延伸到770位天冬酰胺，并且该产物包括一个APP695所不具有的氨基酸序列部分(从289位谷氨酸延伸到363位赖氨酸的75个氨基酸)。除该内嵌的氨基酸序列外，该分子具有与APP695完全一样的氨基酸序列。除APP695和APP770之外，还有一种称为APP751的同工型，总共由751个氨基酸组成，其中缺失了APP770中从345位蛋氨酸延伸到363位赖氨酸的19个氨基酸。通常嵌入APP751和APP770的一个氨基酸序列(在APP770氨基酸序列中从289位谷氨酸到334位丙氨酸的56个氨基酸)具有Kunitz型蛋白酶抑制剂的活性，并被认为在除神经细胞之外的细胞中表达。由于在实验上证实下述假说，即对神经细胞的毒性是淀粉样蛋白的一个生理活性，因而淀粉样蛋白被认为是阿尔茨海默氏病发作的一个关键分子。对于由淀粉样前体蛋白产生淀粉样蛋白而言，必须发生两个重要的反应步骤。第一个步骤是通过β-分泌酶来切掉从淀粉样蛋白部分的N-末端延伸出的部分。在第二个步骤，通过γ-分泌酶的作用，在淀粉样蛋白的羧基末端发生裂解，从而导致淀粉样蛋白的释放，而分离开的APP细胞内片断则留下。根据常规发现，第二步骤中的裂解被认为发生在γ位，这是在淀粉样蛋白的羧基末端(根据APP770氨基酸残基的编号方式，在711位缬氨酸和712位异亮氨酸之间，在713位丙氨酸和714位苏氨酸之间，或者在714位苏氨酸和715位缬氨酸之间)。然而，在近来的发现中，据报道裂解发生在ε位，下游再5-10个氨基酸残基处(以羧基末端的方向)，因而更接近于细胞质(根据APP770氨基酸残基的编号方式，在719苏氨酸和720位亮氨酸之间，或者在720位亮氨酸和721缬氨酸之间)。在阿尔茨海默氏病中，异常临床症状比如定向障碍、衰弱性记忆损失、健忘症、判断恶化、和行为失常等出现之前，大脑中的神经元损伤发生了。神经元损伤包括淀粉样蛋白的沉积、神经纤维缠结、和退化型细胞损失，其中淀粉样蛋白沉积是最早的病变。对于阿尔茨海默氏病的进展而言，淀粉样蛋白假说被认为是重要的，根据此假说，淀粉样蛋白的产生和沉积确实引起该疾病。家族性阿尔茨海默氏病的研究已经为该假说提供了基础。还有一个推测有待证实，即γ-分泌酶是早老素1的基因产物和早老素2，其在染色体14上被发现为早发家族性阿尔茨海默氏病的引发基因。APP也是早发家族性阿尔茨海默氏病的引发基因(Coate，A.等人，Nature 1991)，这意味着在称为阿尔茨海默氏病的这一类痴呆中，有众多的基因作为引发因子。如上文中所指出的，淀粉样蛋白包含两个成分。其一是较短的淀粉样蛋白成分，此成分开始于天冬氨酸并终止于40位的缬氨酸，而另一种则是较长的淀粉样蛋白，该成分由42或43个氨基酸构成，起始于与40个氨基酸的成分一样的缬氨酸，但终止于42位的丙氨酸(因而长出2个氨基酸残基)或43位的苏氨酸(因而长出3个氨基酸残基)。后面较长的成分更具疏水性，因而更不易溶解。通过在作为核心的较长成分周围添加较短成分，淀粉样纤维得以形成，这是一种具有大约5-6nm直径的纤维状结构。现已揭示，当在早老素1或早老素2中发生遗传突变时，较长淀粉样蛋白的产生增加了。因此认为，这种突变的效应引起了较长淀粉样蛋白成分的形成增加，这被认为是决定淀粉样蛋白多聚化的阈水平，并从而加速了致病反应。APP中的一些遗传突变已被证实，其中典型的可大致分为瑞典突变(Met670Asn，Lys671Leu，根据AP770中氨基酸残基的编号方式，并同样应用于下面所述的突变)、荷兰(Dutch)型突变(Glu693Gln)、伦敦突变(Va1717Ile)和澳大利亚突变(Leu723Pro)，所述突变正位于淀粉样蛋白氨基酸末端相应的位置之前。虽然在瑞典突变中发现淀粉样蛋白的两种成分的产生都有增加，但是，在伦敦突变和澳大利亚突变中，只有较长淀粉样蛋白成分的产生有增加。荷兰型突变的作用现仍在探讨中，并还没有获得结论。等位基因E4是一种与载脂蛋白E相联系的危险因子。统计分析显示，当一对染色体上只有1个等位基因是E4时，阿尔茨海默氏病的发作要提前8-10年，而染色体上的等位基因是E4/E4时，阿尔茨海默氏病的发作要提前16-20年。据推测，β-分泌酶和γ-分泌酶活性的抑制会抑制淀粉样蛋白的产生，这导致能中断或减缓阿尔茨海默氏病发展的治疗药物。除β-分泌酶外，α-分泌酶也涉及APP水解的第一步骤，第二步骤中γ-分泌酶反应的抑制可望产生更广谱的效果，因为该反应通常跟随任一类型的第一步骤反应。虽然γ-分泌酶的最终识别尚有待获得，但已揭示的是，早老素1起着重要作用。根据动物试验或细胞培养试验，早老素1的功能丧失据称引起脑神经发育或脊柱形成的异常，或者淋巴细胞发育的异常。因此，除与淀粉样蛋白相联系的功能外，早老素1被认为具有众多的功能。必须要考虑的是，γ-分泌酶活性的非特异性抑制能引发一些严重的副作用，比如癌症的诱发。现在公知的γ-分泌酶抑制剂是为多肽模拟物的抑制剂，其基于有关基质APP的位于淀粉样蛋白部分的羧基末端的γ位点的报告，酶在该位置上起作用；和基于指出天冬氨酸活性位点重要性的报告的酶抑制剂。关于多肽模拟物，DFK-167是公知的关于酶抑制剂，从公知的抑制剂中筛选出的化合物已被报道。它们是L-685458，其在AIDS药物开本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种由氨基酸序列组成的化合物或其药物上可接受的盐，所述序列由氨基酸序列Ｖａｌ－Ｖａｌ－Ｉｌｅ－Ａｌａ－Ｔｈｒ－Ｖａｌ－Ｉｌｅ－Ｔｈｒ－Ｌｅｕ－Ｖａｌ－Ｍｅｔ－Ｌｅｕ－Ｌｙｓ－Ｌｙｓ－Ｌｙｓ（ＳＥＱＩＤＮＯ：１）的包括１１位的Ｌｅｕ的 至少３个连续的氨基酸所组成，其中在Ｌｅｕ与紧接其前或后的一个或前后两个氨基酸之间的肽键“－ＣＯ－ＮＨ－”被羟亚乙基、－ＣＨＯＨ－ＣＨ↓［２］－取代，而任何其他的中间氨基酸间的键是肽键，其中Ｎ末端具有基于Ｃ１－１０烷基的烷氧羰基，所述烷基可带有苯基或萘基作为取代基，其中Ｃ末端被转化成基于Ｃ１－１０烷基的烷基酯或烷基酰胺，所述烷基可带有苯基或萘基作为取代基，并且其中第１０位的Ｔｈｒ的羟基的氢原子可被Ｃ１－４疏水基团或Ｚ基团所取代。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：森启，
申请(专利权)人：森启，
类型：发明
国别省市：JP[日本]