本发明专利技术公开了一种阿帕替尼与Anti‑PD‑1抗体联用在制备结肠癌药物中的应用，本发明专利技术采用阿帕替尼与Anti‑PD‑1抗体联合用药治疗结肠癌，通过实验发现阿帕替尼与Anti‑PD‑1抗体联用肿瘤抑制率为53.97%，与单用阿帕替尼组相比，肿瘤抑制率提高了40.4%（53.97%vs13.57%，P<0.05,Mann‑Whitneytest），与单用Anti‑PD‑1抗体组相比，肿瘤抑制率提高了23.17%(53.97%vs13.57%,P<0.05,Mann‑Whitneytest)(肿瘤抑制率＝1‑实验组肿瘤体积／对照组肿瘤体积)。阿帕替尼与Anti‑PD‑1抗体联用后，较单用组相比可明显增加肿瘤坏死的面积。
In the preparation of application of colorectal cancer drugs in combination with apatinib 1 PD and Anti antibody
The invention discloses a apatinib 1 PD and Anti antibody in the preparation of application in colorectal cancer drugs, the invention adopts apatinib 1 PD and Anti antibody combination therapy in the treatment of colon cancer, through the experiment of apatinib 1 PD and Anti antibody combined with tumor inhibitory rate 53.97%, with the single use of APA compared to imatinib group, the tumor inhibition rate was increased by 40.4% (53.97%vs13.57%, P< 0.05, Mann Whitneytest), with Anti PD 1 antibody group, the tumor inhibition rate was increased by 23.17% (53.97%vs13.57%, P< 0.05, Mann (Whitneytest) tumor inhibition rate = 1 experimental group / control group tumor volume, tumor volume). Apatinib 1 PD and Anti antibody, compared with group can significantly increase the tumor necrosis area.
【技术实现步骤摘要】
阿帕替尼与Anti-PD-1抗体联用在制备结肠癌药物中的应用
本专利技术涉及制药领域，具体涉及一种阿帕替尼与Anti-PD-1抗体联用应用。
技术介绍
结直肠癌是常见的消化道恶性肿瘤，其高患病率曾成为欧美发达国家的主要问题，近年来在全球范围内上升趋势显著。根据CancerStatistics最新预测，2017年美国男性新发结直肠癌病例将占所有肿瘤的9％，排在恶性肿瘤的第三位，女性中将占所有肿瘤的8％，仅次于乳腺癌和肺癌。同样在我国，随着人民生活水平提高、饮食结构改变，结直肠癌的发病率呈继续上升趋势，2015年有376300人确诊为结直肠癌，约占所有确诊癌症患者的8％。在我国常见恶行肿瘤死亡中，结直肠癌患者在男性占第五位，女性占第六位。约15％-25％结直肠癌患者在确诊时即为晚期，另有15-25％的患者会在行结直肠癌原发灶根治术后发生复发转移。目前对于晚期结直肠癌的治疗，以5-FU或卡培他滨加奥沙利铂或者伊立替康方案化疗(XELOX、FOLFOX、FOLFIRI方案)联合靶向药物例如贝伐单抗、西妥昔单抗、帕尼单抗等为主。尽管化疗联合靶向治疗使晚期结直肠癌患者总的生存率得到了提高，但是对于多线化疗进展后的结直肠癌患者可以使用的药物很少，且化疗引起的胃肠道反应、骨髓抑制、神经毒性等不良反应经常发生。Anti-PD-1免疫疗法是当前备受瞩目的新一类抗癌免疫疗法，旨在通过阻断PD-1/PD-L1信号通路，激活人体自身的免疫系统抵御癌症，目前适用的肿瘤包括黑色素瘤和非小细胞肺癌、肾癌、结直肠癌等。但是相比黑色素瘤、肾癌、非小细胞肺癌等对Anti-PD-1/PD-L1抗体响应较好的实体肿瘤，结直肠癌一直被认为是免疫治疗不敏感的肿瘤。阿帕替尼(Apatinib)是一种新型小分子酪氨酸激酶抑制剂，能特异性结合VEGFR-2，继而抑制VEGF诱导的内皮细胞的迁移和增殖，降低肿瘤微血管密度。阿帕替尼是全球首个被证实在晚期胃癌标准化疗失败后安全有效的小分子抗血管生成靶向药物，于2014年10月被国家食品药品监督管理总局(CFDA)批准上市用于晚期胃腺癌或胃-食管结合部腺癌三线或三线以上的治疗。
技术实现思路
专利技术目的：本专利技术的目的在于针对现有技术的不足，提供一种阿帕替尼与Anti-PD-1抗体联用在制备结肠癌药物中的应用。技术方案：一种的阿帕替尼与Anti-PD-1抗体联用在制备结肠癌药物中的应用。本专利技术阿帕替尼与Anti-PD-1抗体联用的应用包含但不仅限于阿帕替尼与Anti-PD-1抗体。作为优选，所述阿帕替尼的每日给药剂量为100mg/kg。作为优选，所述Anti-PD-1抗体的每周给药剂量为两次，每次5mg/kg。本
