一种利用拉沙里菌素发酵液制备拉沙里菌素的方法技术

本发明专利技术涉及一种利用拉沙里菌素发酵液制备拉沙里菌素的方法，工艺步骤为：首先将拉沙里菌素发酵液进行预处理，然后采用有机溶剂浸提，萃取、反萃取，吸附和结晶，得到拉沙里菌素。本发明专利技术该方法实现了发酵液中拉沙里菌素有效分离和纯化，有效含量达到98%，提取总收率达到了80%以上，产品质量符合相关兽药典质量标准，同时本发明专利技术工艺简单，生产周期短，生产成本低，有利于提高拉沙里菌素国际市场竞争力。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于抗生素提取
，特别是涉及一种利用拉沙里菌素发酵液制备拉沙里菌素的方法。
技术介绍
拉沙里菌素是由Streptomyceslasaliensis菌种发酵产生的一种聚醚类抗生素，它可使孢子和裂殖体膨胀而杀死球虫，故又称离子载体型抗球虫药物。拉沙里菌素和其他化学合成的抗球虫药无交叉耐药性，除有效防治畜禽球虫病之外，还广泛用于牛的饲料添加剂，具有促生长、提高饲料利用率、改善繁殖性能、预防多种代谢性疾病的作用。目前，国内尚无拉沙里菌素提取工艺报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种工艺简单，生产周期短，生产成本低，且提取收率高，产品有效含量高的利用拉沙里菌素发酵液制备拉沙里菌素的方法。为实现上述目的所采取的技术方案为：一种利用拉沙里菌素发酵液制备拉沙里菌素的方法，其特征在于其工艺步骤为：首先将拉沙里菌素发酵液进行预处理，然后采用有机溶剂A混合液进行浸提，所得拉沙里菌素有机溶液再经纯化水萃取、有机溶剂B反萃取后，再用树脂吸附，结晶得到拉沙里菌素；所述预处理是指将拉沙里菌素发酵液调节pH10-11，充分搅拌后静置，板框过滤，水顶洗，干燥得到干菌渣；所述有机溶剂A混合液为异辛烷或三甲基戊烷或庚烷与甲醇的混合液，其中甲醇含量8-10%；所述有机溶剂B是醋酸丁酯或乙酸乙酯。所述预处理过程中，搅拌时间60-80min，静置时间40-60min，饮用水顶洗15-35min。所述预处理过程中，干燥采用微波干燥，控制微波频率为800-900MH，干燥后的物质水分＜2%。所述采用有机溶剂A混合液进行浸提过程为：在预处理后的干菌渣中加入有机溶剂A混合液，在搅拌转速40-60r/min下浸提200-240min，然后过滤即可。所述有机溶剂A混合液的用量为：V有机溶剂A混合液:M菌渣=2-3L:1kg。所述纯化水萃取过程为：在拉沙里菌素有机溶液中加入纯化水，在搅拌转速70-90r/min，温度35-40℃，pH9-10条件下，搅拌40-60min，然后静置120-150min，分层，得到拉沙里菌素水溶液，其中V纯化水:V拉沙利菌素有机溶液=3-5L:1L。所述有机溶剂B反萃取过程为：在萃取溶液中加入有机溶剂B，在搅拌转速70-90r/min，温度45-50℃，pH2-3条件下，搅拌40-60min，然后静置150-180min，分层即可，其中有机溶剂B用量为：V纯化水:V有机溶剂B=1-2L:1L。所述树脂吸附过程中，树脂柱径高比为1:8-9，流速控制在15-17ml/min，吸附剂为聚丙烯酰胺，其用量：M吸附剂(kg)=（发酵效价×发酵液体积）/1000×0.7。所述结晶过程为：将树脂吸附后的拉沙里菌素有机溶液升温至75-85℃，在压力-0.1MPa-0.05MPa下回收有机溶剂，即可。