一种含有多醚链二氢吡啶类衍生物及其制备和应用制造技术

本发明专利技术公开了一种含有多醚链二氢吡啶类衍生物。其具有式I所示的结构式。含有多醚链二氢吡啶类衍生物在pH值4‑9条件下，与一氧化氮反应，得到吡啶衍生物，在紫外光照射下产生荧光，可定量检测，具有检测快速、高效、灵敏、化学性质稳定等优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于药物化学
，具体涉及一种含有多醚链二氢吡啶类衍生物及其制备和应用。
技术介绍
一氧化氮是生物体内一种重要的信使分子，参与体内多种生命活动。1987年，科学家研究发现一氧化氮是内皮衍生松弛因子，在心血管系统中起着调控血管松弛的作用。已有证据显示，一氧化氮在生物体的其他系统中也发挥着重要的作用，比如其在大脑中起着信号传导的作用，在免疫系统中具有防御细菌攻击和防止感染等作用。因此，一氧化氮成为生物学、医学、药理学等领域研究的热点之一。一氧化氮是一种气体自由基，在生物体内极不稳定，使得生物体内一氧化氮的检测方法成为相关领域的研究热点和难点，因而，建立一种快速、高效、准确、灵敏的一氧化氮检测方法尤为重要。荧光光度法检测一氧化氮主要是基于荧光探针与一氧化氮的特异性反应，生成强荧光的物质。目前应用最为广泛的一氧化氮荧光探针是邻苯二胺类，但其稳定性差，使其应用受到限制。本领域技术人员仍致力于开发一种检测快速、高效、灵敏的一氧化氮荧光探针。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种含有多醚链二氢吡啶类衍生物。本专利技术的目的还在于提供上述含有多醚链二氢吡啶类衍生物的制备方法及其在制备荧光探针中的应用。一种含有多醚链二氢吡啶类衍生物，具有式I所示的结构式：式中，R为甲基，乙基，异丙基或丙基；R’为甲基，乙基，异丙基或丙基；n＝2-6。优选的，所述含有多醚链二氢吡啶类衍生物如式Ⅱ所所示：制备上述含有多醚链二氢吡啶类衍生物的方法，按照如下步骤进行：1)以7-羟基-4-甲基香豆素为起始原料，在7-位引入甲基；2)将4-位氧化成醛；3)利用Hantzsch反应引入1,4-二氢吡啶结构单元。以式Ⅱ化合物为例，其合成路线为：上述含有多醚链二氢吡啶类衍生物在制备一氧化氮检测荧光探针中的应用，其特征在于，所述含有多醚链二氢吡啶类衍生物在pH值4-9条件下，与一氧化氮反应，得到吡啶衍生物，在紫外光照射下产生荧光。所述反应是在溶剂中进行，所述溶剂选自二甲基亚砜、二氯甲烷、乙醇、甲醇、乙腈中的一种。合成得到的4d与一氧化氮的反应为：与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：本专利技术的含有多醚链二氢吡啶类衍生物，与一氧化氮反应，生成荧光物质，在紫外线照射下可定量检测，具有检测快速、高效、灵敏、化学性质稳定等优点。附图说明图1为化合物4d与NO作用前后的紫外吸收光谱(c＝5μM)。图2为化合物4d与NO作用前后的荧光光谱(c＝5μM)。图3为化合物4d细胞内NO的细胞显像实验：明场(上)，对应的荧光(下)(左)细胞在含有探针的培养基培养8h(右)细胞先在LPS的培养基先培养4h，后加入探针培养8h。图4为化合物4d及其与NO作用后产物4e对RAW264.7细胞MTT实验。具体实施方式下面结合附图，对本专利技术的具体实施方式进行详细描述，但应当理解本专利技术的保护范围并不受具体实施方式的限制。实施例1：含有多醚链二氢吡啶类衍生物的制备合成路线如下所示：化合物4a的合成将7-羟基-4-甲基香豆素(3.5g，22mmol)用30mL丙酮溶解，加入碳酸钾(6.03g，43.2mmol)，剧烈搅拌30min，加入碘甲烷(3.12g，22mmol)，加热回流，用TLC板检测反应直至反应完全。停止加热，冷却至室温，减压浓缩得白色固体，乙酸乙酯溶解，转移至分液漏斗，饱和盐水洗涤(50mL×3)，有机层用无水硫酸钠干燥，旋蒸除去溶剂得白色固体，乙醇重结晶得化合物4a，3.6g，产率95％。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.50(d,J＝8.8Hz,1H),6.90–6.78(m,2H),6.14(d,J＝1.0Hz,1H),3.88(s,3H).13CNMR(101MHz,DMSO)δ162.30,160.08,154.70,153.35,126.37,113.02,112.02,111.05,100.62,55.85,18.08.ESI-MScalculated189.1,found190.2[M+H]+。