针对EPHA4的人类单克隆抗体和其用途制造技术

本发明专利技术提供新型完全人类EphA4单克隆抗体，其具有不同结合特征。还披露这些抗体的抗原结合片段、这些抗体的双特异性形式以及这些抗体的结合物。此外，披露编码这些抗体、抗原结合片段、双特异性抗体和结合物的核酸。这些单克隆抗体、抗原结合片段、双特异性抗体、结合物、核酸和载体可用于鉴别和治疗患有与异常EphA4介导的信号传导有关的疾病或病状的个体。

Human monoclonal antibodies for EPHA4 and uses thereof

The present invention provides novel human EphA4 monoclonal antibodies with different binding characteristics. These antibodies also revealed antigen binding fragment, bispecific antibodies and these antibodies form these conjugates. In addition, the disclosure of these encoding antibodies, antigen binding fragments, bispecific antibody and nucleic acid conjugates. These monoclonal antibodies and antigen binding fragments, bispecific antibodies, conjugates, and nucleic acid vectors can be used to identify and treat patients with abnormal EphA4 mediated signal transduction related diseases or symptoms of the individual.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】针对EPHA4的人类单克隆抗体和其用途美国政府利益声明本专利技术是在美国国家卫生研究院(NationalInstitutesofHealth)、国家癌症研究所(NationalCancerInstitute)的计划号ZIABC010701下，在政府支持下进行。美国政府具有本专利技术中的某些权利。相关申请案本申请案要求2014年7月31日申请的美国临时专利申请案第62/031,793号的优先权，其内容以全文引用的方式并入本文中以用于所有目的。
技术介绍
本申请涉及结合EphA4的单克隆抗体(mAb)和抗原结合片段或它们的其它衍生物，以及这些抗体/片段/衍生物用语诊断和治疗与EphA4信号传导失调有关的疾病和病状(如肿瘤、神经变性病症和情绪障碍)的用途。受体的产生红血球生成素的肝细胞(Eph)家族是受体酪氨酸激酶，其结合细胞膜锚定配位体并且至少在大脑、心脏、肺、肌肉、肾脏、胎盘、胰腺(Fox等人,《癌基因(Oncogene)》(1995)10:897)和黑色素细胞(Easty等人,《国际癌症杂志中表达(Int.J.Cancer)》(1997)71:1061)Eph受体基于序列类似性和其对糖基化本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种经分离的单克隆抗体或其抗原结合片段，其包含：a)重链可变域，其包括如SEQ ID NO:3阐述的氨基酸序列的氨基酸26‑33、如SEQ ID NO:3阐述的氨基酸序列的氨基酸51‑58和/或如SEQ ID NO:3阐述的氨基酸序列的氨基酸97‑115，和轻链可变域，其包括如SEQ ID NO:6阐述的氨基酸序列的氨基酸27‑37、如SEQ ID NO:6阐述的氨基酸序列的氨基酸55‑57和/或如SEQ ID NO:6阐述的氨基酸序列的氨基酸94‑100；b)重链可变域，其包括如SEQ ID NO:4阐述的氨基酸序列的氨基酸26‑33、如SEQ ID NO:4阐述的氨基酸序列的氨基酸51‑5...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.07.31 US 62/031,7931.一种经分离的单克隆抗体或其抗原结合片段，其包含：a)重链可变域，其包括如SEQIDNO:3阐述的氨基酸序列的氨基酸26-33、如SEQIDNO:3阐述的氨基酸序列的氨基酸51-58和/或如SEQIDNO:3阐述的氨基酸序列的氨基酸97-115，和轻链可变域，其包括如SEQIDNO:6阐述的氨基酸序列的氨基酸27-37、如SEQIDNO:6阐述的氨基酸序列的氨基酸55-57和/或如SEQIDNO:6阐述的氨基酸序列的氨基酸94-100；b)重链可变域，其包括如SEQIDNO:4阐述的氨基酸序列的氨基酸26-33、如SEQIDNO:4阐述的氨基酸序列的氨基酸51-58和/或如SEQIDNO:4阐述的氨基酸序列的氨基酸97-115，和轻链可变域，其包括SEQIDNO:7的氨基酸27-37、如SEQIDNO:7阐述的氨基酸序列的氨基酸55-57和/或如SEQIDNO:7阐述的氨基酸序列的氨基酸94-100；或c)重链可变域，其包括如SEQIDNO:5阐述的氨基酸序列的氨基酸27-37、如SEQIDNO:5阐述的氨基酸序列的氨基酸55-57和/或如SEQIDNO:5阐述的氨基酸序列的氨基酸94-100，和轻链可变域，其包括如SEQIDNO:8阐述的氨基酸序列的氨基酸27-37、如SEQIDNO:8阐述的氨基酸序列的氨基酸55-57和/或如SEQIDNO:8阐述的氨基酸序列的氨基酸94-100，其中所述单克隆抗体或抗原结合片段特异性结合EphA4。