溶瘤病毒和免疫检查点调节因子组合制造技术

本发明专利技术提供一种包含至少溶瘤病毒和一或多种免疫检查点调节因子的组合，其用于治疗增生性疾病例如癌症。还涉及试剂盒，包含放置于分开容器的所述溶瘤病毒和所述一或多种免疫检查点调节因子。还涉及药物组合物，其包含有效量的所述溶瘤病毒和所述一或多种免疫检查点调节因子。

Oncolytic virus and immune checkpoint regulator combination

The invention provides an oncolytic virus and contains at least one or more immune checkpoint regulator combination for the treatment of proliferative diseases such as cancer. Also relates to a kit containing the oncolytic virus is placed in the container and separate the one or more immune checkpoint regulator. Also relates to a pharmaceutical composition comprising an effective amount of the oncolytic virus and the one or more immune checkpoint regulator.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】溶瘤病毒和免疫检查点调节因子组合
本专利技术涉及溶瘤病毒疗法，更具体地涉及治疗、预防或抑制增生类疾病特别是癌症的组合物和方法。实施方案包含溶瘤病毒，其用于组合一或多种免疫检查点调节因子用于治疗癌症。实施方案还包含一种试剂盒，该试剂盒包含这样的组分以及利用所述溶瘤病毒和所述一或多种免疫检查点调节因子进行治疗的方法。
技术介绍
每年全球有1200百万的受试者被诊断患有癌症。在工业化的国家，大约五个人中有一个死于癌症。虽然存在大量的化学疗法，但通它们常并不有效，特别是针对疾病非常初期建立的恶性和转移性的肿瘤。此外，由于肿瘤细胞进化出逃避宿主防御的机制，抗肿瘤免疫通常没有效果。免疫抑制的主要机制中的一种是被称为“T细胞耗竭”的过程，其由抗原持续暴露造成并且以抑制性受体上调为特点。这些抑制性受体充当免疫检查点以防止不受控制的免疫反应。文献中已经描述各种免疫检查点在T细胞免疫的不同层面上起作用，包括程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)及其配体PD-L1和PD-L2、CTLA-4(细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4)、LAG3(淋巴细胞激活基因3)、B和T淋巴细胞弱化因子、T细胞免疫球蛋白、粘蛋白3(TIM-3)和T细胞活化的免疫球蛋白抑制V型结构域。无论作用机理是什么，这些免疫检查点能够抑制有效抗肿瘤免疫反应的发展。对于阻断此类免疫检查点作为抑制免疫系统对肿瘤的耐受并因此挽救耗竭的抗肿瘤T细胞的手段所带来的可能的治疗益处越来越感兴趣(Leachetal.,1996,Science271:1734-6)。在过去的十年间，已经开发了大量的拮抗抗体(例如抗Tim3、抗-PD-L1、抗-CTLA-4、抗-PD1等等)，而更重要的是，其中的一些已经与在癌症患者中的客观临床反应关联。针对CTLA-4的抗体已经投放市场(例如：易普利姆玛，Yervoy，百时美施贵宝，BMS)用于转移性黑色素瘤。BMS的报告显示在1800个使用易普利姆玛治疗的黑色素瘤患者中，22％在三年后还活着。抗PD-L1(例如：MPDL3280A，Roche)和抗PD-1(例如Nivolumab，BMS)的抗体疗法还在进行中。另一种在癌症领域兴起的治疗方式为溶瘤病毒(Hermiston,2006,Curr.Opin.Mol.Ther.8:322-30)。溶瘤病毒能够选择性地在分裂中的细胞(例如癌症细胞)中复制而不伤害非分裂中的细胞(例如正常细胞)。当受感染的分裂中的细胞被溶解破坏，它们会释放新的感染性病毒颗粒去感染周围的分裂中的细胞。癌症细胞是很多病毒的理想宿主，因为它们的抗病毒干扰素路径被关闭或肿瘤抑制基因发生突变致使病毒复制可以不受限制的进行(Chernajovskyetal.,2006,BritishMed.J.332:170-2)。许多病毒包括腺病毒(adenovirus)、呼肠孤病毒(reovirus)、麻疹病毒(measles)、单纯疱疹病毒(herpessimplex)、新城疫病毒(Newcastlediseasevirus)以及痘苗病毒(vaccinia)已经作为溶瘤剂进行了临床试验。一些病毒天然溶瘤(例如呼肠孤病毒和塞内加谷小核糖核苷酸病毒(Senecavalleypicornavirus))，另一些通过修饰病毒基因组而针对肿瘤选择性进行改造。这种修饰包括关键病毒基因中的功能性缺失，利用肿瘤或组织特异性启动子控制病毒基因的表达以及趋向性修饰以将病毒重定向至癌细胞表面。第一种被管理机构批准的溶瘤病毒是遗传修饰的腺病毒，被命名为H101(上海三维生物技术)，其在2005年获得中国国家食品药品监督管理局的批准用于治疗头颈癌。另一种叫ONYX-015的溶瘤腺病毒在进行治疗各种实体瘤的临床试验阶段(在治疗复发性头颈癌的三期临床试验中)(Cohenetal.,2001,Curr.Opin.Investig.Drugs2:1770-5)。