一种聚乙二醇‑藤黄酸脂质体和制备方法及其在治疗恶性肿瘤中的应用技术

本发明专利技术公开了一种聚乙二醇‑藤黄酸脂质体，该脂质体由聚乙二醇‑藤黄酸共轭物、聚乙二醇、维生素E、胆固醇和磷脂组成，所述聚乙二醇‑藤黄酸共轭物、聚乙二醇、维生素E、胆固醇和磷脂的重量比为1‑10:0.5‑2:0.05‑0.2:1‑4:10‑30。本发明专利技术将两亲性聚合物PEG与抗肿瘤药物藤黄酸用酯键连接成共轭物两亲性的PEG‑GA，通过将PEG‑GA插入脂质体双分子层,构建纳米靶向药物递送系统，不仅能改善药物的水溶性，同时能增强药物的稳定性和抗肿瘤作用，降低药物在正常组织的蓄积,延长荷瘤小鼠的存活时间，改善其治疗功效和减少毒副作用。本发明专利技术同时提供了该脂质体的制备方法及其应用，所述脂质体可应用于治疗肺癌、卵巢癌、乳腺癌、大肠癌、黑色素瘤、头颈部癌、淋巴瘤或脑瘤。

A polyethylene glycol gambogic acid liposome and preparation method and application in the treatment of malignant tumor

The invention discloses a polyethylene glycol gambogic acid liposomes, the liposomes by polyethylene glycol gambogic acid conjugates, polyethylene glycol, vitamin E, cholesterol and phospholipids, the polyethylene glycol gambogic acid conjugates, polyethylene glycol, vitamin E, cholesterol and phospholipids of the weight ratio of 1 10:0.5 2:0.05 0.2:1 4:10 30. The invention of the two amphiphilic polymer PEG and antitumor drug gambogic acid conjugates connected into two amphipathic PEG GA with ester bond, the PEG GA into the liposome bilayer nano targeted drug delivery system, not only can improve the water solubility of the drug, also can enhance the stability of the drug and the anti tumor effect, reduce drug accumulation in normal tissue, prolong the survival time of tumor bearing mice, improve treatment efficacy and reduce toxicity. The invention also provides the preparation method and the application of the liposome, and the liposome can be used for treating lung cancer, ovarian cancer, breast cancer, colorectal cancer, melanoma, head and neck cancer, lymphoma or brain tumors.

