检测22个位点耳聋基因多态性的SNaPshot试剂的应用制造技术

本发明专利技术提供了引物组在制备检测多种耳聋基因多态性的SNaPshot试剂中的应用，检测的耳聋基因多态性位点包括GJB2基因位点rs80338939、rs80338942、rs80338943、rs111033204、176_191del16、c.35dupG、508_511dupAACG；GJB3基因rs74315318、rs74315319；SLC26A4基因rs111033220、rs201562855、rs111033305、rs192366176、rs111033318、rs121908362、rs121908363、rs200455203、rs111033380、rs111033313、c.281C>T；线粒体DNArs267606619、rs267606617。

Application of SNaPshot reagent for detecting deafness gene polymorphism of 22 loci

The present invention provides a primer set by SNaPshot reagent was used to detect a variety of deafness gene polymorphism in the system, deafness gene polymorphism detection including GJB2 gene loci rs80338939, rs80338942, rs80338943, rs111033204, 176_191del16, c.35dupG, 508_511dupAACG, rs74315318, rs74315319; GJB3 gene; SLC26A4 gene rs111033220, rs201562855, rs111033305, rs192366176, rs111033318 rs121908363, rs200455203, rs121908362, rs111033380, c.281C>, rs111033313, DNArs267606619, rs267606617; T; mitochondria.

【技术实现步骤摘要】
检测22个位点耳聋基因多态性的SNaPshot试剂的应用
本专利技术涉及分子生物学诊断领域和遗传病领域。具体地，本专利技术提供了一种检测多种耳聋基因多态性的SNaPshot试剂盒。
技术介绍
先天性耳聋是最常见的出生缺陷之一，也是最常见的人类感觉系统疾病，发病率为0.1％-0.3％。60％的耳聋与遗传因素相关。在这些遗传因素中，主要包括GJB2、SLC26A4、GJB3基因和线粒体DNAm.1555A>G和m.1494C>T位点。在中国新生儿耳聋基因突变筛查中，GJB2基因突变具有较高的携带率，约2.6％，SLC26A4基因突变携带率约为1.9％，新生儿线粒体DNAm.1555A>G均质突变占0.1％，GJB3基因突变仅在少数患者中发现。GJB2基因编码的Cx26表达于耳蜗，位于内耳血管纹、基底膜和螺旋缘，与先天性遗传性中重度耳聋相关，GJB2基因突变后，K+进入内淋巴液的循环受到影响，导致常显或常隐感音神经性耳聋(DFNB1或DFNA3)。GJB3基因编码的Cx31是缝隙连接蛋白的一员，在耳蜗和听神经内表达，突变可导致常显或常隐非综合性耳聋、周围神经疾病伴听力丧失本文档来自技高网...

【技术保护点】
引物组在制备检测多种耳聋基因多态性的SNaPshot试剂中的应用，引物具体序列为：管1的扩增引物：

【技术特征摘要】
1.引物组在制备检测多种耳聋基因多态性的SNaPshot试剂中的应用，引物具体序列为：管1的扩增引物：管2的扩增引物：管1的测序引物：管2的测序引物：2.权利要求1所述的应用，其中测序引物浓度比例如下：管1各测序引物的浓度:管2各测序引物的浓度:3.权利要求1或2任一项所述的试剂盒,其中扩增引物在进行扩增时，扩增试剂比例如下：其中，扩增引物的比例均为1：1。4.权利要求1或2任一项所述的试剂盒，扩增产物在进行微测序时，测序试剂比例如下：5.一种利用Snapshot技术一次性检测多个耳聋基因多态性位点的非诊断科研方法，具体包括步骤：DNA提取：以人血的采集样本进行DNA提供，具体参考公司有关《血液基因组DNA提取标准操作流程》，提取完毕的DNA计算其浓度并稀释至5-10μg/mL；试剂准备：a)配置二倍的MasterMix，这其中包括dNTP、MgCl2、热启动超保真DNA聚合酶、缓冲液，室温融化后，短暂离心；准备好合适数量的PCR反应管；b)配制权利要求1所列的扩增引物混合物：各引物的比例均为＝1:1，震荡混匀；短暂离心后备用；c)反应体系配制d)震荡混匀，短暂离心后，分装23μL至标记好的PCR反应管。转移至标本制备区；加样a)若样品及质控品保存在-20℃，使用前置室温解冻，并短暂离心；b)向分装好的PCR反应管中加入10ngDNA模板，并进行稀释；c)盖好管盖后，震荡混匀，短暂离心，转移至PCR扩增区；PCR扩增：置PCR管放于PCR仪上。反应程序设置如...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵薇薇，胡昌明，徐艳艳，陈白雪，贺书香，刘晶星，于世辉，
申请(专利权)人：广州金域医学检验中心有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44