一种载药纳米脂质体、制备方法及用途技术

一种载药纳米脂质体、制备方法及用途。本发明专利技术涉及纳米脂质体合成与治疗领域，具体涉及了一种共载PEG-C16-ceramide和阿霉素的纳米脂质体及其制备方法，还涉及其在肿瘤治疗领域的应用。本发明专利技术构建了一种共载PEG-C16-ceramide和阿霉素的纳米脂质体（Lipo-ADR-Cer），公开了Lipo-ADR-Cer的制备方法和稳定性，未改变脂质体的基本表征、体外释放过程及体外细胞转染内吞效率。在肿瘤耐药细胞株上，本发明专利技术的Lipo-ADR-Cer的体外细胞毒性、体外促凋亡能力增强以及体内治疗效果增强。本发明专利技术实现了ceramide和ADR的共载，可以降低耐药细胞对于阿霉素的IC50，可用于治疗耐药的肿瘤细胞。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及医药
，更具体地，本专利技术公开了一种共载PEG-C16-ceramide和阿 霉素的纳米脂质体及其制备方法，及其在肿瘤治疗领域的应用。
技术介绍
多药耐药（multidrug resistance，MDR)，是指由一种化疗药物诱发，同时对其他作 用机理不同的多种抗肿瘤药物均具有耐药性的耐药现象，成为临床上导致化疗失败和 肿瘤复发的重要原因。多药耐药的形成机制复杂，影响因素众多，涉及了细胞膜、细胞 质到细胞核的多个方面，而且这些影响因素可能联合在多药耐药的形成中起作用。据 文献报道，肿瘤细胞内ceramide含量的下降是肿瘤细胞耐药的一个重要机制（J. Liu. Foroozesh. A review of ceramide analogs as potential anticancer agents. Future Med Chem，2013,5(12):1405-1421; N. Bartke. Hannun. Bioactive sphingolipids: metabolism and function. J Lipid Res，2009, 50 Suppl(S91-S96))。 Ceramide，作为鞘磷脂代谢的分子核心，是具有细胞毒性的脂质成分。Ceramide在 细胞内的来源途径主要有三条：从头合成途径，鞘磷脂酶途径，外源性ceramide的重循环 再利用途径（N. Bartke. Hannun. Bioactive sphingolipids: metabolism and function. J Lipid Res, 2009, 50 Suppl (S91-S96))。多种化疗药物，包括阿霉素（ADR)可以通过从头 合成途径或者鞘磷脂酶途径增加 ceramide,从而引起胞内ceramide的聚集。由于ceramide 的增加而产生ADR诱导的毒性反应。 细胞内ceramide含量的下降是由于ceramide降解酶如糖基化ceramide合酶 (GCS)的过表达和内质网转运的抑制。糖基化ceramide合酶（GCS)的功能是催化ceramide 转变为GluCer，降低了细胞内ceramide的含量。与对应的肿瘤敏感细胞株相比较，在多种 耐药细胞株上过表达GCS蛋白，胞内ceramide下降，这可以限制ceramide相关毒性反应的 发生。 Ceramide激活化疗药物引起的细胞死亡信号中占据重要地位，胞内ceramide含 量的下降使得化疗药物的毒性反应下降，ceramide的降解被抑制后使得化疗药物的毒性反 应增加。因此，外源性ceramide与化疗药物联合给药可能为克服MDR增加可能性，带来新 的希望。 目前一些研究已经利用ceramide和化疗药物联合给药来克服卵巢癌MDR (van Vlerken LEL Modulation of intracellular ceramide using polymeric nanoparticles to overcome multidrug resistance in cancer. Cancer Res，2007,67(10):4843-4850 ; Devalapally HI. Paclitaxel and ceramide co-administration in biodegradable polymeric nanoparticulate delivery system to overcome drug resistance in ovarian cancer. Int J Cancer·，2007, 121 (8): 1830-1838)。在这些联合给药的治疗中， ceramide和化疗药物均以单独的形式。单药的给药形式简单而且便利，而共载的方式即 两种药物在同一纳米药物中比如纳米脂质体更容易吸收。与单独的给药形式相比较，本发 明中的ceramide和化疗药物ADR共载的治疗方式具备两方面的优势。首先，通过一种纳 米药物共载两种药物，MDR细胞可以同时得到两种药物的处理。这是由于通过两种单独的 纳米药物处理可能会引起MDR细胞对两种药物暴露异质性，从而降低了联合给药对MDR细 胞的治疗效果。其次，共载的治疗策略降低了两种单独纳米药物药物动力学的相互不良作 用。因此，本专利技术中，利用纳米药物共载ceramide和化疗药物是克服MDR的一条有前景 的月中瘤治疗途径。（Devalapally HI. Paclitaxel and ceramide co-administration in biodegradable polymeric nanoparticulate delivery system to overcome drug resistance in ovarian cancer. Int J Cancer.，2007, 121 (8):1830-1838) 纳米载药系统的应用是肿瘤治疗的一项重要突破，其中纳米脂质体由于具备良好 的生物相容性，良好的药物动力学特征和长循环时间而得到广泛的应用，而且已有脂 质体类型的化疗药物得到了 FDA的批准在临床使用，如阿霉素脂质体（Doxorubicin Liposomal,商品名为Doxil)以及枸橼酸柔红霉素脂质体（DaunoXome)。携载ceramide 的纳米脂质体已经被证实了单独或者联合其他的化疗药物给药均是一个有前景的肿瘤治 疗手段，包括 MDR 肿瘤的克服（Ε· V. Diatlovitskaia. · Bioorg Khim, 1998, 24(10):723-730 ；L. Brizuela, 0. Cuvillier. Biochemical methods for quantifying sphingolipids: ceramide, sphingosine, sphingosine kinase-1 activity, and sphingosine-1-phosphate· Methods Mol Biol,2012, 874(1-20))〇 当 前的石开究已经（Khazanov El. Physicochemical and biological characterization of ceramide-containing liposomes: paving the way to ceramide therapeutic application. Langmuir. 2008 Jun 1;24(13) :6965-80.)证实了携载 ceramide 的纳米 脂质体的物理化学特征，一些重要的发现如下：ceramide的头部羟基簇修饰少，PP值大 于13,使得ceramide不容易与磷脂类分子相混合，引起了混合结构的不稳定。为克服携 载ceramide的纳米脂质体的不稳定性，具有锥形结构且PP值约0.5的1，2 -二硬脂 酰-sn-甘油基-3 -磷酸乙醇胺 (PEG-DSPE)，被用来构建携 载ceramide的纳米脂质体。加入PEG-DSPE后，携载ceramide的纳米脂质体展示了更好的 稳定性。 综上本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种载药纳米脂质体，其特征在于，所述纳米脂质体中共载ceramide及化疗药物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：钱卫珠，
申请(专利权)人：上海张江生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31