一种表达载体及其在植物基因功能研究中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种表达载体及其在植物基因功能研究中的应用。本发明专利技术提供了一种特异表达载体：包括如下元件：LB序列、RB序列、抗性筛选基因甲、抗性筛选基因乙、启动子、终止子和特异DNA分子；所述特异DNA分子中具有两个sfiI酶切位点；所述特异表达载体中，所述特异DNA分子以外的其它部分不具有sfiI酶切位点；所述启动子、所述特异DNA分子和所述终止子处于同一表达盒，且自上游至下游依次为：所述启动子、所述特异DNA分子和所述终止子。通过使用本发明专利技术的特异表达载体构建大豆全长cDNA文库，然后转化拟南芥，获得众多表型，本发明专利技术可用于进行植物功能基因组的研究。

An expression vector and its application in the study of plant gene function

The invention discloses an expression vector and its application in the study of plant gene function. The invention provides a specific expression vector comprises the following components: LB sequence, RB sequence, a resistant gene resistance screening, gene B, promoter, terminator and specific DNA molecules; two sfiI restriction sites with the specific DNA molecules; the specific expression of the carrier, the other part beyond the specific DNA molecules with sfiI endonuclease sites; the promoter, the specific DNA molecule and the terminator in the same expression cassette, and from upstream to downstream is as follows: the promoter, the specific DNA molecule and the terminator. A full length cDNA Library of soybean is constructed by using the specific expression vector of the present invention, and then transformed into Arabidopsis thaliana to obtain a plurality of phenotypes, and the invention can be used for studying the functional genome of plants.

【技术实现步骤摘要】
一种表达载体及其在植物基因功能研究中的应用
本专利技术涉及一种表达载体及其在植物基因功能研究中的应用。
技术介绍
基因是存在于染色体上的一段DNA序列，生物的性状都是由基因的表达与否控制的。研究基因的功能不仅可以获取基因的具体生物学信息，更可以直接进行操作和改良，为人类生活和健康提供服务。随着科学技术的进步和生物学的迅猛发展，许多模式生物的基因功能已被解析。在国际上，酵母全基因组基因缺失突变体已经构建完成；在线虫以及果蝇中，利用不同的功能基因组学方法也阐明了许多基因的功能。近年来，在植物的模式生物拟南芥和水稻中，功能基因组学也取得了瞩目的成就。但是，对于大多数不是模式生物的作物，功能基因组学研究显得相对滞后。大豆在我国国民经济中占据重要地位，为我们提供丰富的蛋白质资源和油料品种。但由于大豆基因组结构庞大，同时也是4倍体作物，含有大量非编码序列冗余重复基因，所以对其功能基因组研究显得十分滞后。大规模研究基因功能的方法有正向遗传学和反向遗传学。正向遗传学从表型入手，构建群体定位基因，最后阐明基因功能，比如EMS诱变等，但这种方法耗时，效率偏低，仅仅依靠EMS诱变已不能满足快速有效分析基因本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种特异表达载体：包括如下元件：LB序列、RB序列、抗性筛选基因甲、抗性筛选基因乙、启动子、终止子和特异DNA分子；所述特异DNA分子中具有两个sfiI酶切位点；所述特异表达载体中，所述特异DNA分子以外的其它部分不具有sfiI酶切位点；所述启动子、所述特异DNA分子和所述终止子处于同一表达盒，且自上游至下游依次为：所述启动子、所述特异DNA分子和所述终止子。

【技术特征摘要】
1.一种特异表达载体：包括如下元件：LB序列、RB序列、抗性筛选基因甲、抗性筛选基因乙、启动子、终止子和特异DNA分子；所述特异DNA分子中具有两个sfiI酶切位点；所述特异表达载体中，所述特异DNA分子以外的其它部分不具有sfiI酶切位点；所述启动子、所述特异DNA分子和所述终止子处于同一表达盒，且自上游至下游依次为：所述启动子、所述特异DNA分子和所述终止子。2.如权利要求1所述的特异表达载体：其特征在于：所述特异DNA分子如序列表的序列1自5’端第2568-2605位核苷酸所示。3.如权利要求1或2所述的特异表达载体：其特征在于：所述抗性筛选基因甲为Bar基因；所述抗性筛选基因乙为卡那霉素抗性基因。4.如权利要求1-3任一所述的特异表达载体：其特征在于：所述启动子为35S启动子；所述终止子为NOS终止子。5.如权利要求1-4任一所述的特异表达载体，其特征在于：所述特异表达载体为序列表的序列1所示的环形质粒。6.一种试剂盒，包括权利要求1-5中任一所述的特异表达载体；所述试剂盒的功能为如下(a1)-(a9)中的至少一种：(a1)构建cDNA文库；(a2)构建大豆cDNA文库；(a3)构建植物cDNA文库；(a4)研究大豆基因功能；(a5)研究植物基因功能；(a6)挖掘植物新基因；(a7)挖掘植物新基因并验证其功能；(a8)挖掘大豆新基因；(a9)挖掘大豆新基因并验证其功能。7.权利要求1-5中任一所述的特异表达载体，或，权利要求6所述的试剂盒的应用，为如下(...

【专利技术属性】
技术研发人员：矫永庆，李祥，郭葳，沈欣杰，赵为，
申请(专利权)人：中国农业科学院油料作物研究所，
类型：发明
国别省市：湖北,42