抗TIE2抗体及其用途制造技术

本发明专利技术提供结合Tie2的抗体及使用所述抗体的方法。根据本发明专利技术的某些实施方案，所述抗体是结合人Tie2并且阻断Tie2与一个或多个Tie2配体诸如血管生成素1(Ang1)、血管生成素2(Ang2)、血管生成素3(Ang3)和/或血管生成素4(Ang4)之间的相互作用的完整人抗体。本发明专利技术的抗体尤其用于治疗与一种或多种Tie2生物学活性(包括血管发生)相关的疾病或病症。

Anti TIE2 antibodies and uses thereof

The present invention provides antibodies in combination with Tie2 and methods of using the antibodies. According to some embodiments of the invention, the antibody is a combination of Tie2 and blocking Tie2 with one or more Tie2 ligands such as angiopoietin 1 (Ang1) and angiopoietin 2 (Ang2) and angiopoietin 3 (Ang3) and / or angiopoietin 4 (Ang4) of full human interaction between the antibody. Antibodies of the present invention are especially useful in the treatment of diseases or conditions associated with one or more of the biological activities of Tie2, including angiogenesis.

【技术实现步骤摘要】
抗TIE2抗体及其用途本申请是申请日为2012年8月16日、专利技术名称为“抗TIE2抗体及其用途”的中国专利申请201280040426.9(国际申请号PCT/US2012/051038)的分案申请。专利
本专利技术涉及抗体及其抗原结合片段，所述抗体对于人Tie2是特异性的。背景血管发生是由此形成新血管的生物学过程。异常的血管发生与严重的疾病包括例如增殖性视网膜病、类风湿关节炎和牛皮癣相关。此外，充分确定血管发生对于肿瘤生长和维持是关键性的。Tie2是单跨膜酪氨酸激酶受体，其已经被定位于形成血管的内皮细胞上并且已经显示出在血管发生中起作用。Tie2配体包括血管生成素(例如Ang1、Ang2、Ang3和Ang4)。在有利于限制或阻断血管发生的环境下，预期阻断Tie2和其配体中的一种或多种之间的相互作用具有有益的治疗作用。针对Tie2的抗体例如在美国专利号6,365,154和6,376,653中提及。尽管如此，本领域中存在这样的新分子的需要，所述新分子能够结合Tie2，尤其所述新分子是能够阻断Tie2与一种或多种Tie2配体诸如Ang2的相互作用的抗Tie2抗体。此类分子将用于多种治疗和诊断目的。专利技术简述本专利技术提供结合人Tie2的抗体。本专利技术的抗体尤其用于抑制Tie2介导的信号传递并用于治疗由Tie2活性和/或信号传递引起的或者与Tie2活性和/或信号传递相关的疾病和病症。根据某些实施方案，本专利技术的抗体阻断Tie2和Tie2配体中的一种或多种诸如Ang1、Ang2、Ang3和/或Ang4之间的相互作用。本专利技术的抗体可以是全长的(例如，IgG1或IgG4抗体)或者可以仅包含抗原结合部分(例如，Fab、F(ab’)2或scFv片段)，并且可以被修饰以影响功能性，例如以消除残留的效应子功能(Reddy等,2000,J.Immunol.164:1925-1933)。本专利技术提供与如本文所述的任一示例性抗Tie2抗体具有基本上相同结合特征的抗Tie2抗体。本专利技术包括产生本文所述的抗Tie2抗体的细胞系。作为非限制性实例，产生示例性抗体H1M2055N和H2aM2760N的细胞系在2011年12月2日在按照布达佩斯条约的条款下保藏于美国典型培养物保藏中心(ATCC),10801UniversityBlvd.,Manassas,Va.20110-2209。已为保藏的细胞系指定以下保藏号：PTA-12295(H1M2055N)和PTA-12296(H2aM2760N)。本专利技术提供编码本文所述的示例性抗Tie2抗体的核酸分子。携带本专利技术的核酸的重组表达载体以及已引入此类载体的宿主细胞也包含在本专利技术中，所述载体和宿主细胞作为在允许产生抗体的条件下通过培养所述宿主细胞来产生抗体并且回收所产生的抗体的方法。本专利技术包括抗体及其抗原结合片段，其包含在任何本文所述的示例性抗Tie2抗体(包括由保藏的细胞系PTA-12295和PTA-12296产生的抗体)内发现的重链和轻链CDR氨基酸序列(HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3)。本专利技术还包括抗体及其抗原结合片段，其包含在本文所述的任意示例性抗Tie2抗体(包括由保藏的细胞系PTA-12295和PTA-12296产生的抗体)内发现的重链和轻链可变域氨基酸序列(HCVR和LCVR)。本专利技术包括本文所述的具有修饰的糖基化模式的任何示例性抗Tie2抗体。在一些应用中，去除不需要的糖基化位点的修饰、或者抗体缺少寡糖链中存在的岩藻糖部分例如以增加抗体依赖性细胞毒作用(ADCC)功能可以是有用的(见Shield等(2002)JBC277:26733)。在其他应用中，可以进行半乳糖基化修饰以修饰依赖补体的细胞毒性(CDC)。在另一方面，本专利技术提供包含如本文所述的抗Tie2抗体和可药用的载体的药物组合物。在相关方面，本专利技术描述了组合物，其包含抗Tie2抗体和第二治疗剂的组合。可以有利地与抗Tie2抗体组合的示例性试剂包括但不限于抑制抗Tie2活性的其他试剂(包括其他抗体或其他抗体的抗原结合片段、肽抑制剂、小分子拮抗剂等)和/或干扰Tie2上游或下游信号传递的试剂。在另一方面，本专利技术提供使用本专利技术的抗Tie2抗体或抗体的抗原结合部分来抑制Tie2活性的方法，其中治疗方法包括施用治疗有效量的包含本专利技术的抗体或抗体的抗原结合片段的药物组合物。所治疗的病症是通过去除、抑制或降低Tie2活性而好转、减轻、抑制或预防的任何疾病或病症。本专利技术的抗Tie2抗体或抗体片段可以行使阻断Tie2和Tie2结合配偶体(例如，Ang1、Ang2、Ang3和/或Ang4)之间的相互作用或另外行使抑制Tie2的信号传递活性的功能。本专利技术还包括本专利技术的抗Tie2抗体或抗体的抗原结合部分在制造用于在患者中治疗与Tie2活性相关或由Tie2活性引起的疾病或病症的药物中的用途。在下面详细描述的综述中，其他实施方案将变得显而易见。附图简述图1.全长人Tie2和用于定位本专利技术的抗Tie2抗体的表位的多种缺失构建体的线性描述。构建体上的数字表明与全长Tie2分子(SEQIDNO:1)相关的构建体的氨基酸边界。图2.显示血管生成素(hAng1、hAng2、mAng3或hAng4)与用抗Tie2抗体H4H2055N或对照I预处理的包被有hTie2的传感器尖端结合的程度的柱状图。图3.显示抗Tie2抗体(H4H2055N或对照I)与用100nM的血管生成素(hAng1、hAng2、mAng3或hAng4)预处理的包被有hTie2的传感器尖端结合的程度的柱状图。图4.图A显示施用抗Tie2抗体H2M2055N(■)或Fc对照(●)后小鼠中的H29肿瘤生长曲线。向下箭头指示处理起始日期。图B显示用抗Tie2抗体H2M2055N或Fc对照处理的小鼠中从处理起始时的肿瘤生长。星号(*)表示p<0.05MannWhitney非参数双尾t-检验。图5.在实验结束时在用抗Tie2抗体H2M2055N或Fc对照处理的小鼠中测量的H29肿瘤血管密度。星号(*)表示p<0.05MannWhitney非参数双尾t-检验。图6.图A显示施用抗Tie2抗体H2M2055N(■)或Fc对照(●)后小鼠中的Colo305肿瘤生长曲线。向下箭头指示处理起始日期。图B显示用抗Tie2抗体H2M2055N或Fc对照处理的小鼠中从处理起始时的肿瘤生长。星号(*)表示p<0.05MannWhitney非参数双尾t-检验。图7.在实验结束时在用抗Tie2抗体H2M2055N或Fc对照处理的小鼠中测量的Colo205肿瘤血管密度。星号(*)表示p<0.05MannWhitney非参数双尾t-检验。专利技术详述在描述本专利技术之前，应该理解本专利技术并不限于所述的具体方法和实验条件，这是由于此类方法和条件可以变化。还应理解本文所用的术语仅用于描述具体实施方案的目的，并不用于限制，这是由于本专利技术的范围仅由所附的权利要求来限定。除非另有定义，本文使用的所有技术和科学术语具有如本专利技术所属
的普通技术人员通常理解的相同含义。如本文所用，当用于指具体描述的数值时，术语“约”表示该值与所述值的不同可以不超过1％。例如，如本文所用，表述“约100”包本文档来自技高网...

