用于小型宠物的含高浓度人间充质干细胞分泌物的修复注射液及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种用于小型宠物的含高浓度人间充质干细胞分泌物的修复注射液及其制备方法，采用连续饥饿间充质干细胞的方法，在较短时间内就能得到高浓度的间充质提取物，为间充质干细胞提取物应用提供快捷有效的获得方法。本发明专利技术将细胞进行饥饿培养，使得细胞分泌的各种活性成分的浓度都得到了提高，并且在短时间内使用饥饿上清重复饥饿间充质干细胞，使细胞提取物浓度进一步增加。而高浓度的间充质干细胞提取物为干细胞提取物提供了高效的制备方法。

Repair injection containing high concentration human mesenchymal stem cell secretion for small pets and preparation method thereof

The invention discloses a method for repairing injection with high concentration of human mesenchymal stem cells secretion and preparation method of small pets, with the continuous starvation method of mesenchymal stem cells, can get high concentration of stromal extract in a relatively short period of time, to provide for the mesenchymal stem cell extract application method get fast and effective. The cell culture hunger, the concentration of various ingredients that cells are improved, and repeated starvation of mesenchymal stem cells using the supernatant of starvation in a short period of time, the cell extract concentration increased further. The high concentration of mesenchymal stem cell extracts provided efficient preparation methods for stem cell extracts.

【技术实现步骤摘要】
用于小型宠物的含高浓度人间充质干细胞分泌物的修复注射液及其制备方法
本专利技术涉及干细胞分泌物，尤其是一种用于小型宠物的含高浓度人间充质干细胞分泌物的修复注射液及其制备方法。
技术介绍
间充质干细胞(mesenchymalstemcell，MSC)是干细胞的一种，因能分化为间质组织而得名。MSC来源于中胚层间充质，主要存在于生物体全身结缔组织和器官间质中。间充质干细胞广泛分布于胎儿和成体的骨髓、脂肪、脐带、脐带血中，其中脐带来源的间充质干细胞质量高，纯净，数量多。间充质干细胞具有干细胞的共性，即自我更新、多向分化、组织修复、免疫调节和归巢的能力。间充质干细胞具有亚全能分化潜能，在特定的体内、外环境下能够诱导分化成为神经、心脏、肝脏、骨、软骨、肌腱、脂肪、上皮等多种组织细胞。间充质干细胞在体外培养过程中可分泌内皮细胞生长因子(VEGF)、干细胞生长因子(SCF)、成纤维细胞生长因子(FGF)、表皮细胞生长因子(EGF)、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、巨噬细胞击落刺激因子(M-CSF)、白细胞介素(IL)等多种细胞因子，发挥重要的旁分泌作用，并可产生一系列细胞外基质分子如粘连蛋白、层本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于小型宠物的含高浓度人间充质干细胞分泌物的修复注射液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)人间充质干细胞培养：从细胞库中选取P2‑P6的人间充质干细胞复苏，接种批次记为第一批次、第二批次、第三批次，接种密度分别为最大融合度的50％‑60％、35％‑45％、20％‑30％；细胞接种完成，放于二氧化碳培养箱培养，温度37℃，二氧化碳体积比浓度5％；(2)第一批次细胞融合度达到70％‑80％时，以生理盐水清洗细胞2次，用复方电解质注射液进行饥饿培养；(3)饥饿培养12‑24小时后，第一批次细胞融合度达90％‑95％，收取细胞培养上清，3000‑4500g条件下离心5‑8min除去沉淀，取...

【技术特征摘要】
1.一种用于小型宠物的含高浓度人间充质干细胞分泌物的修复注射液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)人间充质干细胞培养：从细胞库中选取P2-P6的人间充质干细胞复苏，接种批次记为第一批次、第二批次、第三批次，接种密度分别为最大融合度的50％-60％、35％-45％、20％-30％；细胞接种完成，放于二氧化碳培养箱培养，温度37℃，二氧化碳体积比浓度5％；(2)第一批次细胞融合度达到70％-80％时，以生理盐水清洗细胞2次，用复方电解质注射液进行饥饿培养；(3)饥饿培养12-24小时后，第一批次细胞融合度达90％-95％，收取细胞培养上清，3000-4500g条件下离心5-8min除去沉淀，取离心后上清备用；(4)取培养的第二批次细胞，当细胞融合度达到70％-80％，以生理盐水清洗第二批次细胞2次，用步骤(3)中细胞培养上清进行饥饿培养；(5)饥饿培养12-24小时后，第二批次细胞融合度达90％-95％，收取细胞培养上清，3000...

【专利技术属性】
技术研发人员：高婧彧，张冰晶，鲁振宇，韩洪起，秦臻，熊亮，徐悦，黄文敬，
申请(专利权)人：天津普瑞赛尔生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：天津,12