技术实现思路
还包括阿帕替尼与Anti-PD-1抗体联用在小鼠结肠癌皮下移植模型中的应用。有益效果：本专利技术采用阿帕替尼与Anti-PD-1抗体联合用药治疗结肠癌，通过实验发现阿帕替尼与Anti-PD-1抗体联用肿瘤抑制率为53.97％，与单用阿帕替尼组相比，肿瘤抑制率提高了40.4％(53.97％vs13.57％，P<0.05,Mann-Whitneytest)，与单用Anti-PD-1抗体组相比，肿瘤抑制率提高了23.17％(53.97％vs13.57％,P<0.05,Mann-Whitneytest)(肿瘤抑制率＝1-实验组肿瘤体积/对照组肿瘤体积)。阿帕替尼与Anti-PD-1抗体联用后，较单用组相比可明显增加肿瘤坏死的面积。附图说明图1为小鼠移植瘤体积变化；图2为肿瘤重量；图3为给药终止后剥除的小鼠移植肿瘤；图4为肿瘤组织HE染色；HE染色可以看出阿帕替尼与Anti-PD-1抗体联用后，能增加凋亡细胞的比例。具体实施方式下面对本专利技术技术方案进行详细说明，但是本专利技术的保护范围不局限于所述实施例。实施例：1、细胞培养小鼠结肠癌细胞系CT26，用1640完全培养基(含10％FBS)培养于37℃、5％CO2饱和湿度的培养箱中。2、小鼠结肠癌皮下移植模型将对数生长期的小鼠结肠癌细胞CT26用胰酶消化，250g离心5min，用预冷的PBS洗两遍，并稀释成2×107/ml的浓度。6-8周龄Balb/c小鼠，将右侧腋窝附近连同身体右侧毛刮干净，以每只小鼠100μl的体积进行皮下注射。待肿瘤长出后，每隔两天用游标卡尺测量肿瘤大小。肿瘤体积计算公式：V＝0.5×L1×(L2)2，其中L1代表肿瘤长度，L2代表肿瘤宽度。3、给药方案当大部分小鼠肿瘤体积达到100-200mm3时，按肿瘤大小将小鼠随机分为4组：对照组(control)、阿帕替尼组(Apatinib)、Anti-PD-1抗体组(Anti-PD-1)、阿帕替尼与Anti-PD-1抗体联用组(Apatinib+Anti-PD-1)，每组12只。其中，对照组给予0.9％CMC，每天一次；阿帕替尼组给予阿帕替尼100mg/kg，灌胃，每天一次；Anti-PD-1抗体组给予Anti-PD-1抗体5mg/kg，腹腔注射给药，每周两次。阿帕替尼与Anti-PD-1抗体联用组给予阿帕替尼组给予阿帕替尼100mg/kg，灌胃，每天一次，并结合给予Anti-PD-1抗体5mg/kg，腹腔注射给药，每周两次。4、HE染色肿瘤取下后，切取0.5cm左右，10％缓冲中性福尔马林或bouin液固定24小时，脱色脱水、透明、透蜡、包埋：70％乙醇30min，80％乙醇30min，80％乙醇30min，85％乙醇30min，90％乙醇30min，95％乙醇30min，100％乙醇30min×2，乙醇：二甲苯(1:1)30min；二甲苯透明10min；二甲苯：石蜡(1:1)30min，石蜡1h(可延长至2h)。切片一般在5μm左右，37烤片3h。二甲苯脱蜡5min×3次，95％、70％、305乙醇各2分钟，温水2分钟。滴加苏木素染液或者将玻片浸入苏木素染液中，染色1min左右，水洗30-60秒，伊红染色30秒，梯度乙醇和二甲苯脱水(30％、70％、95％、无水乙醇、二甲苯)，自然晾干，封片镜检。5、统计数据以mean±SD表示。肿瘤体积两组间的比较，用Mann-Whitneytest，其他数据两组间比较用Student’stwo-tailedt-test来检验各组间的差异。***代表P<0.001，**代表P<0.01，*代表P<0.05。实验结果分析：从图1、2、3可以看出，阿帕替尼和Anti-PD-1抗体单用对小鼠结肠癌有部分抑制作用，但当阿帕替尼和Anti-PD-1抗体联用后，对肿瘤的抑制作用明显增强，在治疗终点时，联合用药组肿瘤大小与单用阿帕替尼组相比，肿瘤抑制率提高了40.4％(53.97％vs13.57％，P<0.05,Mann-Whitneytest)，与单用Anti-PD-1抗体组相比，肿瘤抑制率提高了23.17％(53.97％vs13.57％,P<0.05,Mann-Whitneytest)(肿瘤抑制率＝1-实验组肿瘤体积/对照组肿瘤体积)。平均肿瘤重量单用阿帕替尼组、单用Anti-PD-1抗体组、阿帕替尼和Anti-PD-1抗体联用组分别为(2.203±1.559)、(1.637±0.788)和(1.185±0.689)，联用组本文档来自技高网...
【技术保护点】
阿帕替尼与Anti‑PD‑1抗体联用在制备结肠癌药物中的应用。
【技术特征摘要】
1.阿帕替尼与Anti-PD-1抗体联用在制备结肠癌药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：包含但不仅限于阿帕替尼与Anti-PD-1抗体。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述阿帕替尼的每日给药剂...
【专利技术属性】
技术研发人员：顾艳宏，徐强，郭文洁，李乐乐，
申请(专利权)人：顾艳宏，
类型：发明
国别省市：江苏,32
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。