一种小麦遗传转化方法技术

本发明专利技术公开了一种小麦遗传转化方法，具体来说涉及一种通过抗生素梯度筛选增加小麦遗传转化效率的方法，包括如下步骤：（1）将小麦胚性愈伤组织进行预培养；（2）将含有目的基因和潮霉素抗性基因的表达载体通过基因枪法导入胚性愈伤组织；（3）恢复培养；（4）在筛选培养基上培养35-55天；所述筛选培养基中含有35-45mg·L-1的潮霉素；（5）在含有35-45mg·L-1潮霉素的分化培养基上培养10-20天，得到产生芽点的胚性愈伤组织；（6）在含有15-25mg·L-1潮霉素的分化培养基上培养30-60天，得到小苗；（7）在生根培养基上培养至生根。本发明专利技术操作简单易行，转化效率高，转化后所得到小麦幼苗生长状态良好，具有非常大的实际应用价值和市场推广前景。

【技术实现步骤摘要】

本 专利技术涉及ー种小麦遗传转化方法，具体来说涉及一种通过抗生素梯度筛选增加小麦遗传转化效率的方法。
技术介绍
小麦是世界上最重要的粮食作物之一，是仅次于水稻的第二大粮食作物，在世界各地都被广泛种植。小麦是我国人民赖以为生的农作物，随着我国人口的増加和人民生活水平的提高，对小麦的产量和品质也提出了越来越高的要求。传统的常规育种已经不能满足对小麦的品种和品质的要求，转基因技术的发展打破了常规育种的限制，已经成功地在棉花、玉米、大豆、油菜等作物中培育出高产新品种，创造了良好的经济效益和社会效益。小麦由于转化效率较低，转基因株系较难获得，因而与其它作物相比分子育种相对落后。目前小麦的转化方法主要有花粉管通道法、基因枪法、农杆菌法、电激转化法和PEG法。由于小麦原生质体再生困难，所以限制了电激转化法和PEG转化法的应用。花粉管通道介导的遗传转化是在植物授粉后将外源DNA片段通过花粉管通道导入胚囊，从而整合到受精卵基因组中，然后发育成种子。花粉管通道法简单易行，但转化后代性状变异复杂，后期筛选工作很困难，因而一直没有被广泛使用。农杆菌介导的小麦遗传转化一直是植物界研究的一道难题。人们对影响农本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种小麦遗传转化方法，包括如下步骤：（1）将小麦胚性愈伤组织进行预培养；（2）将含有目的基因的表达载体通过基因枪法导入完成步骤（1）的胚性愈伤组织；所述表达载体含有潮霉素抗性基因；（3）将完成步骤（2）的胚性愈伤组织进行恢复培养；（4）取完成步骤（3）的胚性愈伤组织，在筛选培养基上培养35?55天；所述筛选培养基中含有35?45mg·L?1的潮霉素；（5）取步骤（4）得到的胚性愈伤组织，在含有35?45mg·L?1W潮霉素的分化培养基上培养10?20天，得到产生芽点的胚性愈伤组织；（6）取步骤（5）得到的产生芽点的胚性愈伤组织，在含有15?25mg·L?1潮霉素的分化培养基上培养30?60天，...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：种康，牛遇达，李春华，张景昱，
申请(专利权)人：中国科学院植物研究所，
类型：发明
国别省市：