一种鉴定稻瘟病抗性基因Pi-ta和Pi-b的多重PCR方法技术

本发明专利技术涉及一种鉴定稻瘟病抗性基因Pi-ta和Pi-b的多重PCR方法，属于水稻遗传改良与农业生物技术应用领域。根据Pi-ta和Pi-b基因抗、感等位基因的差异，开展了分子标记引物的改良、PCR反应组分的摸索以及循环参数的优化，建立了能同时鉴定稻瘟病抗性基因Pi-ta和Pi-b的多重PCR方法。与单个基因的标记检测方法相比，本发明专利技术能够对水稻种质资源或育种群体中Pi-ta和Pi-b的抗、感基因型进行同步鉴定和选择，从而提高稻瘟病抗性基因的聚合育种效率，加速抗病品种的选育。

【技术实现步骤摘要】
—种鉴定稻瘟病抗性基因P1-ta和P1-b的多重PCR方法一、
本专利技术涉及一种鉴定稻瘟病抗性基因P1-ta和P1-b的多重PCR方法，属于水稻遗传改良与农业生物技术应用领域，专用于含P1-ta与P1-b抗性基因水稻资源的鉴定和聚合育种研究。二、
技术介绍
稻痕病是由子囊菌(Magnaporthegrisea)引起的一种水稻真菌病害,其危害面积和程度之大已经对水稻高产、稳产造成了严重的阻碍。据统计，全球每年因稻瘟病损失的水稻产量约占总产量的10%~15%，足以供应6000万人I年的口粮(郑钊等，分子植物育种，2009，7(3):385-392)，而我国的稻瘟病危害也相当严重，自上世纪90年代以来，我国稻瘟病的年发生面积均在380万hm2以上，年损失稻谷达数亿公斤(董继新等，农业生物技术学报，2000，8 (I):99-102.)。实践证明，培育抗性品种是防治稻瘟病最经济、有效的方法。但由于稻瘟病菌变异性强，很多抗性品种种植几年就会丧失抗性(沈瑛等，植物病理学报，1993, 23 (4): 309-313)。因此,利用分子标记辅助选择(Marker-assistedSelec本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种鉴定稻瘟病抗性基因/和的多重PCR方法，其特征在于: 利用PCR反应体系I中， 抗病等位基因朽-h特异性引物:正向 P1-1a-F 序列:5’ -AGCAGGTTATAAGCTAGGCC-3’反向 P1-1a-R 序列:5’ -CTACCAACAAGTTCATCAAA-3’ 抗病等位基因特异性引物: 正向序列:5’ -GAACAATGCCCAAACTTGAGA-3’反向 /7Z-A-R 序列:5’ -TGGTCCACATGTCAGTGAGC-3’ 和PCR反应体系II中， 感病等位基因特异性引物: 正向序列:5’ -AGCAGGTTATAAGCTAGCTAT-3’ 反向序列:5’ -CTA CCAACAAGTTCATCAAA-3’ 感病等位基因特异性引物: 正向序列:5’ -TCGGTGCCTCGGTAGTCAGT-3’ 反向序列:5’ -TGGAAGCGGATCCTAGGTCT-3’ 同时扩增水稻品种的基因组DNA，如果体系I所用两对引物能同时扩增出1，042 bp和365 bp两条特征条带，即为含/和/7Z-A基因的纯合体；如果体系II所用两对引物能同时扩增出1，042 bp和803 bp两条特征条带，即为含与p1-b基因的纯合体；如果体系I和体系II分别扩增出1，042 bp和803 bp的特征条带，则为含与/7^基因的纯合个体；如果体系I和体系II分别扩增出365 bp和1，042 bp，则为含p1-1a与...

【专利技术属性】
技术研发人员：姚姝，陈涛，王才林，刘燕清，张亚东，朱镇，赵庆勇，周丽慧，赵凌，于新，赵春芳，
申请(专利权)人：江苏省农业科学院，
类型：发明
国别省市：