2.根据权利要求1所述的经分离的单克隆抗体或抗原结合片段，其包含：a)重链可变域，其包括如SEQIDNO:3阐述的氨基酸序列的氨基酸26-33、如SEQIDNO:3阐述的氨基酸序列的氨基酸51-58和如SEQIDNO:3阐述的氨基酸序列的氨基酸97-115，和轻链可变域，其包括如SEQIDNO:6阐述的氨基酸序列的氨基酸27-37、如SEQIDNO:6阐述的氨基酸序列的氨基酸55-57和如SEQIDNO:6阐述的氨基酸序列的氨基酸94-100；b)重链可变域，其包括如SEQIDNO:4阐述的氨基酸序列的氨基酸26-33、如SEQIDNO:4阐述的氨基酸序列的氨基酸51-58和如SEQIDNO:4阐述的氨基酸序列的氨基酸97-115，和轻链可变域，其包括SEQIDNO:7的氨基酸27-37、如SEQIDNO:7阐述的氨基酸序列的氨基酸55-57和如SEQIDNO:7阐述的氨基酸序列的氨基酸94-100；或c)重链可变域，其包括如SEQIDNO:5阐述的氨基酸序列的氨基酸27-37、如SEQIDNO:5阐述的氨基酸序列的氨基酸55-57和/或如SEQIDNO:5阐述的氨基酸序列的氨基酸94-100，和轻链可变域，其包括如SEQIDNO:8阐述的氨基酸序列的氨基酸27-37、如SEQIDNO:8阐述的氨基酸序列的氨基酸55-57和如SEQIDNO:8阐述的氨基酸序列的氨基酸94-100。3.根据权利要求1或权利要求2所述的经分离的单克隆抗体或抗原结合片段，其包含：a)重链可变域，其包括如SEQIDNO:3阐述的氨基酸序列，和轻链可变域，其包括如SEQIDNO:6阐述的氨基酸序列；b)重链可变域，其包括如SEQIDNO:4阐述的氨基酸序列，和轻链可变域，其包括如SEQIDNO:7阐述的氨基酸序列；或c)重链可变域，其包括如SEQIDNO:5阐述的氨基酸序列，和轻链可变域，其包括如SEQIDNO:8阐述的氨基酸序列。4.根据权利要求1到3中任一权利要求所述的经分离的单克隆抗体或抗原结合片段，其中所述单克隆抗体或抗原结合片段是完全人类的。5.根据权利要求1到4中任一权利要求所述的经分离的单克隆抗体，其中所述单克隆抗体是IgG。6.根据权利要求1到4中任一权利要求所述的经分离的抗原结合片段，其中所述抗原结合片段是scFv、Fv、Fab或F(ab)2抗原结合片段。7.一种双特异性抗体，其包含根据权利要求1到6中任一权利要求所述的单克隆抗体或抗原结合片段。8.根据权利要求1到6中任一权利要求所述的经分离的单克隆抗体或抗原结合片段，或根据权利要求7所述的双特异性抗体，其结合于效应分子。9.根据权利要求8所述的经分离的单克隆抗体、抗原结合片段或双特异性抗体，其中所述效应分子是可检测标记。10.根据权利要求9所述的经分离的单克隆抗体、抗原结合片段或双特异性抗体，其中所述可检测标记是荧光标记、放射性标记、抗生物素蛋白、生物素或酶。11.根据权利要求8所述的经分离的单克隆抗体、抗原结合片段或双特异性抗体，其中所述效应分子是毒素或化学治疗剂。12.根据权利要求11所述的经分离的单克隆抗体、抗原结合片段或双特异性抗体，其中所述毒素是绿脓杆菌外毒素(Pseudomonasexotoxin)。13.一种多核苷酸序列，其编码根据权利要求1到6中任一权利要求所述的单克隆抗体或抗原结合片段、根据权利要求7所述的双特异性抗体或根据权利要求8到12中任一权利要求所述的结合物，其任选地可操作地连接于启动子。14.一种表达盒，其包含根据权利要求13所述的多核苷酸序列。15.一种载体，其包含根据权利要求13所述的多核苷酸序列或根据权利要求14所述的表达盒。16.根据权利要求15所述的载体，其中所述载体是病毒载体。17.一种宿主细胞，其包含根据权利要求15或权利要求16所述的载体。18.一种检测生物样品中艾普瑞林(ephrin)EphA4的方法，其包含：使所述样品与根据权利要求1到6中任一权利要求所述的单克隆抗体或抗原结合片段、根据权利要求7所述的双特异性抗体或根据权利要求8到10中任一权利要求所述的结合物在足以形成免疫复合物的条件下接触，和检测存在或不存在所述免疫复合物，其中存在所述免疫复合物表明所述生物样品中存在EphA4。19.根据权利要求18所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：叶玉如，傅洁瑜，傅颖瑜，迪米特尔·S·迪米特罗夫，应天磊，
申请(专利权)人：美国政府由卫生和人类服务部的部长所代表，香港科技大学，
类型：发明
国别省市：美国,US