痘病毒溶瘤载体制造技术

本发明专利技术涉及包括缺陷性F4L和/或I4L基因的痘病毒、包括该痘病毒的组合物以及这类组合物和痘病毒用于治疗目的、更具体地用于治疗癌症的方法和用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】相关申请的交叉参考本申请是2010年5月18日提交的美国专利申请系列第12/743,402号的部分继续申请，上述申请是2008年11月17日提交的PCT/EP2008/009720的美国国家阶段，其指定美国并以英语于2009年5月28日公开为WO2009/065546A1，并根据35U.S.C.§119要求2007年11月19日提交的EP07301557.0的优先权；在此出于所有目的将各内容均明确整体并入作为参考，每个均转让给其受让人。专利
溶瘤病毒是一类新的用于治疗癌症的治疗剂，其具有依赖于肿瘤的自我永存的独特特性(HERMISTON.Ademandfornext-generationoncolyticadenoviruses.Currentopinioninmoleculartherapeutics.2006,第8卷,no.4,第322-30页)。溶瘤病毒能够选择性地在恶性肿瘤细胞中复制，因此能够提供潜在地远高于常规癌症治疗的效力和特异性水平(FISHER.Strikingoutatdisseminatedmetastases:thesystemicdeliveryofoncolyticviruses.Currentopinioninmoleculartherapeutics.2006,第8卷,no.4,第301-13页)。使用这些病毒的益处在于，当它们复制时，它们会溶解其宿主细胞。癌细胞是许多病毒的理想的宿主，因为它们具有失活的抗病毒干扰素路径，或者具有能够使病毒复制不受阻碍地进行的突变的肿瘤抑制基因(CHERNAJOVSKY,等人.Fightingcancerwithoncolyticviruses.Britishmedicaljournal.2006,第332卷,no.7534,第170-2页)。一些病毒天然地能够选择性在肿瘤细胞中复制，但溶瘤病毒也可以通过修饰天然存在的病毒获得。出于该目的，目前用于修饰病毒的主要策略包括：必要病毒基因中的功能性缺失；用于控制这些病毒基因表达的肿瘤或组织特异性启动子：和趋性修饰以将腺病毒再导向至癌细胞表面。在不久的将来，溶瘤腺病毒需要加以优化，以充分实现其作为关键抗癌工具的潜力，并因此，改善恶性神经胶质瘤患者的预后(JIANG等人Oncolyticadenovirusesasantigliomaagents.Expertreviewofanticancertherapy.2006,第6卷,no.5,第697-708页)。例如，选择性修饰成在具有p53突变的细胞中复制并将其杀死的腺病毒ONYX-015正在由OnyxPharmaceuticals开发用于多种实体瘤包括头颈、胃肠道和胰腺肿瘤的潜在治疗。其是在E1B基因座处具有功能丧失突变的重组腺病毒，其产物是与p53肿瘤抑制蛋白结合并使其失活的55kDa蛋白质。因此，认为ONYX-015腺病毒使得正常细胞不感染。p53肿瘤抑制基因的突变是癌症中遗传异常最常见的类型，在半数以上所有主要癌症类型中发生。因此，这些细胞对病毒易感，所述病毒将会很容易复制并导致细胞死亡。ONYX-015正在进行治疗复发头颈癌的III期试验，结肠直肠、卵巢、胰腺和口腔肿瘤的II期试验，以及消化系疾病、食道和肝肿瘤的I期试验(COHEN,等人.ONYX-015.OnyxPharmaceuticals.Currentopinionininvestigationaldrugs.2001,第2卷,no.12,第1770-5页)。天然溶瘤病毒是具有选择性感染肿瘤细胞并将其杀死的先天能力的有复制能力的病毒。尽管五十年前用于用活病毒治疗癌症的最初尝试，对天然溶瘤病毒的关注落后于对于改造的腺病毒和疱疹病毒用作癌症治疗剂的支持。但是，近年来，重新兴起对于这些天然存在的活性剂的高效力和选择性的关注(ROBERTS等人Naturallyoncolyticviruses.Currentopinioninmoleculartherapeutics.2006,第8卷,no.4,第314-21页)。在天然溶瘤病毒当中，牛痘病毒(痘病毒)具有许多用于溶瘤病毒疗法的理想病毒骨架所必需的关键特性。这些包括生命周期短，细胞-细胞传播迅速，溶解能力强，克隆能力大，以及分子生物学明确。此外，尽管能够在人细胞中复制，它们并不视作是天然的健康问题，尤其是明确表征在消灭天花运动中已经传递至数百万个体。使用疫苗株或遗传修饰疫苗株的早期临床结果已经证实了抗肿瘤效果(THORNE等人Vacciniavirusandoncolyticvirotherapyofcancer.Currentopinioninmoleculartherapeutics.2005,第7卷,no.4,第359-65页)。相反，痘病毒粘液瘤病毒是新的溶瘤候选物，其没有直接用于人的历史，因为其具有明显和绝对的对兔类动物(兔子)的宿主物种趋性。最近发现粘液瘤病毒也能够选择性地感染并杀死人肿瘤细胞——与大多数人癌症中发现的细胞内信号传导路径调节异常有关的独特趋性。该综述概述了粘液瘤病毒对于人癌细胞的趋性的现有知识，以及显示其在癌症动物模型中能够感染并清除肿瘤的临床前数据(STANFORD等人Myxomavirusandoncolyticvirotherapy:anewbiologicweaponinthewaragainstcancer.Expertopiniononbiologicaltherapy.2007,第7卷,no.9,第1415-25页)。技术问题注射实现抗肿瘤效果所需的高剂量痘病毒引起毒性问题。大多数不良事件较小，通常与牛痘病毒有关的不良反应是自限性的，包括发热、头痛、疲劳、肌痛、发冷、局部皮肤反应、非特异性皮疹、多形性红斑、淋巴结病和种痘部位疼痛。其他反应可能需要额外的治疗(例如，一线治疗VIG和二线治疗西多福韦(cidofovir))。可能需要进一步评价或治疗的不良反应包括偶然接种、全身性牛痘(GV)、痘性湿疹(EV)、进行性牛痘(PV)、种痘后中枢神经系统疾病和胎儿牛痘(CONO等人Smallpoxvaccinationandadversereactions.Guidanceforclinicians.MMWR.Recommendationsandreports:Morbidityandmortalityweeklyreport.Recommendationsandreports/CentersforDiseaseControl.2003,第52卷,no.RR-4,第1-28页)。因此，对于溶瘤活性与其天然对应物同样好的更加安全的痘病毒存在需求。
技术介绍
US5364773(VIROGENETICSCORPORATION(TROY,NY))15/11/1994描述了一种修饰的重组痘病毒，更具体地，一种具有失活的非必需病毒编码的编码的遗传功能的牛痘病毒，使得重组痘病毒的毒力减弱，安全性提高。具体地，通过删除编码毒力因子的可读框，或者通过编码毒力因子的可读框的插入性失活，使遗传功能失活。更具体地，该专利描述了其中J2R、B13R+B14R、A26L、A56R、C7L-K1L和I4L可本文档来自技高网...