【技术保护点】
分离的抗体或其抗原结合片段在生产用于抑制患者中肿瘤生长的药物中的用途，所述抗体或其抗原结合片段特异地结合人Tie2并阻断血管生成素介导的Tie2信号传递，其中所述抗体或抗原结合片段包含以保藏号PTA‑12295或保藏号PTA‑12296保藏于美国典型培养物保藏中心(ATCC)的细胞系产生的抗体的重链和轻链互补决定区(CDRs)。

【技术特征摘要】
2011.08.19 US 61/525,308;2012.01.17 US 61/587,213;1.分离的抗体或其抗原结合片段在生产用于抑制患者中肿瘤生长的药物中的用途，所述抗体或其抗原结合片段特异地结合人Tie2并阻断血管生成素介导的Tie2信号传递，其中所述抗体或抗原结合片段包含以保藏号PTA-12295或保藏号PTA-12296保藏于美国典型培养物保藏中心(ATCC)的细胞系产生的抗体的重链和轻链互补决定区(CDRs)。2.权利要求1的用途，其中所述抗体或其抗原结合片段包含以保藏号PTA-12295保藏于ATCC的细胞系产生的抗体的CDRs。3.权利要求1的用途，其中所述抗体或其抗原结合片段包含以保藏号PTA-12296保藏于ATCC的细胞系产生的抗体的CDRs。4.权利要求2的用途，其中所述抗体或抗原结合片段是具有以保藏号PTA-12295保藏于ATCC的细胞系产生的抗体的可变区的人抗体。5.权利要求4的用途，其中所述人抗体具有人IgG4恒定区。6.权利要求4的用途，其中所述人抗体具有人IgG1恒定区。7.权利要求3的用途，其中所述抗体或抗原结合片段是具...

【专利技术属性】
技术研发人员：G·瑟斯顿，
申请(专利权)人：瑞泽恩制药公司，
类型：发明
国别省市：美国,US