本发明专利技术提供在哺乳动物中治疗或减轻肿瘤并且通过使用溶瘤病毒和免疫刺激剂的组合提高溶瘤病毒效率的新方法，包括向宿主施用呼肠病毒并且通过添加免疫刺激剂如ＣｐＧ寡脱氧核苷酸或者通过树突细胞向宿主递送的所述病毒的至少一种抗原提高免疫反应。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及在哺乳动物中使用溶瘤病毒(oncolytic viruses )和免疫刺激剂治疗增殖紊乱的方法。
技术介绍
仅在美国每年就有超过一百万的人被诊断患有癌症。尽管在医学研 究上有许多进展，但是癌症在美国仍然是第二位主要的死亡原因。在工 业化国家中，大约在五个人中就有一个人死于癌症。在探索新策略的过 程中，溶瘤病毒疗法最近作为一种特异性杀死肿瘤细胞的可行方法脱颖 而出。与传统的基因疗法不同，该方法使用由于病毒的复制和伴随其后 的细胞溶解能扩散到整个肺瘤组织的可复制病毒，由此提供一种可供选 择的癌症治疗方法。对病毒进行基因工程改造以选才奪性地复制并杀死癌 细胞。溶瘤病毒可利用多种作用机制杀死癌细胞，所述机制包括细胞溶 解、细胞凋亡、抗血管生成和细胞坏死。病毒感染肿瘤细胞然后开始复 制。病毒继续复制直到最后"溶解，，(裂解)宿主细胞的膜，肺瘤细胞 不再能含有病毒。肿瘤细胞被摧毁并且新产生的病毒扩散到邻近的癌细 胞继续该循环。值得注意的是所有溶瘤病毒仅在癌细胞中复制，其通过 正常组织时不导致损害，这很重要。因此， 一旦根除所有肿瘤细胞，溶 瘤病毒不再具有复制的能力并且免疫系统将其从体内清除。在过去的几年中，对病毒细胞毒性分子机理的新认识为设计更有效 的溶瘤病毒提供了科学理论。根据分子生物学中最近的进展设计出几种 遗传修饰的病毒，如在肿瘤细胞中特异性复制并杀死肿瘤细胞的腺病毒 和单纯疱渗病毒。另一方面，具有内在溶瘤能力的病毒治疗性应用也在 评估之中。尽管通常已在临床前研究中证明了溶瘤病毒疗法的效力，但 是在临床试验中该治疗效力仍不是最佳的。因此，可进一步提高条件复 制病毒的溶瘤潜能的策略仍在探索之中。专利技术概述尽管认识到向患者施用溶瘤病毒可在患者中引起抗病毒免疫反应， 但是研究的焦点已经集中在如何规避发生这种天然反应上。本专利技术的另 一个方面涉及利用该天然反应提高对肿瘤的杀伤力。用溶瘤病毒疗法治 疗后，通过向患者施用免疫刺激剂，可提高对肿瘤细胞的杀伤力。不仅 肿瘤细胞易感染溶瘤病毒，而且在其表面表达病毒抗原的、经感染的肿 瘤细胞也可被经过刺激的免疫系统识别并做为"外源物质"受到攻击。 此外，已被溶瘤病毒溶解的肿瘤细胞暴露于免疫系统，因此增加免疫系 统识别肿瘤抗原的机会，在存在免疫刺激剂时尤其如此。本专利技术的 一 个方面提供在患肿瘤的哺乳动物中治疗肿瘤的方法，该 方法包括向哺乳动物施用溶瘤病毒和免疫刺激剂。优选地，在施用溶瘤 病毒后施用免疫刺激剂，更优选地在溶瘤病毒已感染肿瘤细胞后。最优 选地，在所感染的肺瘤细胞表达至少一种溶瘤病毒抗原后施用免疫刺激 剂。优选地，免疫刺激剂是合成的寡脱氧核苷酸，如胞嘧啶-磷酸盐-鸟苷(CpG)。在一个优选的实施方案中，溶瘤病毒是呼肠孤病毒，更 优选地是天然存在的呼肠孤病毒。在另一个方面，本专利技术提供在患肿瘤的哺乳动物中提高溶瘤病毒的 抗肿瘤活性的方法，该方法包括除了向哺乳动物施用溶瘤病毒外，还施 用免疫刺激剂。优选地，在施用溶瘤病毒后施用免疫刺激剂。更优选地， 在所感染的胂瘤细胞表达至少一种溶瘤病毒抗原后施用免疫刺激剂。在 一种实施方案中，免疫刺激剂是合成的寡脱氧核苷酸(ODN)，优选地 是未曱基化的胞嘧啶-磷酸-鸟苷(CpG)。本专利技术的另一个方面提供在患所述肿瘤的哺乳动物中提高溶瘤病 毒的抗肺瘤活性的方法，所述方法包括(a)将树突细胞与溶瘤病毒接 触，(b)诱导树突细胞呈递溶瘤病毒的抗原，和(c)激发对树突细胞 所呈递的抗原的免疫反应，由此在哺乳动物中引起对溶瘤病毒的免疫反 应。在一个优选的实施方案中，在体内进行步骤(a)。在另一个优选 的实施方案中，先体外后体内地进行步骤(a)并且在与病毒接触后向 哺乳动物施用树突细胞。