化合物的4b合成将(0.95g，5mmol)4a、50mL二甲苯加入圆底烧瓶中，搅拌并加热，使其逐渐溶解。再加入二氧化硒(0.55g，5mmol)，回流反应12h。停止加热，热抽滤，滤液遇冷有黄色固体析出，将滤液减压浓缩得黄色固体4b(0.85g，产率84％)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ10.08(s,1H),8.50(d,J＝9.0Hz,1H),6.93(dd,J＝9.0,2.6Hz,1H),6.87(d,J＝2.6Hz,1H),6.72(s,1H),3.89(s,3H).13CNMR(101MHz,DMSO)δ193.69,162.55,160.36,155.87,143.51,126.87,121.27,112.83,108.16,101.07,55.93.ESI-MScalculated203.2,found204.1[M+H]+。化合物的4b-1合成将乙酰乙酸甲酯(10g，86mmol)、三乙二醇单甲醚(43g，258mmol)、4-二甲氨基吡啶(50mg，0.4mmol)依次加入250mL的圆底烧瓶中，同时加入溶剂甲苯50mL，加热回流搅拌6h，停止加热。将反应液冷却至室温，减压浓缩得黄色油状残留物，柱层析分离(石油醚：丙酮＝1:1)得黄色油状物4b-115g，产率约为70％。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ4.36–4.26(m,2H),3.76–3.69(m,2H),3.66(s,6H),3.56(s,2H),3.48(s,2H),3.38(s,3H),2.27(s,3H).ESI-MScalculated248.1,found271.2[M+Na]+。化合物的4c合成将上述产物4b(1.0g，5mmol)，4b-1(3.7g，15mmol)，溶于20mL乙醇中，搅拌下加入醋酸铵(1.1g，15mmol)，加热回流4h，停止加热，柱层析分离(石油醚：丙酮＝1:1)，得黄色油状物4c，1.2g，产率40％。Mp.88-90℃,1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.21(d,J＝9.0Hz,1H),6.99–6.83(m,2H),6.78(s,1H),6.23(s,1H),5.38(s,1H),4.08-4.12(m,4H),3.87(s,4H),3.50-3.61(m,20H),3.36(s,6H),2.34(s,6H).13CNMR(101MHz,CDCl3)δ166.56,165.28,163.23,162.22,154.83,145.55,127.70,112.09,111.94,111.61,102.45,99.91,71.56,70.20,69.99,68.57,62.63,58.68,55.37,34.46,19.15.HRMScalcdfor[M+H]+C33H46NO13:663.2891,found664.2964.IR(KRr)3336,3232,3086,3053,2879,1720,1691,1616,1496,1386,1274,1193,1095,840,748.化合物4d的合成将产物4c(0.2g，0.33mmol)溶于20mL二氯甲烷中，并加入5mL饱和的亚硝酸钠溶液本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种含有多醚链二氢吡啶类衍生物，其特征在于，具有式I所示的结构式：式中，R为甲基，乙基，异丙基或丙基；R’为甲基，乙基，异丙基或丙基；n＝2‑6。

【技术特征摘要】
1.一种含有多醚链二氢吡啶类衍生物，其特征在于，具有式I所示的结构式：式中，R为甲基，乙基，异丙基或丙基；R’为甲基，乙基，异丙基或丙基；n＝2-6。2.根据权利要求1所述的含有多醚链二氢吡啶类衍生物，其特征在于，所述含有多醚链二氢吡啶类衍生物如式Ⅱ所所示：3.制备权利要求1所述含有多醚链二氢吡啶类衍生物的方法，其特征在于，按照如下步骤进行：1)以7-羟基-4-甲基香豆素为起始原料，在7-位引入甲基；2)将4-位氧化成醛；3)利...

【专利技术属性】
技术研发人员：潘宣，张呈瑞，王慧丽，
申请(专利权)人：山东禾本堂生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37