一种蜗牛资源化制备几丁寡糖的方法技术

本发明专利技术公开了一种蜗牛资源化制备几丁寡糖的方法，使用几丁寡糖制备技术领域。本发明专利技术以青山蜗牛为原料，通过处理制得蜗牛酶混合液与制得的蜗牛壳颗粒混悬液混合，加入醋酸‑醋酸钠缓冲液，振荡反应后，水浴加热，并通过离心分离，干燥结晶，从而得到蜗牛资源化制备几丁寡糖的方法。实例证明，本发明专利技术操作工艺简便，无需特殊仪器，缩短了反应时间，且在制备的过程中无需使用强酸溶剂，降低了成本的同时对于环境无任何污染，最终使得制得的几丁寡糖中无任何残留物，安全环保，提高收率至90％以上，纯度高达95％以上，具有广阔的市场前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术公开了一种蜗牛资源化制备几丁寡糖的方法，使用几丁寡糖制备

技术介绍
几丁质是一种天然无毒性且广泛存在的生物大分子，在虾蟹等甲壳类生物和昆虫的外壳以及大多数真菌的细胞壁内都有发现。其结构类似纤维素，是由β-1，4-糖苷键连接起来的N-乙酰-D-葡萄糖胺直链高聚物，是地球上仅次于植物纤维的第二大生物资源。国际医学营养食品学会将这种物质命名为除糖、蛋白质、脂肪、维生素、矿物质、水和纤维素七大生命要素后的第八大生命要素，越来越受到广泛关注。几丁寡糖为几丁质的降解产物，其结构为聚合度为2～20的β-(1，4)-糖苷键连接的寡聚N-乙酰-D-氨基葡萄糖。研究表明几丁寡糖具有多种生物活性，包括调节免疫、抗菌、止血抗凝、抗肿瘤转移、降低血压、清除自由基等活性，对植物而言，具有诱导抗病性、促进生长、增强植物抗逆(抗旱、抗寒)能力等活性，可以应用于医药、功能食品、食品添加剂、饲料添加剂、生物农药、促植物生长剂、植物抗逆剂等领域，具有广泛的市场前景。目前降解几丁质制备几丁寡糖的方法主要有化学法、物理法和酶解法。其中酶降解几丁聚糖制备几丁寡糖的方法是普遍采用的方法，其过程是将几丁聚糖溶于1％左右的醋酸溶液中，配成1％的几丁聚糖溶液，然后加入由脂肪酶、纤维素酶、壳聚糖酶、菠萝蛋白酶和菌酶等配成的混合蛋白酶，然后再于15℃～60℃条件下反应72-124小时后，取出反应物，然后将反应液经过滤、浓缩、析出、烘干、粉碎制得几丁寡糖，但是现有技术制备几丁寡糖使用强酸溶剂污环境，另外，酶降解法存在的若干问题：（1）反应过程时间较长，反应过程复杂，一般需要100小时以上；（2）质量差，产物中会有一定量的蛋白酶和质子酸残留，对人体有害；（3）收率低，采用酶解法制备几丁寡糖时，反应物中有大量的几丁聚糖无法被降解为几丁寡糖；（4）成本高，一是因为所采用的酶的价格高；二是因为酶解制备几丁寡糖的收率低，从而造成几丁寡糖的制造成本很高。
技术实现思路
本专利技术主要解决的技术问题：针对目前常用的酶解法在制备几丁寡糖的过程中，虽为最普遍采用的方法，但在制备的过程中需要使用强酸溶剂，成本高，污染环境，同时反应时间较长，反应过程复杂，产物中也会含有一定量的蛋白酶和质子酸残留，不仅对人体有害，而且导致收率低的现状，提供了一种以青山蜗牛为原料，通过处理制得蜗牛酶混合液与制得的蜗牛壳颗粒混悬液混合，加入醋酸-醋酸钠缓冲液，振荡反应后，水浴加热，并通过离心分离，干燥结晶，从而得到蜗牛资源化制备几丁寡糖的方法。该方法通过直接提取蜗牛嗦囊、胃部和消化道内存在的蜗牛酶，通过对蜗牛背部壳进行分解从而制备几丁寡糖，大大缩短了反应时间，且在制备的过程中无需使用强酸溶剂，降低了成本的同时对于环境无任何污染，最终使得制得的几丁寡糖中无任何残留物，安全环保，提高收率至90％以上，纯度高达95％以上，具有广阔的市场前景。