【技术实现步骤摘要】
本专利技术设计一种双抗体单通道电化学免疫传感器的制备方法及应用。具体是采用Pd二十面体作为连接载体，利用人免疫球蛋白抗体为骨架支撑抗体，来连接乙脑抗体，从而实现对乙脑抗原的特异性检测，属于新型生物传感技术的发展和新型传感方法构建
技术介绍
癌症是一大类恶性肿瘤的统称。在正常人体内，肿瘤标志物的含量低于一定的浓度，但是，肿瘤在发生发展过程中，肿瘤细胞异常表达或宿主细胞对肿瘤反应后产生的某些物质,如肿瘤特异性抗原、某些分化抗原、胚胎抗原、激素等，这些肿瘤标志物的含量会急剧上升，可用于临床某些肿瘤的诊断和辅助诊断。因此，在临床研究上，发展一种快速、简便、灵敏的检测肿瘤标志物方法是十分重要的。电化学免疫传感器具有灵敏度高、选择性好、结构简单、操作简便、易于小型化、可连续、快速自动化检测分析等优点，由其是新型的电化学免疫传感器新技术的发展，突破了传统的传感器构建思路，取得良好的实验结果，对于将来的临床应用，具有很好的导向作用，因此本专利技术构建了一种新型的电化学免疫传感器，利用Pd二十面体交联人免疫球蛋白抗体和乙脑抗体，同时利用Au@GS为基底材料，实现了对乙脑抗原的检测。目前已有的肿瘤标志物的临床检测方法很多，如放射免疫分析、化学发光免疫分析、酶联免疫分析等。免疫传感器是将免疫学方法与分析化学方法相结合的一种生物传感器，通过抗原与抗体之间的特性性结合，使得它具有高灵敏性、高选择性、分析快速和操作简便等优点。
技术实现思路
本专利技术的目的之一是基于Au@GS为基底材料，构建了一种无酶，无标记的...
【技术保护点】
一种双抗体单通道乙脑抗原免疫传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）用Al2O3抛光粉打磨直径为4 mm的玻碳电极，超纯水清洗干净；将6 µL、1.0 ~ 1.6 mg/mL 金杂化改性巯基化石墨烯Au@GS分散液滴加到电极表面，室温下晾干成膜；（2）依次滴加6 µL、1~5 µg/mL的人免疫球蛋白抗体Ab(H)标准溶液，3 µL、质量分数为0.5% ~ 2%的BSA溶液，超纯水洗净，4℃冰箱中晾干；（3）滴加6 µL、1 µg/mL的人免疫球蛋白抗原Ag(H)标准溶液，超纯水冲洗，4℃冰箱中晾干；（4）滴加6 µL的Ab(H)@Ab(E)@Pd双抗体孵化物溶液，超纯水冲洗，4℃冰箱中晾干；（5）滴加6 µL、0.01~5 ng/mL的一系列不同浓度的乙脑抗原Ag(E)标准溶液至电极表面，超纯水冲洗，4℃冰箱中晾干，制得一种双抗体单通道的免疫传感器。
【技术特征摘要】
1.一种双抗体单通道乙脑抗原免疫传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）用Al2O3抛光粉打磨直径为4 mm的玻碳电极，超纯水清洗干净；将6 μL、1.0 ~ 1.6 mg/mL 金杂化改性巯基化石墨烯Au@GS分散液滴加到电极表面，室温下晾干成膜；
（2）依次滴加6 μL、1~5 μg/mL的人免疫球蛋白抗体Ab(H)标准溶液，3 μL、质量分数为0.5% ~ 2%的BSA溶液，超纯水洗净，4℃冰箱中晾干；
（3）滴加6 μL、1 μg/mL的人免疫球蛋白抗原Ag(H)标准溶液，超纯水冲洗，4℃冰箱中晾干；
（4）滴加6 μL的Ab(H)@Ab(E)@Pd双抗体孵化物溶液，超纯水冲洗，4℃冰箱中晾干；
（5）滴加6 μL、0.01~5 ng/mL的一系列不同浓度的乙脑抗原Ag(E)标准溶液至电极表面，超纯水冲洗，4℃冰箱中晾干，制得一种双抗体单通道的免疫传感器。
2.如权利要求1所述的一种双抗体单通道乙脑抗原免疫传感器的制备方法，所述的Au@GS分散液，其特征在于，制备步骤如下：
（1）改性巯基化石墨烯的制备
在磁力搅拌下，将0.1 ~ 0.2 g的氧化石墨烯GO分散于10~20 mL 超纯水中，制得GO水溶液，将0.3 mL的3-巯丙基三乙氧基硅烷MPTES加入到GO水溶液中，超声2 ~ 5 h，在磁力搅拌下，将GO溶液加热到70℃并保温2 ~ 4 h，加入0.1 ~ 0.3 mL、体积分数为80%水合肼，在95℃下保温2 ~ 4 h，离心、真空干燥，制得改性巯基化石墨烯；
（2）金纳米溶液Au的制备
在磁力搅拌下，将1 mL、质量分数为1%的氯金酸加入到100 mL的超纯水中，并加热至沸腾，将2.5 ~ 5 mL、质量分数为1%的柠檬酸钠加入到氯金酸溶液中，继续加热15 ~ 30 min至溶液变红，冷却，制得金纳米溶液Au；
（3）Au@GS分散液的制备
将1 mg的GS加入...
【专利技术属性】
技术研发人员：任祥，闫涛，吴丹，马洪敏，张勇，魏琴，李月云，曹伟，
申请(专利权)人：济南大学，
类型：发明
国别省市：山东;37
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。