含有蛋白质的药物制剂制造技术

本发明专利技术提供的一种含有蛋白质的药物制剂，所述药物制剂包含有效剂量的抗PD‑1抗体或其抗原结合片段、缓冲液、稳定剂及表面活性剂。

Pharmaceutical preparations containing protein

【技术实现步骤摘要】
含有蛋白质的药物制剂
本专利技术属于生物
，具体地本专利技术涉及含有蛋白质的药物制剂，更具体地涉及一种稳定的含有抗PD-1抗体及其抗原结合片段的药物制剂。
技术介绍
程序性细胞死亡蛋白1(PD-1：ProgrammedCellDeathProtein1，也称为CD279)是表达于活化的T细胞和前B细胞(pro-Bcells)上的一种细胞表面受体，是一种免疫检查点蛋白，对免疫系统有负调控作用，通过抑制T细胞炎性活动促进自身耐受，更具体而言，PD-1通过促进淋巴结中抗原特异性T细胞的凋亡和降低调节性T细胞的凋亡的双重机制防止自身免疫的发生，但也可以阻止免疫系统杀死癌细胞。癌细胞的“免疫逃逸”被认为是肿瘤发生、发展和抗药的主要机制。肿瘤可通过直接或间接抑制T细胞的信号来保护自己躲过免疫系统的清除。肿瘤的免疫检查点疗法(immunechenkpointtherapy)是一类通过共抑制或共刺激信号等一系列途径调节T细胞活性来提高抗肿瘤免疫应答的治疗方法。PD-1可与2种配体结合(B7家族成员PD-L1和PD-L2)。在小鼠上，PD-L1广泛表达于心、肺、胸腺、脾、肾等多种器官上，以及几乎所有的小鼠肿瘤细胞系，并在多种人类肿瘤细胞上高表达；而PD-L2的表达较为局限，主要是树突状细胞和少数肿瘤细胞系。因此，PD-1及其配体PD-L1成为抗肿瘤免疫治疗的靶点。程序性细胞死亡蛋白-1(programmeddeath-1，PD-1)及其配体(PD-L1)抑制剂，是免疫检查点疗法的主要药物，其应答之广度、深度、和持久性均十分罕见，是近年来肿瘤免疫疗法研究的热点。目前已上市的纳武单抗(nivolumab)和帕博利珠单抗(pembrolizumab)属于PD-1抑制剂，主要用于黑素瘤、非小细胞肺癌、肾细胞癌、膀胱癌、霍奇金淋巴瘤、尿路上皮癌、微卫星高不稳定性癌等恶性肿瘤的治疗。PD-1抑制剂(抗PD-1抗体)是一类阻断PD-1的药物，激活免疫系统攻击肿瘤，并用于治疗某些类型的癌症。不同的抗体药物，要保持其在冻融、储存、运输等过程中的稳定性，需要有不同的溶剂环境，即使相同靶点的抗体药物，由于抗体氨基酸序列以及翻译后修饰的不同，其需要的制剂配方也不相同。
技术实现思路
本专利技术提供了一种含有蛋白质的药物制剂，更具体地提供了一种稳定的含有抗PD-1抗体及其抗原结合片段的药物制剂。本专利技术提供的一种含有蛋白质的药物制剂，其特征在于，所述药物制剂包含有效剂量的抗PD-1抗体或其抗原结合片段、缓冲液、稳定剂及表面活性剂，所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段具有SEQIDNO：1(重链CDR1)、SEQIDNO：2(重链CDR2)、SEQIDNO：3(重链CDR3)的重链可变区和含有SEQIDNO：4(轻链CDR1)、SEQIDNO：5(轻链CDR2)和SEQIDNO：6(轻链CDR3)的轻链可变区。如上所述的含有蛋白质的药物制剂，其特征在于，所述有效剂量的抗PD-1抗体具有SEQIDNO：8所示的重链氨基酸序列、具有SEQIDNO：10所示的轻链氨基酸序列。如上所述的含有蛋白质的药物制剂，其特征在于，所述药物制剂中含有1～20g/L的有效剂量的抗PD-1抗体或其抗原结合片段。如上所述的含有蛋白质的药物制剂，其特征在于，所述药物制剂中含有10g/L的有效剂量的抗PD-1抗体。如上所述的含有蛋白质的药物制剂，其特征在于，所述缓冲液为0～20mM/L的组氨酸缓冲液。如上所述的含有蛋白质的药物制剂，其特征在于，所述缓冲液为20mM/L的组氨酸-盐酸缓冲液。如上所述的含有蛋白质的药物制剂，其特征在于，所述的稳定剂为0～80g/L的海藻糖。如上所述的含有蛋白质的药物制剂，其特征在于，所述的稳定剂为40g/L的海藻糖。如上所述的含有蛋白质的药物制剂，其特征在于，所述的表面活性剂为0～2g/L的聚山梨酯20。如上所述的含有蛋白质的药物制剂，其特征在于，所述的表面活性剂为0.5g/L的聚山梨酯20。如上所述的含有蛋白质的药物制剂，其特征在于，所述的药物制剂pH值为5.8～6.5。如上所述的含有蛋白质的药物制剂，其特征在于，所述的药物制剂pH值为6.0。如上所述的含有蛋白质的药物制剂，在制备用于改变受试者免疫应答的药物中的应用。如上所述的含有蛋白质的药物制剂，在制备用于抑制肿瘤细胞生长的药物中的应用。蛋白质药物制剂的稳定性会因其所包含的蛋白质性质的不同而不同，本专利技术所述的稳定的含蛋白质的药物制剂也适用于抗PD-1抗体及其抗原结合片段的蛋白质药物制剂。优选实施例所述的抗PD-1抗体具有SEQIDNO：8所述重链氨基酸序列、具有SEQIDNO：10所述轻链氨基酸序列。优选实施例中所述抗PD-1抗体表达后，其蛋白质的结构与现有抗PD-1抗体的蛋白质结构不同，经优选实施例中所述的制备方法获得的抗PD-1抗体，其Fc端不具有糖基化，与现有的抗PD-1抗体相比较，优选实施例中制备方法所述获得的抗PD-1抗的疏水性较强。因此，本专利技术优选实施例中所述的抗-PD-1抗体的稳定蛋白质制剂要求不同于现有制剂。抗体结构中所具有的糖基化，在临床用药过程中，会造成不良反应，会引起超敏反应等副作用。为减少临床用药过程中不必要的副作用，对抗体进行糖基化改造是必然的，为糖基化改造后的具有治疗作用的抗体提供一种稳定的药物制剂更是必要的。本专利技术的一个优选实施例，提供了一种用于不含糖基化的抗PD-1抗体的稳定的蛋白质药物制剂。优选实施例所述的抗PD-1抗体具有SEQIDNO：8所述重链氨基酸序列、具有SEQIDNO：10所述轻链氨基酸序列。优选实施例中所述抗PD-1抗体表达后，其蛋白质的结构与现有抗PD-1抗体的蛋白质结构不同，因此，本专利技术优选实施例中所述的抗-PD-1抗体的稳定蛋白质制剂要求不同于现有制剂。优选实施例中所述抗PD-1抗体的Fc端不具有糖基化，较现有的抗PD-1抗体具有较强的疏水性。抗体中所具有的糖基化在临床用药过程中，会造成不良反应，引起超敏反应等。因此，对于抗体的糖基化改造的抗体，提供一种稳定的药物制剂是必要的。本专利技术的优选实施例，提供了一种用于不含糖基化的抗PD-1抗体的稳定的蛋白质制剂。本专利技术经过多次、多参数条件筛选，确认可能的制剂处方条件(辅料添加、pH等)，最终获得优选的抗PD-1抗体的制剂配方。在优选实施例中，含具有治疗作用的蛋白质抗PD-1抗体的药物制剂，优选稳定的制剂组成为含有治疗作用的蛋白抗PD-1抗体10g/L，20mM/L组氨酸-盐酸缓冲液，海藻糖40g/L，聚山梨酯20为0.5g/L，pH值为6.0。制剂配方筛选依托于多种评估手段，进行全面的评估，使用的评估手段包括：冻融试验、影响因素(光照、高温)等试验，评估使用的检测方法包括：SEC/IEX/CE/LC-MSSubunit/粒度分布/DSC分析等，通过综合评估，平衡各指标参数，最终确认配方的组分及条件以及各组分的量，同时为各条件的范本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种含有蛋白质的药物制剂，其特征在于，所述药物制剂包含有效剂量的抗PD-1抗体或其抗原结合片段、缓冲液、稳定剂及表面活性剂， 所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段具有SEQ ID NO：1（重链CDR1）、SEQ ID NO：2（重链CDR2）、SEQ ID NO：3（重链CDR3）的重链可变区和含有SEQ ID NO：4（轻链CDR1）、SEQ ID NO：5（轻链CDR2）和SEQ ID NO：6（轻链CDR3）的轻链可变区。/n