【技术保护点】
组合物，其包含不是NYVAC的包含缺陷性I4L和/或F4L基因的痘病毒，用于与在抗癌治疗中有效的一种或多种物质组合使用。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.04.10 US 14/249,7131.组合物，其包含不是NYVAC的包含缺陷性I4L和/或F4L基因的痘病毒，用于与在抗癌治疗中有效的一种或多种物质组合使用。2.根据权利要求1使用的组合物，其中所述痘病毒还包含缺陷性J2R基因。3.根据权利要求1或2使用的组合物，其中所述在抗癌治疗中有效的一种或多种物质选自拓扑异构酶I抑制剂和抗有丝分裂药物。4.根据权利要求3使用的组合物，其中所述组合物和所述一种或多种物质经由全身路径给药或者给药至肿瘤中，优选静脉内给药。5.根据权利要求3或4使用的组合物，其中所述拓扑异构酶I抑制剂选自伊力替康、7-乙基-10-羟基-喜树碱和拓扑替康。6.根据权利要求5使用的组合物，其中所述拓扑异构酶I抑制剂是伊力替康。7.根据权利要求6使用的组合物，其中伊力替康的剂量包括从5至100mg/kg/天，并且痘病毒的剂量包括从1x106至1x109pfu。8.根据权利要求6或7使用的组合物，其中静脉注射所述痘病毒1至3次，并且在所述痘病毒的首次给药之后3至10天注射伊力替康。9.根据权利要求3或4使用的组合物，其中所述抗有丝分裂药物选自紫杉醇、多西紫杉醇、长春花碱、长春新碱、长春瑞滨和铂衍生物，例如顺铂、草酸铂、顺螺铂和卡铂。10.根据权利要求9使用的组合物，其中所述抗有丝分裂药物是草酸铂。1...

【专利技术属性】
技术研发人员：P·厄博斯，J·弗洛派，
申请(专利权)人：特朗斯吉有限公司，
类型：发明
国别省市：法国;FR