7-N3-布雷菲德菌素A及其1,2,3-三氮唑类衍生物的制备与抗肿瘤应用制造技术

本发明专利技术涉及一类具有抗肿瘤活性的7-N3-布雷菲德菌素A及其1,2,3-三氮唑类化合物的制备与应用。本发明专利技术提供的新化合物对肝癌、肺癌、乳腺癌、肾癌、结肠癌和前列腺癌有高效的疗效，在体外检测有效抑制率高达80％；获得本发明专利技术7-N3-布雷菲德菌素A和7-N3-布雷菲德菌素A的1,2,3-三氮唑类化合物的方法简单，易于操作。

【技术实现步骤摘要】
7-N3-布雷菲德菌素A及其1,2,3-三氮唑类衍生物的制备与抗肿瘤应用(一)
本专利技术涉及一类具有抗肿瘤活性的7-N3-布雷菲德菌素A及其1,2,3-三氮唑类化合物的制备与应用。(二)
技术介绍
布雷菲德菌素A((+)BrefeldinA，简称BFA)是一种天然的大环内酯类抗生素，是Ascomycetes的二级代谢产物，又称斜卧菌素或壳二孢。1958年Singleton等人首次从Penicilliumdecumbens发酵液中分离得到。1971年，BFA的完全构型由X射线晶体结构分析得到确定。布雷菲德菌素A分子式C16H24O4，分子量280Da，分子结构含有5个手性中心，2个双键，1个五元碳环和1个13元大环内酯，结构如下式I所示：布雷菲德菌素A具有多种生物活性，包括抗真菌、抗病毒、抗线虫、抗有丝分裂，并且发现它对多种癌细胞具有高活性抑制作用(GI50＝0.04μM)。目前，布雷菲德菌素A作为一种重要的分子工具广泛应用于哺乳动物信号传导途径的研究。由于其生物功能的多样性和高效的抗癌生物活性，美国肿瘤研究院(NCI)将BFA作为抗肿瘤药物的重点研究，作为新型抗癌候选药物。但是，布雷菲德菌素A因其自身的药代动力学性质(生物利用度低、水溶性差、血浆半衰期短等)不理想，无法作为抗肿瘤治疗试剂应用于临床。为了克服这些缺陷对BFA的结构修饰及衍生物研究逐渐受到重视，希望能寻找到既保持BFA高活性抗肿瘤作用又适合作为药物用于临床的化合物。1,2,3-三氮唑类(1,2,3-triazole)是一类非常重要的五元芳香氮杂环化合物，在代谢转化过程、氧化还原反应中、不同酸碱环境及热条件下均具有相当强的稳定性。1,2,3-三氮唑是,在生物体内易与多种酶和受体结合，表现出多种不同的生物活性，如抗肿瘤、抗菌、抗心血管病、抗病毒等。1,2,3-三氮唑化合物在药物的结构改造中可以通过1,2,3-三唑环引入先导化合物或候选药物以提高或改变药理活性，从而药效更好的药物。目前，1,2,3-三氮唑化合物在医药领域新药研发和应用中发挥越来越重要的作用，已经设计合成了多种进入临床试验或用于临床治疗的1,2,3-三氮唑类药物。设计合成一系列新型高效的含三氮唑类的化合物对于医药的研发具有重要的现实意义。(三)
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一类具有明显抗肿瘤活性的7-N3-布雷菲德菌素A及其1,2,3-三氮唑类衍生物，对肺癌细胞(A549)，乳腺癌细胞(MCF-7)，肝癌细胞(HePG-2)有效抑制，GI50值高达76.5nM，以及一种简便的7-N3(1,2,3-三氮唑)修饰的布雷菲德菌素A衍生物的制备方法。本专利技术采用的技术方案是：一类7-N3-布雷菲德菌素A的1,2,3-三氮唑类化合物，其结构如式a所示：式a中，R为以下式A～式F所示的取代基之一式A中，R1为H、甲基、氯、三氟甲基、三氟甲氧基、氟、乙氧基、羟基或CHO；优选R1为H、甲基、CHO或F；式B中，R2为H、2-甲基、4-甲基、3-甲基、4-氯、2-氟、4-氟、4-乙氧基、2-三氟甲氧基、4-三氟甲氧基、4-三氟甲基、2-三氟甲基、2-氯、2-异丙基、2-甲氧基、3-甲氧基、4-甲氧基或3-羟基；优选R2为H、4-甲基、4-氯、4-氟、4-乙氧基、4-三氟甲氧基、2-氯、2-异丙基或3-羟基；式D中，R3为H、甲基、氯、三氟甲基、三氟甲氧基、氟、乙氧基、或羟基；优选为R3为H或Cl；式E中，R4为H、2-甲基、4-甲基、3-甲基、4-氯、2-氟、4-氟、4-乙氧基、2-三氟甲氧基、4-三氟甲氧基、4-三氟甲基、2-三氟甲基、2-氯、2-异丙基、2-甲氧基、3-甲氧基、4-甲氧基或3-羟基；优选R4为H、4-F、2-Cl、2-异丙基、4-三氟甲氧基或4-乙氧基。