本专利技术的另 一个方面提供提高溶瘤病毒疗法效力的方法，包括向哺 乳动物施用溶瘤病毒并且向所述哺乳动物施用免疫刺激剂。优选地，在 施用溶瘤病毒后，更优选地在溶瘤病毒已感染肿瘤细胞后施用免疫刺激剂。最优选地，在所感染的肿瘤细胞表达至少一种溶瘤病毒抗原后施用免疫刺激剂。优选地，免疫刺激剂是合成的寡脱氧核苷酸(ODN)，如 胞嘧咬-磷酸-乌苷(CpG)。在优选的实施方案中，溶瘤病毒是呼肠 孤病毒，更优选地是天然存在的呼肠孤病毒。本专利技术的又 一 个方面提供增加肿瘤细胞的免疫识别的方法，包括 (a)用溶瘤病毒感染胂瘤细胞和(b)激发对溶瘤病毒的抗原的免疫反 应，其中对溶瘤病毒的免疫反应是对被感染的胂瘤细胞所表达的溶瘤病 毒抗原的反应。优选地通过下列方法引起免疫反应，包括(i)将树突细 胞与溶瘤病毒接触，(ii)诱导树突细胞呈递溶瘤病毒抗原和(iii)激 发对溶瘤病毒的免疫反应。在一个优选的实施方案中，接触发生在体内。 在另一个优选的实施方案中，接触为先体外后体内、并且在接触后向哺 乳动物施用树突细胞。A.定义"施用，，意思是本领域技术人员已知的施用药物组合物的标准方法 中的任何一种。实例包括，但不限于肠内、经皮、静脉内、肌内或者腹 腔内施用。向受试者"施用病毒"指以使其接触靶肿瘤细胞的方式向受 试者施用病毒的行为。施用病毒的途径，以及制剂、载体将取决于靶细 胞的位置以及类型。细胞对病毒感染的"抗性，'表明用该病毒感染细胞不导致显著的病 毒产生或产量。"易感"细胞是表现为诱导为细胞病变效应、病毒蛋白 合成，和/或病毒产生。"瘤细胞"、"肺瘤细胞，，或"增殖紊乱的细胞"，指异常高速增殖 的细胞。包括肺瘤细胞的新生长是赘生物，也称作"肿瘤"。肿瘤是一 种异常的组织生长，通常形成不同的团块，其通过细胞增殖比正常组织 生长更迅速。肿瘤可能显示部分或完全缺乏组织结构以及与正常组织之 间的功能协调。如这里所使用的，肿瘤旨在包括造血肿瘤以及实体瘤。 肿瘤可能是良性的(良性肿瘤)或恶性的(恶性肿瘤或癌)。可将恶性 肿瘤粗略地分成三种主要类型。将由上皮结构产生的恶性肺瘤称作癌， 将从结締组织如肌肉、软骨、脂肪或骨中产生的恶性肿瘤称作肉瘤，将 影响包括免疫系统组分的造血结构(属于形成血细胞的结构)的恶性肿 瘤称作白血病和淋巴瘤。其它肿瘤包括，但不限于神经纤维瘤病。肿瘤细胞优选地位于哺乳动物内，特别是选自狗、猫、啮齿类、绵羊、山羊、 牛、马、猪、人和非人灵长类的哺乳动物。最优选地，哺乳动物是人。"溶瘤病毒"是一种优先在肿瘤细胞中复制并杀死肿瘤细胞的病 毒。溶瘤病毒可以是天然存在的病毒或者基因工程改造的病毒。溶瘤病 毒也包括详细描述的呼肠孤病毒之类的免疫保护的和重排列病毒。"受溶瘤病毒感染"指溶瘤病毒进入细胞并在细胞内复制。类似地， "肿瘤受溶瘤病毒感染"指溶瘤病毒进入肿瘤细胞并在肿瘤细胞内复 制。"有效量"是足以导致预期效果的免疫刺激剂或呼肠孤病毒的量。 对于用于治疗或改善肿瘤的溶瘤病毒来说，有效量是足以减轻或消除肿 瘤症状，或者足以减緩胂瘤发展的溶瘤病毒的量。"治疗或减轻肺瘤"意思是减轻或者消除肿瘤的症状，或者减緩肺瘤的发展。减轻优选地是至少约10%,更优选地至少约20%、 30%、 40 % 、 50 % 、 60 % 、 70 % 、 80 %或90 % 。可交替地使用术语"核酸，，和"寡核苷酸"以表示包括多个核苦酸 的分子。如这里所使用的，该术语指寡核糖核苷酸以及寡脱氧核本文档来自技高网...
【技术保护点】
在患肿瘤的哺乳动物中治疗或减轻所述肿瘤的方法，所述方法包括：（ａ）向哺乳动物施用溶瘤病毒；和（ｂ）施用免疫刺激剂。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：MC科菲，BG汤普逊，
申请(专利权)人：昂科利蒂克斯生物科技公司，
类型：发明
国别省市：CA[加拿大]
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