一种利用重组钝齿棒杆菌生产黑色素的方法技术

一株产酪氨酸酶重组钝齿棒杆菌的构建及其在黑色素生产中的应用，属于基因工程和酶工程领域。本发明专利技术通过本实验室前期筛选得到的被命名为Streptomyces kathirae SC-1的菌株，利用分子技术克隆了以来自Streptomyces kathirae SC-1的酪氨酸酶基因(melC1C2)，构建重组表达载体pXMJ19-melC1C2，并将其电击转化到C.crenatum SYPA5-5，成功构建了基因工程菌C.crenatum SYPA5-5/pXMJ19-melC1C2。对构建的基因工程菌进行酶活测定，发现重组菌的酶活为61.5U/ml，而原始菌株C.crenatum SYPA5-5没有酶活。以L-酪氨酸为底物进行全细胞转化，黑色素产量为3.49g/L。本发明专利技术为首次将酪氨酸酶克隆到重组钝齿棒杆菌并用于黑色素的生产。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种重组表达载体pXMJ19‑melC1C2的构建，其特征是：利用PCR扩增技术中得到来源于Streptomyces kathirae SC‑1的酪氨酸酶基因(melC1C2)的完整表达基因片段，与克隆载体pMD‑18T相连，获得该基因的大量克隆，经双酶切，片段纯化后与表达pXMJ19连接，再转化到大肠杆菌JM109中得到稳定的重组质粒pXMJ19‑melC1C2。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：饶志明，胡桂元，郭静，杨套伟，徐美娟，张显，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32