调整pH用碱液或酸液，所述碱液为质量浓度为30-40%的氢氧化钠或碳酸钠或氨水，所述酸液为质量浓度为20-40%的硫酸或盐酸。本专利技术实现了发酵液中拉沙里菌素有效分离和纯化，产品有效含量达到98%，提取总收率达到了80%以上，产品质量符合相关兽药典质量标准，同时本专利技术工艺简单，生产周期短，生产成本低，有利于提高拉沙里菌素国际市场竞争力。具体实施方法下面用实例予以说明本专利技术，应该理解的是，实例是用于说明本专利技术而不是对本专利技术的限制。本专利技术的范围与核心内容依据权利要求书加以确定。下述实施例中的拉沙里菌素发酵液来源：拉沙里菌素生产采用专有的拉沙里链霉菌为产生菌，以油、淀粉、黄豆饼粉、酵母粉等原材料配制成培养液，经三级发酵生物合成拉沙里菌素。实施例1拉沙里菌素发酵液10m3，效价为25203ug/ml，发酵总亿为252.03。发酵液预处理：拉沙里菌素发酵液中加入30%氢氧化钠溶液，pH调节至10，搅拌60min，然后静置40min，经板框过滤得到拉沙里菌素湿菌渣，采用饮用水顶洗15min，微波干燥，频率为800MH，干燥结束，菌渣重量为2.1吨，水分含量为1.8%。有机溶剂浸提：干菌渣中加入混合有机溶剂异辛烷（甲醇含量为8%）4.2m3，搅拌转速控制在40r/min，时间为200min，然后过滤得到拉沙里菌素有机溶液4.1m3。萃取：拉沙里菌素有机溶液中加入纯化水12.3m3，搅拌转速控制70r/min，温度控制在35℃，30%氢氧化钠调节pH至9，继续搅拌40min，静置120min，然后分层，得到拉沙里菌素水溶液12.2m3。反萃取：拉沙里菌素水溶液中加入有机溶剂醋酸丁酯12.2m3，搅拌转速控制70r/min，温度控制在45℃，20%硫酸溶液调节pH至2，继续搅拌40min，静置150min，然后分层，得到拉沙里菌素有机溶液12m3。吸附：树脂柱中加入固定相吸附剂聚丙烯酰胺，总量为176.4kg,树脂柱径高比为1:8，拉沙里菌素有机溶液加入树脂柱，流动相为有机溶剂醋酸丁酯，流动相的流速控制在15ml/min。吸附工艺结束，收集拉沙里菌素有机溶液9.3m3，化学效价为22060ug/ml。结晶是指拉沙里菌素有机溶液升温至75℃，压力控制在-0.05MPa，回收有机溶剂。结晶结束，得到拉沙里菌素220.59kg，含量为98.2%，收率为81.4%。实施例2拉沙里菌素发酵液10m3，效价为25186ug/ml，发酵总亿为251.86。发酵液预处理：拉沙里菌素发酵液中加入33%碳酸钠溶液，pH调节至10.2，搅拌65min，然后静置45min，经板框过滤得到拉沙里菌素湿菌渣，采用饮用水顶洗20min，微波干燥，频率为830MH，干燥结束，菌渣重量为2吨，水分含量为1.6%。有机溶剂浸提：干菌渣中加入混合有机溶剂三甲基戊烷（甲醇含量为8.5%）4.6m3，搅拌转速控制在45r/min，时间为210min，然后过滤得到拉沙里菌素有机溶液4.5m3。萃取：拉沙里菌素有机溶液中加入纯化水15.8m3，搅拌转速控制75r/min，温度控制在36℃，33%碳酸钠调节pH至9.2，继续搅拌45min，静置130min，然后分层，得到拉沙里菌素水溶液15.7m3。反萃取：拉沙里菌素水溶液中加入有机溶剂乙酸乙酯12.1m3，搅拌转速控制75r/min，温度控制在46℃，25%盐酸溶液调节pH至2.3，继续搅拌45min，静置160min，然后分层，得到拉沙里菌素有机溶液12m3。