为了解决上述技术问题，本专利技术所采用的技术方案是：（1）选取新鲜青山蜗牛，将其洗净并饥饿处理3～5天，随后分离蜗牛组织与壳，将壳收集备用后，剔除蜗牛组织中肠道和生殖腺，从头部剪开并分离其嗉囊、胃部和肝脏，用去离子水洗涤并剪碎，制备得蜗牛剪碎组织；（2）按质量比1:5，将上述制备的蜗牛剪碎组织与pH5.5硫酸盐缓冲液搅拌混合，并置于玻璃匀浆器中，在0～5℃下匀浆处理3～5h，待处理完成后，静置3～5h，随后对其抽提并收集滤液，在10000～12000r/min下离心分离10～15min，收集上层清液制备得蜗牛酶混合液，备用；（3）将步骤（1）收集的蜗牛壳洗净，再按质量比1:5，将蜗牛壳与去离子水搅拌混合，用高速组织捣碎机处理25～30min，再在200～300W下超声分散处理10～15min，制备得蜗牛壳颗粒混悬液；（4）按质量比5:1，将步骤（2）制备的蜗牛酶混合液与上述制备的蜗牛壳颗粒混悬液混合并置于烧杯中，在200～300W下超声分散处理10～15min，随后向其中添加pH为4.5～5.0的醋酸-醋酸钠缓冲液，控制添加质量与蜗牛酶混合液质量相同，待添加完成后，在38～42℃下摇床振荡反应1～2h；（5）待摇床振荡处理完成后，将其置于95～100℃下水浴加热5～10min，再在12200～12500r/min下离心分离10～15min，收集上层清液，再在40～50℃下旋转蒸发至干，收集干燥结晶，即可制得一种蜗牛资源化制备的几丁寡糖。本专利技术的应用方法是：将本专利技术制得的几丁寡糖通过制囊机制成几丁寡糖胶囊，其中每个胶囊中含量为0.8～1.2g，食用时，配以200～250mL温开水口服，建议每天三餐后服用，每次服用1～3粒即可，坚持服用15～20天，明显感觉人体抵抗力得到显著提高，尤其是高血压患者，可以使得血压收缩压从150～155mmHg降低到120～125mmHg，舒张压从95～100mmHg降低到75～80mmHg，效果极其显著，具有极好的治疗效果。本专利技术的有益效果是：（1）本专利技术操作工艺简便，无需特殊仪器，缩短了反应时间，且在制备的过程中无需使用强酸溶剂，降低了成本的同时对于环境无任何污染，属于绿色环保工艺；（2）本专利技术最终制得的几丁寡糖中无任何残留物，安全环保，提高收率至90％以上，纯度高达95％以上，具有广阔的市场前景；（3）本专利技术制得的几丁寡糖可广泛应用于医药、农业、食品、化工、能源以及环保等领域。具体实施方式首先选取新鲜青山蜗牛，将其洗净并饥饿处理3～5天，随后分离蜗牛组织与壳，将壳收集备用后，剔除蜗牛组织中肠道和生殖腺，从头部剪开并分离其嗉囊、胃部和肝脏，用去离子水洗涤并剪碎，制备得蜗牛剪碎组织；然后按质量比1:5，将上述制备的蜗牛剪碎组织与pH5.5硫酸盐缓冲液搅拌混合，并置于玻璃匀浆器中，在0～5℃下匀浆处理3～5h，待处理完成后，静置3～5h，随后对其抽提并收集滤液，在10000～12000r/min下离心分离10～15min，收集上层清液制备得蜗牛酶混合液，备用；随后将上述收集的蜗牛壳洗净，再按质量比1:5，将蜗牛壳与去离子水搅拌混合，用高速组织捣碎机处理25～30min，再在200～300W下超声分散处理10～15min，制备得蜗牛壳颗粒混悬液；接下来按质量比5:1，将上述制备的蜗牛酶混合液与上述制备的蜗牛壳颗粒混悬液混合并置于烧杯中，在200～300W下超声分散处理10～15min，随后向其中添加pH为4.5～5.0的醋酸-醋酸钠缓冲液，控制添加质量与蜗牛酶混合液质量相同，待添加完成后，在38～42℃下摇床振荡反应1～2h；最后待摇床振荡处理完成后，将其置于95～100℃下水浴加热5～10min，再在12200～12500r/min下离心分离10～15min，收集上层清液，再在40～50℃下旋转蒸发至干，收集干燥结晶，即可制得一种蜗牛资源化制备的几丁寡糖。