The invention discloses a blood collection card quick extraction kit, including components: blood digestion, lysate, three (2 carboxyethyl) phosphine, combined with liquid, washing liquid beads, 1, 2, 3 washing liquid washing liquid, eluting liquid. In order to improve the efficiency of nucleic acid extraction kit, the invention adopts three (2 Suo Yiji) phosphine instead of protease K, and add PEG6000 in lysis buffer. And the invention is the use of 96 hole pre split deep plate model, with the Zhongshan University nucleic acid tat gene Limited by Share Ltd smart32 automatic extraction instrument, automatic extraction of nucleic acid, can be large, fast and effective extraction of blood collection card DNA.
【技术实现步骤摘要】
一种采血卡快速提取试剂盒
本专利技术涉及生物
,特别涉及一种采血卡快速提取试剂盒。本专利技术还涉及使用磁珠法提取采血卡的方法。
技术介绍
在现代疾病诊断当中,核酸占据着非常重要的地位,其中DNA的作用更显突出,采血卡是用于保存血液DNA的一种重要手段。采血卡的稳定性高,与直接抽提样品的PCR结果一致。且采血卡可在干燥条件下对血液样本进行保存并阻止细菌和真菌的生长,方便收集,运输和存档。另外在PCR分子诊断过程中,获得的DNA的总拷贝数和质量会直接影响到后续检验实验的结果,所以,便于保存且获得有效、可靠的DNA是PCR分子诊断的关键。虽然普通血液样本提取核酸的方法能够获得质量较好的核酸,但是普通血液样本不容易保存,且传统提取过程中用到的化学物质却有着不可忽视的毒性,而且整个提取过程耗时较长,浪费大量的时间和人力物力。进一步来说,现在普及的柱提法核酸提取试剂也能获得质量很好的核酸,毒性也可以忽略,但是耗费的时间同样不可忽视。而现今的试剂盒中,大部分都采用了蛋白酶K分解蛋白质。蛋白酶K的效率虽然不低,但本身也属于蛋白质,性能容易受外界环境PH值,温度等因素影响,导致提取的效率会不稳定,进而导致同批次之间存在差异性。
技术实现思路
为了解决上述技术中的缺陷,本专利技术所提供的技术是试剂盒中以三(2-羧乙基)膦代替传统使用的蛋白酶K,能够解决传统蛋白酶K的缺陷。为了解决上述问题,本专利技术所采用的技术方案是:一种采血卡快速提取试剂盒,其试剂盒的组成为:血片消化液、裂解液、结合液、磁珠、三(2-羧乙基)膦、洗涤液1、洗涤液2、洗涤液3、洗脱液。进一步的,所述的血片消 ...
【技术保护点】
一种采血卡快速提取试剂盒,其特征在于,试剂盒的组成为:血片消化液、裂解液、结合液、磁珠、三(2‑羧乙基)膦、洗涤液1、洗涤液2、洗涤液3、洗脱液。
【技术特征摘要】
1.一种采血卡快速提取试剂盒,其特征在于,试剂盒的组成为:血片消化液、裂解液、结合液、磁珠、三(2-羧乙基)膦、洗涤液1、洗涤液2、洗涤液3、洗脱液。2.根据权利要求1所述的一种采血卡快速提取试剂盒,其特征在于,所述血片消化液其目的为将采血卡进行消化,释放出细胞,其中各成分分别为:Tris-HCl(pH3.3-4.4)的浓度为1-3mol/L,EDTA(PH8.0-10.0)的浓度为0.5-0.8mol/L,NaCl的浓度为0.1-0.3mol/L,SDS的浓度为20-40g/L。3.根据权利要求1所述的一种采血卡快速提取试剂盒,其特征在于,所述裂解液其目的为强力快速裂解样本释放大量的DNA,其中各成分分别为:Tris-HCl的浓度为12-14mmol/L,pH为2.8-3.2;异硫氰酸胍的浓度为11-15mmol/L;氢氧化钠浓度为2-4.5mmol/L;NP-40的浓度为6-10%;SDS的浓度为2-5%;谷胱甘肽的浓度为1-4mol/L;十二烷基肌酸钠浓度为1-4mol/L;PEG6000的浓度为2-10%。4.根据权利要求1所述的一种采血卡快速提取试剂盒,其特征在于,所述结合液作用为能够快速为磁珠结合核酸提供稳定的环境,增强核酸与磁珠结合的效率,其中各成分分别为:Tris-HCl的浓度为6-10mmol/L,pH为3-5.4;异丙醇的浓度为75-85%。5.根据权利要求1所述的一种采血卡快速提取试...
【专利技术属性】
技术研发人员:陈华云,肖湘文,刘淑园,刘孝礼,潘培伟,赵丽,
申请(专利权)人:广州和实生物技术有限公司,
类型:发明
国别省市:广东,44
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