吸附：树脂柱中加入固定相吸附剂聚丙烯酰胺，总量为176.3kg,树脂柱径高比为1:8.2，拉沙里菌素有机溶液加入树脂柱，流动相为有机溶剂乙酸乙酯，流动相的流速控制在15.5ml/min。吸附工艺结束，收集拉沙里菌素有机溶液9.4m3，化学效价为21945ug/ml。结晶是指拉沙里菌素有机溶液升温至78℃，压力控制在-0.06MPa，回收有机溶剂。结晶结束，得到拉沙里菌素206.27kg，含量为98.4%，收率为81.9%。实施例3拉沙里菌素发酵液10m3，效价为25064ug/ml，发酵总亿为250.64。发酵液预处理：拉沙里菌素发酵液中加入35%氨水溶液，pH调节至10.5，搅拌70min，然后静置50min，经板框过滤得到拉沙里菌素湿菌渣，采用饮用水顶洗25min，微波干燥，频率为850MH，干燥结束，菌渣重量为1.95吨，水分含量为1本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种利用拉沙里菌素发酵液制备拉沙里菌素的方法，其特征在于其工艺步骤为：首先将拉沙里菌素发酵液进行预处理，然后采用有机溶剂A混合液进行浸提，所得拉沙里菌素有机溶液再经纯化水萃取、有机溶剂B反萃取后，再用树脂吸附，结晶得到拉沙里菌素；所述预处理是指将拉沙里菌素发酵液调节 pH10‑11，充分搅拌后静置，板框过滤，水顶洗，干燥得到干菌渣；所述有机溶剂A混合液为异辛烷或三甲基戊烷或庚烷与甲醇的混合液，其中甲醇含量8‑10%；所述有机溶剂B是醋酸丁酯或乙酸乙酯。

【技术特征摘要】
1.一种利用拉沙里菌素发酵液制备拉沙里菌素的方法，其特征在于其工艺步骤为：首先将拉沙里菌素发酵液进行预处理，然后采用有机溶剂A混合液进行浸提，所得拉沙里菌素有机溶液再经纯化水萃取、有机溶剂B反萃取后，再用树脂吸附，结晶得到拉沙里菌素；所述预处理是指将拉沙里菌素发酵液调节pH10-11，充分搅拌后静置，板框过滤，水顶洗，干燥得到干菌渣；所述有机溶剂A混合液为异辛烷或三甲基戊烷或庚烷与甲醇的混合液，其中甲醇含量8-10%；所述有机溶剂B是醋酸丁酯或乙酸乙酯。2.按照权利要求1所述的利用拉沙里菌素发酵液制备拉沙里菌素的方法，其特征在于所述预处理过程中，搅拌时间60-80min，静置时间40-60min，饮用水顶洗15-35min。3.按照权利要求1所述的利用拉沙里菌素发酵液制备拉沙里菌素的方法，其特征在于所述预处理过程中，干燥采用微波干燥，控制微波频率为800-900MH，干燥后的物质水分＜2%。4.按照权利要求1所述的利用拉沙里菌素发酵液制备拉沙里菌素的方法，其特征在于所述采用有机溶剂A混合液进行浸提过程为：在预处理后的干菌渣中加入有机溶剂A混合液，在搅拌转速40-60r/min下浸提200-240min，然后过滤即可。5.按照权利要求1或4所述的利用拉沙里菌素发酵液制备拉沙里菌素的方法，其特征在于所述有机溶剂A混合液的用量为：V有机溶剂A混合液:M菌渣=2-3L:1kg。6.按照权利要求1所述的利用拉沙里菌素发酵液制备拉沙里菌素的方法，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：任勇，
申请(专利权)人：宁夏泰瑞制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：宁夏;64