【技术特征摘要】
1.一种含有蛋白质的药物制剂，其特征在于，所述药物制剂包含有效剂量的抗PD-1抗体或其抗原结合片段、缓冲液、稳定剂及表面活性剂，所述抗PD-1抗体或其抗原结合片段具有SEQIDNO：1（重链CDR1）、SEQIDNO：2（重链CDR2）、SEQIDNO：3（重链CDR3）的重链可变区和含有SEQIDNO：4（轻链CDR1）、SEQIDNO：5（轻链CDR2）和SEQIDNO：6（轻链CDR3）的轻链可变区。


2.根据权利要求1所述的含有蛋白质的药物制剂，其特征在于，所述有效剂量的抗PD-1抗体具有SEQIDNO：8所示的重链氨基酸序列、具有SEQIDNO：10所示的轻链氨基酸序列。


3.根据权利要求1所述的含有蛋白质的药物制剂，其特征在于，所述药物制剂中含有1～20g/L的有效剂量的抗PD-1抗体或其抗原结合片段。


4.根据权利要求2、3所述的含有蛋白质的药物制剂，其特征在于，所述药物制剂中含有10g/L的有效剂量的抗PD-1抗体。


5.根据权利要求1所述的含有蛋白质的药物制剂，其特征在于，所述缓冲液为0～20mM/L的组氨酸缓冲液。


6.根据权利要求5所述的含有蛋白质的药物制剂，其特征在于，所述缓冲液为20mM/L的组氨酸-盐酸缓冲液。


7.根据权利要求1所述的含有蛋白...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭怀祖，徐进，曹嘉伟，
申请(专利权)人：上海张江生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31