另一个示例是，溶瘤单纯疱疹1(T-VEC)通过遗传工程改造减弱病毒毒力，并增加对癌症细胞的选择性以及增强抗肿瘤免疫反应(通过GM-CSF(粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子)的表达)。在二期和三期临床试验中已经证明针对手术不能切除的黑色素瘤的临床疗效(Senzeretal,2009,J.Clin.Oncol.27:5763-71)。痘苗病毒(VV)具有许多溶瘤病毒疗法所必须的关键性质，例如对肿瘤的天然趋向性、溶解能力强、生命周期短且细胞-细胞间传播迅速、基因表达效率高以及克隆容量大。此外，它们在消灭天花的运动中还曾被递送给数百万个体而没有重大安全隐患。在这方面，TK(胸苷激酶)和VGF(痘苗病毒生长因子)双缺失且表达GM-CSF的VV(被命名为JX-963)在荷瘤小鼠中表现出显著的癌症选择性(Thorneetal.,2007,JClinInvest.117:3350-8)。同样地，JX-594，具有GM-CSF且胸苷激酶缺失的VV(Wyeth株)，展现出有前景的临床数据，并且其在肝细胞癌中的随机三期临床实验预期即将开展。文献中也已经记载了组合疗法。WO2010/014784描述了抗CTLA4抗体和化疗药物例如格列卫、紫杉酚等组合使用以治疗癌症。WO2014/047350设想了在病毒基因组中插入了编码抗PD-1抗体的基因的重组溶瘤病毒。技术问题由于大量的致病因子可能相互作用或单独引发或促使癌症的发生，人们认为癌症会在很多年内继续是严重的全球健康威胁。此外，恶性的特别是转移性的肿瘤经常对常规治疗方法产生耐受性导致一些癌症的高发病率。因此，迫切需要开发更有效的用于预防和治疗此类增生性疾病的方法，特别是组合方法。溶瘤病毒和一或多种免疫检查点调节因子同时施用的组合疗法与单独使用其中一种方法相比提供协同免疫反应。出人意料地，如在合适的模型动物中已经证实的，在施用如抗PD-1或抗CTLA-4的抗检查点抗体之前施用溶瘤痘苗病毒的组合疗法改善抗肿瘤应答，因此可能提供有效和强大的癌症疗法。因此，本文提供的实施方式在增生性疾病例如癌症的治疗和预防提供显著优势。通过提供权利要求中限定的实施方式解决了该技术问题。从本专利技术目前优选的实施方式的如下描述，本专利技术的其他和进一步的方面、特征以及优势将是显而易见的。出于公开的目的提供这些实施方式。专利技术概述本专利技术涉及溶瘤病毒和一或多种免疫检查点调节因子的协同组合，用于治疗增生性疾病例如癌症。所述溶瘤病毒优选选自呼肠孤病毒、新城疫病毒(NDV)、水疱性口炎病毒(VSV)、麻疹病毒、流感病毒、辛德比斯病毒(Sinbisvirus)、腺病毒、痘病毒和疱疹病毒(HSV)等组成的组。在一实施方式中，所述溶瘤病毒为痘苗病毒。在一优选的实施方式中，所述痘苗病毒被工程改造为缺少胸苷激酶(TK)活性(例如，所述VV的基因组具有在J2R基因中的失活突变或基因缺失以产生TK缺陷表型)。可选地或者组合地，所述痘苗病毒被工程改造为缺少核糖核苷酸还原酶(RR)活性(例如，所述VV的基因组具有在I4L基因和/或F4L基因中的失活突变或者基因缺失以产生RR缺陷表型)。在一实施方式中，所述痘苗病毒进一步表达至少一个治疗性基因，尤其是编码自杀基因产物和/或免疫刺激蛋白的基因。在一实施方式中，所述一或多种免疫检查点调节因子为拮抗PD-1、PD-L1本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种组合，其包含至少溶瘤病毒和一或多种免疫检查点调节因子，其用于治疗增生性疾病例如癌症。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.07.16 EP 14306155.41.一种组合，其包含至少溶瘤病毒和一或多种免疫检查点调节因子，其用于治疗增生性疾病例如癌症。2.权利要求1的组合，其中所述溶瘤病毒是胸苷激酶(TK)活性缺陷的痘苗病毒，所述胸苷激酶(TK)活性缺陷由于J2R病毒基因中的失活突变造成。3.权利要求1或2的组合，其中所述病毒是由于病毒I4L和/或F4L基因失活突变造成核苷酸还原酶(RR)活性缺陷的痘苗病毒。4.权利要求1-3任一项的组合，其中所述溶瘤病毒还表达至少一个插入病毒基因组的治疗性基因，其中所述治疗性基因选自编码自杀基因产物的基因和编码免疫激活蛋白的基因。5.权利要求4的组合，其中所述自杀基因选自编码具有胞嘧啶脱氨酶(CDase)活性、胸苷激酶活性、尿嘧啶磷酸核糖转移酶(UPRTase)活性、嘌呤核苷磷酸化酶活性和胸苷酸激酶活性的蛋白的基因。6.权利要求5的组合，其中所述自杀基因产物具有CDase和UPRTase活性，并且优选选自codA::upp、FCY1::FUR1和FCY1::FUR1[Delta]105(FCU1)和FCU1-8多肽。7.权利要求5或6的组合，其中所述溶瘤病毒是TK和RR活性缺陷的且包含插入其基因组的治疗性FCU1自杀基因的痘苗病毒。8.权利要求4的组合，其中所述免疫刺激蛋白是白介素或集落刺激因子，特别优选GM-CSF。9.权利要求8的组合，其中所述溶瘤病毒是TK活性缺陷的且包含插入其基因组的治疗性人GM-CSF的痘苗病毒。10.权利要求1-9任一项的组合，包含约107pfu至约5x109pfu的所述溶瘤病毒。11.权利要求1-10任一项的组合，其中所述一或多种免疫检查点调节因子至少拮抗部分抑制性免疫检查点活性，特别是那些由下列PD-1、PD-L1、PD-L2、LAG3、Tim3...

【专利技术属性】
技术研发人员：L·齐特沃格尔，X·普雷维莱，L·芬德，
申请(专利权)人：特兰斯吉恩股份有限公司，
类型：发明
国别省市：法国,FR