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用于获得Nrf1D蛋白抗体的免疫原、Nrf1D蛋白抗体及Elisa检测试剂盒制造技术

技术编号:15421000 阅读:178 留言:0更新日期:2017-05-25 13:24
本发明专利技术提供用于获得Nrf1D蛋白抗体的免疫原、Nrf1D蛋白抗体及Elisa检测试剂盒,所述免疫原为先合成氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的多肽,以Sulfo‑SMCC为偶联剂,将所述多肽与玥孔戚血蓝蛋白偶联得到;所述抗体以所述免疫原为抗原,将所述抗原用弗氏完全佐剂乳化后免疫新西兰白兔,取免疫后的新西兰白兔血进行离心,收集离心后的上清液获得;所述Elisa检测试剂盒组分包括酶标板、包被液、封闭液、酶标二抗、TMB显色液、终止液、检测抗原和所述Nrf1D蛋白抗体,所述检测抗原为合成氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的多肽,以戊二醛为偶联剂,将所述多肽与牛血清白蛋白偶联获得。

【技术实现步骤摘要】
用于获得Nrf1D蛋白抗体的免疫原、Nrf1D蛋白抗体及Elisa检测试剂盒
本专利技术属于抗体
,具体涉及用于获得Nrf1D蛋白抗体的免疫原、Nrf1D蛋白抗体及Elisa检测试剂盒。
技术介绍
CNC-bZIP是bZIP转录因子的一个亚家族,该亚家族以一个大约40个氨基酸同源域为其特征,该区域与N末端的碱性亮氨酸拉链区域紧邻。从进化角度来看,具有这个同源域的蛋白在秀丽隐杆线虫(Skn1)、黑腹果蝇(cap‘n’collar)、鸡(ECH)[63]、小鼠(Bach)和人的发育过程中,都有广泛的参与。在人体内,目前已知的三个成员(NF-E2、TCF11/LCR-F1/Nrf1和Nrf2)以及它们在鼠科动物体内的同源蛋白都已在证明导致β球蛋白基因位点的谱系特异性表达机制的过程中被分离并鉴定。然而,只有NF-E2才有细胞类型的特异性,Nrf1和Nrf2均没有。相应敲除小鼠的数据和之前的研究(Nrf1结合位点在红色的胆色素原脱氨酶基因、血红素加氧酶1(HO1)基因和NAD(P)H:醌氧化还原酶的表达中起着重要的作用)均表明,这些因子广泛的参与哺乳动物的基因调控。研究发现:启动子元件和本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于获得Nrf1D蛋白抗体的免疫原,其特征在于,合成氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的多肽,以Sulfo‑SMCC为偶联剂,将所述多肽与玥孔戚血蓝蛋白偶联,得到所述用于获得Nrf1D蛋白抗体的免疫原。

【技术特征摘要】
1.用于获得Nrf1D蛋白抗体的免疫原,其特征在于,合成氨基酸序列如SEQIDNO.1所示的多肽,以Sulfo-SMCC为偶联剂,将所述多肽与玥孔戚血蓝蛋白偶联,得到所述用于获得Nrf1D蛋白抗体的免疫原。2.Nrf1D蛋白抗体,其特征在于,以权利要求1所述免疫原为抗原,将所述抗原用弗氏完全佐剂乳化后免疫新西兰白兔,取免疫后的新西兰白兔血进行离心,收集离心后的上清液,获得Nrf1D蛋白粗抗体。3.根据权利要求2所述Nrf1D蛋白抗体,其特征在于,将所述抗原用弗氏完全佐剂乳化后分别于第1天、第15天、第29天、第43天和第53天免疫新西兰白兔,获得Nrf1D蛋白粗抗体。4.根据权利要求2所述Nrf1D蛋白抗体,其特征在于,将所述抗原用弗氏完全佐剂乳化后颈背部皮下注射免疫新西兰白兔,每只新西兰白兔至少颈背部皮下注射8点进行免疫。5.根据权利要求2所述Nrf1D蛋白抗体,其特征在于,对所述Nrf1D蛋白粗抗体进行纯化,获得所述Nrf1D蛋白抗体;所述纯化包括如下步骤:将氨基酸序列如SEQIDNO.1的多肽连接到活化的SulfolinkResin上,制备抗原亲和柱,用PBS缓冲液对所述抗原亲和柱进行平衡,将过滤后的Nrf1D蛋白粗抗体过平...

【专利技术属性】
技术研发人员:张义国汪红霞
申请(专利权)人:重庆大学
类型:发明
国别省市:重庆,50

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