实例1首先选取新鲜青山蜗牛，将其洗净并饥饿处理3天，随后分离蜗牛组织与壳，将壳收集备用后，剔除蜗牛组织中肠道和生殖腺，从头部剪开并分离其嗉囊、胃部和肝脏，用去离子水洗涤并剪碎，制备得蜗牛剪碎组织；然后按质量比1:5，将上述制备的蜗牛剪碎组织与pH5.5硫酸盐缓冲液搅拌混合，并置于玻璃匀浆器中，在0℃下匀浆处理3h，待处理完成后，静置3h，随后对其抽提并收集滤液，在1本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种蜗牛资源化制备几丁寡糖的方法，其特征在于具体制备步骤为：（1）选取新鲜青山蜗牛，将其洗净并饥饿处理3～5天，随后分离蜗牛组织与壳，将壳收集备用后，剔除蜗牛组织中肠道和生殖腺，从头部剪开并分离其嗉囊、胃部和肝脏，用去离子水洗涤并剪碎，制备得蜗牛剪碎组织；（2）按质量比1:5，将上述制备的蜗牛剪碎组织与pH5.5硫酸盐缓冲液搅拌混合，并置于玻璃匀浆器中，在0～5℃下匀浆处理3～5h，待处理完成后，静置3～5h，随后对其抽提并收集滤液，在10000～12000r/min下离心分离10～15min，收集上层清液制备得蜗牛酶混合液，备用；（3）将步骤（1）收集的蜗牛壳洗净，再按质量比1:5，将蜗牛壳与去离子水搅拌混合，用高速组织捣碎机处理25～30min，再在200～300W下超声分散处理10～15min，制备得蜗牛壳颗粒混悬液；（4）按质量比5:1，将步骤（2）制备的蜗牛酶混合液与上述制备的蜗牛壳颗粒混悬液混合并置于烧杯中，在200～300W下超声分散处理10～15min，随后向其中添加pH为4.5～5.0的醋酸‑醋酸钠缓冲液，控制添加质量与蜗牛酶混合液质量相同，待添加完成后，在38～42℃下摇床振荡反应1～2h；（5）待摇床振荡处理完成后，将其置于95～100℃下水浴加热5～10min，再在12200～12500r/min下离心分离10～15min，收集上层清液，再在40～50℃下旋转蒸发至干，收集干燥结晶，即可制得一种蜗牛资源化制备的几丁寡糖。...

【技术特征摘要】
1.一种蜗牛资源化制备几丁寡糖的方法，其特征在于具体制备步骤为：（1）选取新鲜青山蜗牛，将其洗净并饥饿处理3～5天，随后分离蜗牛组织与壳，将壳收集备用后，剔除蜗牛组织中肠道和生殖腺，从头部剪开并分离其嗉囊、胃部和肝脏，用去离子水洗涤并剪碎，制备得蜗牛剪碎组织；（2）按质量比1:5，将上述制备的蜗牛剪碎组织与pH5.5硫酸盐缓冲液搅拌混合，并置于玻璃匀浆器中，在0～5℃下匀浆处理3～5h，待处理完成后，静置3～5h，随后对其抽提并收集滤液，在10000～12000r/min下离心分离10～15min，收集上层清液制备得蜗牛酶混合液，备用；（3）将步骤（1）收集的蜗牛壳洗净，再按质量比1:5，将蜗牛壳与去离子水搅拌混合，用高速组织...

【专利技术属性】
技术研发人员：仇颖超，高玉刚，张明，
申请(专利权)人：仇颖超，
类型：发明
国别省市：江苏;32