【技术实现步骤摘要】
一种聚乙二醇-藤黄酸脂质体和制备方法及其在治疗恶性肿瘤中的应用
本专利技术涉及药物制剂领域，特别涉及一种聚乙二醇-藤黄酸脂质体和制备方法及其在治疗恶性肿瘤中的应用。
技术介绍
天然产物及其衍生物在人类健康与医药发展方面扮演着越来越重要的作用，藤黄（gamboge）：为藤黄科植物藤黄树GarciniahanbaryiHook.f.分泌的干燥树脂。其主产于柬埔寨、印度、泰国和越南，我国广东省和海南省均有栽培。祖国医学对其早有记载，藤黄性寒，味酸、辛、涩，有毒，具破血散结、解毒、止血、杀虫之功效，自古以来就被用于治疗瘰疬、痈疸、疖肿等顽疾。藤黄在国外常被用作利尿剂，治疗水肿和脑出血时的血压升高，现已收载于《美国药典》第10版。藤黄酸（GambogicAcid,GA）：是中药藤黄中提取的有效成分，为广谱抗肿瘤药物，对于多数肿瘤细胞都具有抑制作用，有研究表明藤黄酸对人肝癌细胞株SMMC-7721和QGY-7701的增殖有明显的剂量依赖性抑制作用，而对正常人肝组织细胞株L-02作用相对较弱。藤黄酸还可明显抑制人胃腺癌细胞株SGC-7901的增殖。藤黄酸抗肿瘤作用机制是多方面的，包括诱导肿瘤细胞凋亡、抑制细胞周期、影响癌基因和抑癌基因及其相关蛋白的表达等，此外藤黄酸还具有抑制肿瘤细胞转移的功能，这些是目前化疗药物所不能同时具备的。藤黄酸溶解度差，生物利用度低，半衰期短（犬体内T1/2＜1h，大鼠体内T1/2＜20min），同时游离的藤黄酸具有一定的血管刺激、消化道副作用等毒性，在临床试用时容易引发给药部位的静脉炎，在动物实验中也表现了一定的致死毒性或使动物出现竖毛、体重减轻等，大大限制了藤黄酸的应用，在一定程度上也限制了藤黄酸更出色的治疗效果。故有必要对藤黄酸开展结构修饰或新剂型的研究。目前临床使用的藤黄酸常以注射剂为主，由于藤黄酸水溶性很差，现有报道的藤黄酸原料主要是使用硼砂溶液溶解配制的，该方法稳定性差，临床使用不安全。为增强藤黄酸的片剂、胶囊剂、口服液、颗粒剂以及注射剂等多种剂型开发的可行性，需要解决藤黄酸溶解度差这一问题。已有研究表明在藤黄酸原料药中加入L-精氨酸、葡甲胺、赖氨酸等助溶剂或者聚氧乙烯蓖麻油、聚山梨酯等增溶剂制备藤黄酸溶液可显著改善其溶解度和稳定性，适用于各种剂型的开发；而通过直接添加L-精氨酸或者联合使用L-精氨酸、葡甲胺、赖氨酸等作为助溶剂均可制备藤黄酸的冻干制剂，这对于藤黄酸的注射剂研究极为重要。但是长期使用这些助溶剂或增溶剂，可能引起一系列不良反应，如过敏、心血管毒性、肾毒性、神经毒性等。前药在药物的开发过程中起着重要的角色，其主要目的在于解决母体药物的水溶性问题、延长半衰期、降低药物毒性以及提高药物效果。制备前药的重要手段之一为将化合物与水溶性聚乙二醇（PEG）连接，可大大增加化合物的水溶性，从而引起药物在理化性质、药代动力学及药效学方面的变化。目前采用PEG化成功开发出前药的产品有PEG-紫杉醇、PEG-喜树碱等，PEG化后的前药水溶性大大增加、半衰期延长、毒性降低，活性也有所增加。近年来各种纳米载体包括脂质体，纳米粒及胶束等可以改善化疗药物的溶解性，延长其在体内的半衰期，减少正常细胞对药物的吸收，增加药物在肿瘤细胞中的蓄积,从而达到最大的抗肿瘤疗效和最小的毒副作用。脂质体由于主要成分为磷脂，因而具有高度的生物相容性和较低的生物毒性，能够装载亲水性和疏水性的药物。此外，脂质体强大的优点之一是它的特定用途，如可以通过改变脂质成分或增加功能性的成分来实现长循环或者靶向功能。在过去的几十年中，化疗药物的脂质体剂型在体外实验中取得了显著的成功。本专利的目标主要是将GA先制备成PEG-GA达到增溶的目的，延长药物的半衰期和增强抗肿瘤效果，再将PEG-GA与磷脂分子等组合，利用纳米技术制备载药脂质体，达到增强药物溶解性、增强药物疗效和降低药物毒副作用的目的。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有藤黄酸剂型中所存在的抗肿瘤活性差、血液循环时间短、制剂稳定性差和毒副作用大等上述不足，提供一种聚乙二醇-藤黄酸脂质体，该脂质体具有优异的水溶性，能够增强药物的稳定性和抗肿瘤作用，大幅降低药物的毒副作用，延长荷瘤小鼠的生存期。为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供了以下技术方案：一种聚乙二醇-藤黄酸脂质体，该脂质体由聚乙二醇-藤黄酸共轭物、聚乙二醇、维生素E、胆固醇和磷脂组成，所述聚乙二醇-藤黄酸共轭物、聚乙二醇、维生素E、胆固醇和磷脂的重量比为1-10:0.5-2:0.05-0.2:1-4:10-30。申请人经大量研究和实验发现，将聚乙二醇（PEG）与抗肿瘤药物藤黄酸结合成两亲性共轭物即PEG-GA，通过将PEG-GA插入脂质体双分子层,构建纳米靶向药物递送系统，不仅能改善药物的水溶性，同时能增强药物的稳定性和抗肿瘤作用。黑色素瘤和结肠癌移植瘤模型小鼠体内抗肿瘤试验结果显示，聚乙二醇-藤黄酸脂质体有明显的肿瘤生长抑制作用，其抑瘤率高于藤黄酸注射液组；毒性评价实验过程中，模型小鼠均能耐受预定剂量的聚乙二醇-藤黄酸脂质体，未表现出明显的毛发、行为、进食异常等，治疗期间小鼠体重正常增长，证实聚乙二醇-藤黄酸脂质体降低了药物的毒性。在B16抑制瘤模型和C26模型的治疗过程中，生存期实验数据显示，采用聚乙二醇-藤黄酸脂质体进行治疗后，模型小鼠与其他组相比100%存活的生存期明显延长。且聚乙二醇-藤黄酸脂质体组跟生理盐水组情况一样，注射部位的尾静脉和尾部组织一直都未见异常。因此进一步说明了聚乙二醇-藤黄酸脂质体提高了药物的抗癌活性，同时降低了药物的毒副作用。藤黄酸的英文名：Gambogicacid；化学名称：1,5-亚甲基-1H，3H，11H-呋喃并（3,4-g）吡喃并（3,2-b）呫吨-1-巴豆酸，3a，4,5,7-四氢-8-羟基-α，3,3,11-四甲基-13-（3-甲基-2-丁烯基）-11-（4-甲基-3-戊烯基）-7,15-二氧代，分子量：628.7512，分子式：C38H44O8其中聚乙二醇-藤黄酸共轭物（PEG-GA）的结构如下式所示：优选地，聚乙二醇-藤黄酸共轭物、聚乙二醇、维生素E、胆固醇和磷脂的重量比为2:1:0.2:4:15。通过进一步优选脂质体原料的配伍比例，本专利技术的聚乙二醇-藤黄酸脂质体水溶性、稳定性和抗肿瘤活性得到进一步优化。优选地，聚乙二醇-藤黄酸共轭物由甲氧基聚乙二醇一端的羟基和藤黄酸C-30位羧基通过酯键连接形成。优选地，甲氧基聚乙二醇包括甲氧基聚乙二醇1000、甲氧基聚乙二醇2000、甲氧基聚乙二醇4000、甲氧基聚乙二醇6000和甲氧基聚乙二醇8000中的一种或几种。优选地，磷脂包括大豆磷脂、二月桂酰卵磷脂、二肉豆蔻酰卵磷脂、二棕榈酰卵磷脂、二硬脂酰卵磷脂、二硬脂酰卵磷脂、蛋黄卵磷脂、氢化豆磷脂、二油酰基卵磷脂、二月桂酰磷脂酰甘油、二棕榈脂酰甘油、二硬脂酰磷脂酰甘油、二油酰磷脂酰甘油和二肉豆蔻酰磷脂酸中的一种或几种。本专利技术的另一目的在于提供上述聚乙二醇-藤黄酸脂质体的制备方法，一种聚乙二醇-藤黄酸脂质体的制备方法，包括以下步骤：S1将聚乙二醇-藤黄酸共轭物、聚乙二醇、维生素E、胆固醇和磷脂溶解于乙醇中形成有机相，加热至40-60℃；S2将上述有机相通过针管泵注入水相中形成含醇脂本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种聚乙二醇‑藤黄酸脂质体，其特征在于，该脂质体由聚乙二醇‑藤黄酸共轭物、聚乙二醇、维生素E、胆固醇和磷脂组成，所述聚乙二醇‑藤黄酸共轭物、聚乙二醇、维生素E、胆固醇和磷脂的重量比为1‑10:0.5‑2:0.05‑0.2:1‑4:10‑30。