式F也可简写为Fmoc为芴甲氧羰基(英文名9-Fluorenylmethoxycarbonyl)的简写。Mtr是4-甲氧基-2,3,6-三甲基苯磺酰基(英文(4-methoxy-2,3,6-trimethylphenyl)sulfonyl)的简写。均为本领域公知的取代基团。所述式A到式F中，波浪线用来表示取代基的取代位置，不代表实际原子。所述7-N3-布雷菲德菌素A的1,2,3-三氮唑类化合物优选为下列化合物之一：所述7-N3-布雷菲德菌素A的1,2,3-三氮唑类化合物更优选为化合物a-2、a-8、a-14、a-15、a-20或a-23。本专利技术还涉及所述7-N3-布雷菲德菌素A的1,2,3-三氮唑类化合物的制备方法，所述方法为：将式II所示的7-N3-布雷菲德菌素A溶于反应溶剂中，依次加入五水硫酸铜和抗坏血酸,搅拌溶解后加入式III所示的炔，常温搅拌反应，TLC跟踪检测至反应结束，所得反应液c分离纯化得到式a所示7-N3-布雷菲德菌素A的1,2,3-三氮唑类化合物。所述方法的反应式如下所示：式III中，R为以下式A～式F所示的取代基之一式A中，R1为H、甲基、氯、三氟甲基、三氟甲氧基、氟、乙氧基、羟基或CHO；优选R1为H、甲基、CHO或F；式B中，R2为H、2-甲基、4-甲基、3-甲基、4-氯、2-氟、4-氟、4-乙氧基、2-三氟甲氧基、4-三氟甲氧基、4-三氟甲基、2-三氟甲基、2-氯、2-异丙基、2-甲氧基、3-甲氧基、4-甲氧基或3-羟基；优选R2为H、4-甲基、4-氯、4-氟、4-乙氧基、4-三氟甲氧基、2-氯、2-异丙基或3-羟基；式D中，R3为H、甲基、氯、三氟甲基、三氟甲氧基、氟、乙氧基、或羟基；优选为R3为H或Cl；式E中，R4为H、2-甲基、4-甲基、3-甲基、4-氯、2-氟、4-氟、4-乙氧基、2-三氟甲氧基、4-三氟甲氧基、4-三氟甲基、2-三氟甲基、2-氯、2-异丙基、2-甲氧基、3-甲氧基、4-甲氧基或3-羟基；优选R4为H、4-F、2-Cl、2-异丙基、4-三氟甲氧基或4-乙氧基。所述式II所示的7-N3-布雷菲德菌素A、式III所示的炔的物质的量之比优选为1：1.2～1.5。所述反应溶剂为下列之一或两种以上的混合：N,N-二甲基甲酰胺、二氯甲烷(简称D)、乙酸乙酯(简称E)、氯仿、四氢呋喃、正己烷、环己烷、石油醚(简称P)、吡啶、水。所述反应溶剂优选为四氢呋喃和水体积比1：1的混合。所述反应溶剂的体积用量一般以式II所示的7-N3-布雷菲德菌素A的质量计为50～200mL/g。所述五水硫酸酮(CuSO4.5H20)、抗坏血酸(Vc)的物质的量之比为1：0.5～2，优选1：1.5。所述式II所示的7-N3-布雷菲德菌素A、五水硫酸铜的物质的量之比优选为1：0.1～0.15。更具体的，所述式II所示的7-N3-布雷菲德菌素A、式III所示的炔、CuSO4.5H20、Vc物质的量之比优选为1:1.5:0.1:0.15。所述反应优选在常温下进行，所述反应通过TLC跟踪检测判断反应终止，反应时间通常为6～10h，优选6h。所述反应液c分离纯化的步骤优选为：反应液c浓缩后用二氯甲烷萃取，合并有机相、水洗后经无水硫酸钠干燥、过滤，滤液浓缩除去有机溶剂，得到粗产品经薄层层析分离纯化，展开剂为乙酸乙酯、石油醚体积比5：1的混合溶剂，Rf＝0.2～0.4，制得式a所示7-N3-布雷菲德菌素A的1,2,3本文档来自技高网...

