新颖乳酸菌及其于免疫调节及抗发炎的应用制造技术

技术编号:12033158 阅读:125 留言:0更新日期:2015-09-10 21:32
本发明专利技术涉及新颖乳酸菌及其于免疫调节及抗发炎的应用。本发明专利技术提供一种具免疫调节及抗发炎活性的新颖乳酸菌株(LAB)及包含其及使用其的组合物。投予本发明专利技术的LAB可调节免疫反应以恢复或预防由慢性发炎引起的代谢疾病。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术系关于一种益生菌新颖的乳酸菌及包含彼的组合物。特定言之,本专利技术关 于一种新的乳酸菌及其于增强免疫调节及抗发炎活性的用途。
技术介绍
发酵食品产品含有各种有用的细菌,包括乳酸菌(lactic acid bacteria ;LAB)。 LAB的各种菌株可用于制造发酵食品,包括牛奶,面包,蔬菜和其他可食用的植物材料。LAB 是一群革兰氏阳性菌,一般用于生产发酵食品。LAB的膳食和临床应用的优点已被广泛研 宄。LAB已被用作保存食物的发酵剂,采用其下列优点:低pH值及发酵活性期间产生能抑 制腐败菌的生长的发酵产物的作用。为此,LAB已被用于制备各种不同的食品,如奶酪,酸 奶和其他发酵乳制品。LAB已被发现摄入后呈现出对人类及动物有价值的特性,吸引了大量 的关注。特别是,乳杆菌属(Lactobacillus)或双歧杆菌属(Bifidobacterium)的特定菌 株已被发现能够定殖于肠道粘膜,并协助维持人类和动物的健康。抗发炎活性和免疫调节 活性是众所周知的LAB的特性。 W097/00078揭露一特定菌株,命名为乳酸杆菌GG(ATCC53103),其为一种益生菌。 W097/00078中的微生物特别用于预防或治疗食物诱发过敏反应的一种方法。US 8, 361,481 提供一种具有抗过敏活性的乳酸菌,其为乳酸菌副干酪乳杆菌K71菌株(Lactobacillus paracasei K71strain),该菌株已寄存于 National Institute of Advanced Industrial Science and Technology, International Patent Organism Depositary,寄存编号为 FERM BP-11098。L.Zhang等人报导鼠李糖乳杆菌GG在减少发炎的效果(Journal of Pediatric Gastroenterology and Nutrition,vol.42,no.5,pp. 45 - 52, 2006)。此外,数 篇先前技艺文献已报导乳酸菌抑制前发炎细胞激素 (proinflammatory cytokine)的表达 (例如,World Journal of Gastroenterology,vol. 16, no. 33, PP. 4145 - 4151,2010 ;and International Immunopharmacology, vol. 8, no. 4, pp. 574 - 580, 2008)〇 在 LPS 处理的 RAW 264. 7 细胞中,胚芽乳酸杆菌 KFCC11389P(Lactobacillus plantarum KFCC11389P)的生长代谢产物抑制TNF-α和IL-6的产生。在RAW264.7细胞 中,胚芽乳酸杆菌10hk2 (Lactobacillus plantarum 10hk2)已经显示出通过提高前发炎介 质,如介白素_1β (IL-Ιβ),IL-6和TNF-α,及抗发炎介白素-IO(IL-IO),呈现抗发炎效 果。 然而,由于不同菌株的特性与能力,LAB的效果是可变的。因此,仍有必要发展具 优异免疫调节和抗发炎活性的LAB。
技术实现思路
