一种鸡痘病毒通用转移载体、重组鸡痘病毒及其制备方法技术

本发明专利技术涉及一种鸡痘病毒通用转移载体、重组鸡痘病毒及其制备方法。即以鸡痘病毒作为材料，通过ＰＣＲ方法对其的一个复制非必需区片段进行扩增、克隆得到载体ｐＰＣＩ。利用禽痘病毒早晚期复合启动子构建绿色荧光蛋白（ＧＦＰ）基因表达盒，并在其两侧分别引入ｌｏｘＰ序列，一同插入到ｐＰＣＩ，获得通用转移质粒载体ｐＨＢＰ。将其与鸡痘病毒基因组ＤＮＡ共转染ＣＥＦ，获得重组病毒ｒＦＰＶＧＦＰ。将其基因组ＤＮＡ与表达Ｃｒｅ酶的质粒ＤＮＡ共转染ＣＥＦ筛获重组病毒ｒＦＰＶ。本发明专利技术的ｐＨＢＰ可插入其它目的基因，筛获的重组禽痘病毒不含有ＧＦＰ基因，解决了重组病毒基因组中含有报告基因问题，大大方便了目的基因重组禽痘病毒的构建。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种绿色荧光蛋白（ＧＦＰ）基因表达盒，其特征在于，所述的绿色荧光蛋白基因表达盒的两侧各有一个ｌｏｘＰ序列，即该ＧＦＰ基因表达盒具有ｌｏｘＰ－ＧＦＰ－ｌｏｘＰ序列。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王莉莉，黄兵，宋敏训，于可响，黄宝华，
申请(专利权)人：山东省农业科学院家禽研究所，
类型：发明
国别省市：88[中国|济南]