【技术保护点】
一类7‑N3‑布雷菲德菌素A的1,2,3‑三氮唑类化合物，其结构如式a所示：式a中，R为以下式A～式F所示的取代基之一式A中，R1为H、甲基、氯、三氟甲基、三氟甲氧基、氟、乙氧基、羟基或CHO；式B中，R2为H、2‑甲基、4‑甲基、3‑甲基、4‑氯、2‑氟、4‑氟、4‑乙氧基、2‑三氟甲氧基、4‑三氟甲氧基、4‑三氟甲基、2‑三氟甲基、2‑氯、2，4‑二氯、2‑异丙基、2‑甲氧基、3‑甲氧基、4‑甲氧基、或3‑羟基；式D中，R3为H、甲基、氯、三氟甲基、三氟甲氧基、氟、乙氧基、或羟基；式E中，R4为H、2‑甲基、4‑甲基、3‑甲基、4‑氯、2‑氟、4‑氟、4‑乙氧基、2‑三氟甲氧基、4‑三氟甲氧基、4‑三氟甲基、2‑三氟甲基、2‑氯、2，4‑二氯、2‑异丙基、2‑甲氧基、3‑甲氧基、4‑甲氧基、或3‑羟基。

【技术特征摘要】
1.一类7-N3-布雷菲德菌素A的1,2,3-三氮唑类化合物，其结构如式a所示：式a中，R为以下式A～式H所示的取代基之一式A中，R1为H、甲基、氯、三氟甲基、三氟甲氧基、氟、乙氧基、羟基或CHO；式B中，R2为H、2-甲基、4-甲基、3-甲基、4-氯、2-氟、4-氟、4-乙氧基、2-三氟甲氧基、4-三氟甲氧基、4-三氟甲基、2-三氟甲基、2-氯、2-异丙基、2-甲氧基、3-甲氧基、4-甲氧基、或3-羟基；式D中，R3为H、甲基、氯、三氟甲基、三氟甲氧基、氟、乙氧基、或羟基；式E中，R4为H、2-甲基、4-甲基、3-甲基、4-氯、2-氟、4-氟、4-乙氧基、2-三氟甲氧基、4-三氟甲氧基、4-三氟甲基、2-三氟甲基、2-氯、2-异丙基、2-甲氧基、3-甲氧基、4-甲氧基、或3-羟基。2.如权利要求1所述的7-N3布雷菲德菌素A的1,2,3-三氮唑类化合物，其特征在于所述化合物为下列化合物之一：3.如权利要求1所述的7-N3布雷菲德菌素A的1,2,3-三氮唑类化合物的制备方法，其特征在于所述方法为：将式II所示的7-N3-布雷菲德菌素A溶于反应溶剂中，依次加入五水硫酸铜和抗坏血酸,搅拌溶解后加入式III所示的炔，常温搅拌反应，TLC跟踪检测至反应结束，所得反应液c分离纯化得到式a所示的7-N3布雷菲德菌素A的1,2,3-三氮唑类化合物；式III中，R为以下式A～式H所示的取代基之一式A中，R1为H、甲基、氯、三氟甲基、三氟甲氧基、氟、乙氧基、羟基或CHO；式B中，R2为H、2-甲基、4-甲基、3-甲基、4-氯、2-氟、4-氟、4-乙氧基、2-三氟甲氧基、4-三氟甲氧基、4-三氟甲基、2-三氟甲基、2-氯、2-异丙基、2-甲氧基、3-甲氧基、4-甲氧基、或3-羟基；式D中，R3为H、甲基、氯、三氟甲基、三氟甲氧基、氟、乙氧基、或羟基；式E中，R4为H、2-甲基、4-甲基、3-甲基、4-氯、2-氟、4-氟、4-乙氧基、2-三氟甲氧基、4-三氟甲氧基、4-三氟甲基、2-三氟甲基、2-氯、2-异丙基、2-甲...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱勍，张海峰，郑裕国，王亚军，
申请(专利权)人：浙江工业大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33