用于筛选强迁移能力的脐带间充质干细胞的流式试剂盒制造技术

本发明专利技术涉及一种用于筛选具有较强迁移能力的脐带间充质干细胞的流式检测试剂盒，试剂盒组成包括：标准直径微球、PE‑CD105、APC‑CD73、FITC‑CD90、PerCP‑Cy5.5‑CD166、FITC‑CD11b、PE‑CD34、PE‑CD45、PE‑CD19、PE‑CD80、PE‑CD86、FITC‑HLA‑DR及相应的同型对照抗体。本发明专利技术通过设置标准“Gate”和增加检测CD166使检测结果直接与细胞制剂的迁移能力与有效性相关联；本发明专利技术确保多种免疫排斥相关的细胞表面标志物如CD80\CD86为阴性，从而保证临床患者人身安全；本发明专利技术减少了检测细胞表面标志物的过程中对细胞样本的消耗量。

【技术实现步骤摘要】
用于筛选强迁移能力的脐带间充质干细胞的流式试剂盒
本专利主要用于脐带间充质干细胞制剂的质量控制，并可为相关研究提供评估细胞迁移能力的方法，尤其是一种用于筛选强迁移能力的脐带间充质干细胞的流式试剂盒。
技术介绍
脐带间充质干细胞(UC-MSC,umbilicalcordmesenchymalstemcells)是间充质干细胞家族的重要成员，属于多能干细胞。脐带间充质干细胞具有较高的分化潜能，可向软骨、脂肪、内皮等多个方向分化，并具有一定的免疫调控作用，此外，UC-MSC与广为人知的骨髓间充质干细胞(BM-MSC，bonemarrowmesenchymalstemcells)相比，具有来源丰富、制备简单等优点。目前，UC-MSC制剂在骨关节疾病、神经退行性疾病、糖尿病等疾病的治疗中均展现出良好的临床应用前景，CFDA也于2015年8月21日发布了《干细胞制剂质量控制及临床前研究指导原则》。根据《干细胞制剂质量控制及临床前研究指导原则》中“干细胞制剂的质量控制—干细胞制剂的检验—细胞检验”所述，应对细胞表面标志物进行纯度检测，以确保干细胞治疗的安全性和有效性。然而，实践表明通过流式细胞术检本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于筛选强迁移能力的脐带间充质干细胞的流式试剂盒，其特征在于：试剂盒组成：具体说明如下：⑴Standard Mixture：将ZPH‑MMA30K型30微米标准微球溶于1.5mL蒸馏水，与F‑13838型15微米标准微球相混合，超声处理30s后振荡混匀，存放于4℃条件下，得到Standard Mixture；⑵Isotype Mixture：将350μL的PE‑IgG1k抗体、250μL的APC‑IgG1k抗体、1150μL的FITC‑IgG1k抗体、250μL的PerCP‑Cy5.5‑IgG1k抗体相混合，避光存放于4℃条件下，得到Isotype Mixture；⑶Positive Mi...

【技术特征摘要】
1.一种用于筛选强迁移能力的脐带间充质干细胞的流式试剂盒，其特征在于：试剂盒组成：具体说明如下：⑴StandardMixture：将ZPH-MMA30K型30微米标准微球溶于1.5mL蒸馏水，与F-13838型15微米标准微球相混合，超声处理30s后振荡混匀，存放于4℃条件下，得到StandardMixture；⑵IsotypeMixture：将350μL的PE-IgG1k抗体、250μL的APC-IgG1k抗体、1150μL的FITC-IgG1k抗体、250μL的PerCP-Cy5.5-IgG1k抗体相混合，避光存放于4℃条件下，得到IsotypeMixture；⑶PositiveMixture：将295μL的PE-CD105抗体、295μL的APC-CD73抗体、115μL的FITC-CD90抗体、295μL的PerCP-Cy5.5-CD166抗体相混合，避光存放于4℃条件下，得到PositiveMixture；⑷NegativeMixture：将240μL的FITC-CD11b抗体、952μL的PE-CD34/FITC-HLA-DR抗体、952μL的PE-CD45抗体、952μL的PE-CD19抗体、952μL的PE-CD8...

【专利技术属性】
技术研发人员：张硕，马洁，
申请(专利权)人：天津市康婷生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：天津,12