【技术特征摘要】
1.一种聚乙二醇-藤黄酸脂质体，其特征在于，该脂质体由聚乙二醇-藤黄酸共轭物、聚乙二醇、维生素E、胆固醇和磷脂组成，所述聚乙二醇-藤黄酸共轭物、聚乙二醇、维生素E、胆固醇和磷脂的重量比为1-10:0.5-2:0.05-0.2:1-4:10-30。2.根据权利要求1所述的聚乙二醇-藤黄酸脂质体，其特征在于，所述聚乙二醇-藤黄酸共轭物、聚乙二醇、维生素E、胆固醇和磷脂的重量比为2:1:0.2:4:15。3.根据权利要求1或2所述的聚乙二醇-藤黄酸脂质体，其特征在于，所述聚乙二醇-藤黄酸共轭物由甲氧基聚乙二醇一端的羟基和藤黄酸C-30位羧基通过酯键连接形成。4.根据权利要求3所述的聚乙二醇-藤黄酸脂质体，其特征在于，所述甲氧基聚乙二醇包括甲氧基聚乙二醇1000、甲氧基聚乙二醇2000、甲氧基聚乙二醇4000、甲氧基聚乙二醇6000和甲氧基聚乙二醇8000中的一种或几种。5.根据权利要求1所述的聚乙二醇-藤黄酸脂质体，其特征在于，所述磷脂包括大豆磷脂、二月桂酰卵磷脂、二肉豆蔻酰卵磷脂、二棕榈酰卵磷脂、二硬脂酰卵磷脂、二硬脂酰卵磷脂、蛋黄卵磷脂、氢化豆磷脂、二油酰基卵磷脂、二月桂酰磷脂酰甘油、二棕榈脂酰甘油、二硬脂酰磷脂酰甘油、二油酰磷脂酰甘油和二肉豆蔻酰磷脂酸中的一种或几种。6.一种制备权利要求1-5所述的聚乙二醇-藤黄酸脂质...

【专利技术属性】
技术研发人员：蔡璐璐，白皎皎，杨艳雪，钟建，王岩，
申请(专利权)人：四川省人民医院，
类型：发明
国别省市：四川,51