本专利技术提供一种具免疫调节即抗发炎活性的新颖LAB,及一种包含其的组合物与 使用其的方法。本专利技术LAB可被投予以调节免疫反应,恢复或预防由慢行发炎引起的代谢 疾病。 本专利技术提供一种分离的LAB,其为胚芽乳酸杆菌胚芽亚种(Lactobaci I Ius plantarum subsp. plantarum),具有含有分别为下列 SEQ ID NO: 1 及 SEQ IDN0:2 所 示核酸序列的16S rRNA基因及pheS基因。在一具体实施例,本专利技术的LAB是胚芽乳 酸杆菌胚芽亚种 K21,寄存于 DSMZ-DEUTSCHE SAMMLUNG VON MIKROORGANISMEN UND ZELLKULTUREN (DSMZ),寄存编号为保藏号 DSM 27444。 胚芽乳酸杆菌胚芽亚种K21 (K21)为分离自福菜(台湾传统发酵食物)的益生菌 株。K21的16S rRNA基因与pheS基因序列显示与胚芽乳酸杆菌胚芽亚种具高度相似性,但 与其不同。结果,K21代表一种新的胚芽乳酸杆菌胚芽亚种菌株。K21对TNF-α及前列腺素 E2(PGE2)的产生呈现显著抑制,因此Κ21呈现抗发炎活性。Κ21在活体内减少前发炎细胞激 素如TNF-α、IL-10及IL-6的产生。另外,Κ21在活体内降低TNF-α、环加氧酶-2(C0X-2)、 类Toll受体4(TLR4)及细胞激素信号3抑制子(S0CS3)的mRNA表达量。 本专利技术也提供一种组合物,包含本专利技术的LAB及视需要的可食用载剂。在另一方 面,本专利技术提供一种增强免疫调节及/或抗发炎活性的方法,包括将该LAB或本专利技术的组合 物投予受试者。【附图说明】 图1为一套电泳照片,显示三个胚芽乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum)菌株的RAH)概况。泳道M,Ikb的DNA梯;1,胚芽乳酸杆菌胚芽亚种 K21 (Lactobacillus plantarum subsp. plantarum K21) ;2,胚芽乳酸杆菌亚种胚芽杆菌 ATCC14917T(Lactobacillus plantarum subsp. plantarum ATCC 14917) ;3,胚芽乳酸安式 亚种 ATCCl7638T (Lactobacillus plantarum subsp. argentoratensis ATCC 17638T) 〇 图2显示正常的RAW 264. 7细胞、LPS处理(20小时,600ng/mL)的RAW 264. 7细 胞及LPS处理(20小时,600ng/mL)与热灭活K21 (IX 106CFU)共处理的RAW264. 7细胞中, TNF-α及PGE2的产生。 图3显示评出健康对照组(健康)、UC对照组(UC)及K21组的结肠蛋白质的MPO 活性。数据表示为平均值土标准偏差,其中每组n = 6只小鼠。当p〈0.05(*),K21和UC 组间的差异视为统计上显著。 图4(A)~(C)表示在UC小鼠模型中,相较于健康对照组与UC对照组,活的 1(21(1\1090?仍口服给药对在结肠的总蛋白中的了即-€ [仏)、11^1|3出)及11^6(0的影 响。 图5表示在UC小鼠模型中,相较于UC对照组对对结肠中的TNF- a、C0X-2、TLR4 与S0CS3的mRNA表达量的影响。使用实时PCR检测mRNA的表达量。【具体实施方式】 本专利技术令人惊讶地发现一种具有免疫调节及抗发炎活性的新颖LAB菌株。本专利技术 的LAB可给药用于调节免疫反应以恢复或预防由慢性发炎引起的代谢疾病。 用语"益生微生物"(probiotic)在本领域中为微生物,当适量给予,提供健康益处 予宿主。益生微生物(益生菌)必须符合无毒性,活性,附着力及有益效果的数个要求。此 等益生菌特征为应变依赖性,即使为相同菌种中的细菌。 如本文所使用,用语"医药上可接受的"是指化合物、材料、组合物及/本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种分离的乳酸菌(LAB),其为胚芽乳酸杆菌胚芽亚种(Lactobacillus plantarum subsp.plantarum),具有含有分别为SEQ ID NO:1及SEQ ID NO:2所示核酸序列的16S rRNA基因及pheS基因。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员:蔡英杰吴健诚廖坚甫
申请(专利权)人:联亚益生生物科技股份有限公司
类型:发明
国别省市:塞舌尔;SC

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