抗IL-36R抗体制造技术

本发明专利技术是关于抗IL-36R结合化合物，特别是新的抗IL-36R抗体，及使用其之治疗及诊断方法及组合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗IL-36R抗体序列表本申请案含有已以ASCII格式经由EFS-Web递交的序列表且其以引用的方式整体并入本文中。该ASCII拷贝在2012年11月12日创建，命名为09-0583WO.txt且大小为147,390个字节。【专利技术所属的
】一般而言，本专利技术是关于用于诊断及治疗用途的抗IL-36R抗体。该等抗体可用于包含该等化合物的医药组合物及套组中。该等抗体可用于治疗人类中的各种疾病或病症(例如免疫学疾病、发炎性疾病、自体免疫疾病、纤维变性疾病及呼吸疾病)的方法。
技术介绍
细胞因子的IL-1家族是由11个不同配体组成，即IL-1α(亦称为IL-1F1)、IL-1β(IL-1F2)、IL-1受体拮抗剂(IL-1Ra或IL-1F3)、IL-18(IL-1F4)、IL-1F5至IL-1F10及IL-1F11(或IL-33)。已知IL-1α及IL-1β诱导与I型IL-1受体(IL-1RI)结合的促发炎活性及常见共受体IL-1受体辅助蛋白(IL-1RAcP)的募集，而IL-1Ra作为与IL-1RI结合的IL-1的竞争性抑制剂起作用，从而发挥抗发炎活性。大量研究报导IL-18是为IFN-γ的诱导物的促发炎细胞因子，而IL-33是阐述为参与(具体而言)Th2反应的控制的免疫调节细胞因子。藉助在DNA数据库中搜索IL-1的同系物来识别-1家族的新成员(包括IL-1F5、IL-1F6、IL-1F8及IL-1F9)。在人类及小鼠中，所有编码该等细胞因子的基因映像至小于300kb的染色体2q，其中其由IL1A、IL1B及IL1RN基因侧接。IL-1F6、IL-1F8及IL-1F9与IL-1及IL-1Ra共享21％至37％氨基酸序列同源性，而IL-1F5与IL-1Ra展示52％氨基酸序列同源性，此表明IL-1F5可代表内源性受体拮抗剂。IL-1F6、IL-1F8及IL-1F9与IL-1Rrp2(IL-1R家族的受体)结合，且使用IL-1RAcP作为共受体来刺激与那些由IL-1诱导的信号类似的细胞内信号，而显示IL-1F5抑制过表达IL-1Rrp2的JurkatT细胞中IL-1F9诱导的NF-κB活化。如IL-1β一般，所有该等IL-1同系物缺少前导肽且不能藉助常规分泌途径来释放，但研究表明IL-1Rrp2激动剂的释放可藉由与那些调节IL-1β分泌的机制不同的机制来控制。为认可该等细胞因子的具体生物学效应并确认其全部与同一受体结合，最近已提出修正IL-1同系物的命名法。因此，IL-1Rrp2现称为IL-36R，且其配体命名为IL-36α(IL-1F6)、IL-36β(IL-1F8)及IL-36γ(IL-1F9)。另外，已显示发挥受体拮抗剂活性的IL-1F5已重命名为IL-36Ra。IL-36α、IL-36β及IL-36γ的信使RNA在若干组织中、具体而言在暴露于病原体及皮肤中的内部上皮组织中大量表达。令人感兴趣的，IL-36Ra及IL-36α的表达在IL-1β/TNF-α刺激的人类角化细胞中显著上调，且IL-36Ra及IL-36γmRNA在牛皮癣损伤皮肤中极大增加。此外，在TNF-α及IFN-γ刺激后，人类角化细胞中的IL-36γ蛋白质产生提高。在慢性肾病中亦报导升高的IL-36αmRNA及蛋白质表达。在角化细胞中过表达IL-36α的转基因小鼠呈现与牛皮癣共有一些特征的发炎性皮肤损伤。当转基因小鼠与缺乏IL-36Ra的小鼠杂交时，此表现型更严重，此支持IL-36Ra在活体内的调节功能。若利用12-O-十四酰基佛波醇13-乙酸酯治疗角化细胞特异性IL-36α转基因小鼠，则该等小鼠中的发炎皮肤病状与人类牛皮癣甚至更类似，其在组织学上、分子上及在其对治疗法的反应上与人类疾病类似。此外，当利用抗IL-36R抗体治疗免疫缺陷型小鼠时，移植至该小鼠的人类牛皮癣损伤皮肤正常化，此证明需要IL-36轴来维持人类牛皮癣皮肤中的损伤表现型。该等数据合起来指示IL-36R配体(包括IL-36α、IL-36β及IL-36γ)在活体外及活体内发挥促发炎效应且IL-36Ra作为天然拮抗剂起作用，由此模拟IL-1/IL-1Ra系统。因此，有证据证明许多疾病病状中涉及IL-36R配体，且业内需要靶向此途径、具体而言用于治疗发炎性疾病的新治疗剂。
技术实现思路
本专利技术藉由提供与IL-36R结合的生物治疗药物、具体而言抗体来解决上文需要。在一方面中，本专利技术抗体阻断IL36配体介导的信号传导(α、β及/或γ)。在一方面中，本专利技术抗体可用于(例如)治疗诸如牛皮癣、发炎性肠疾病、硬皮病、COPD及慢性肾病等疾病中上皮介导的发炎/纤维变性。在一方面中，本专利技术提供抗具有一或多种以下性质的IL-36R抗体。在一方面中，本专利技术的抗IL-36R抗体具有较高分子/细胞结合效能。在一方面中，本专利技术的抗IL-36R抗体以KD<0.1nM与人类IL-36R结合。在又一方面中，本专利技术的抗IL-36R抗体、具体而言人类化抗IL-36R抗体以KD<50pM与人类IL-36R结合。在一方面中，本专利技术的抗IL-36R抗体以EC90<5nM与IL-36R表达细胞结合。在另一方面中，本专利技术的抗IL-36R抗体具有较高的基于细胞的功能阻断效能。在一方面中，本专利技术的抗IL-36R抗体在疾病相关细胞以及原代细胞中以IC90<5nM阻断所有三种IL-36R激动配体(α、β、γ)。在一方面中，本专利技术的抗IL-36R抗体具有上文所述的分子/细胞结合效能及基于细胞的功能阻断效能。在又一方面中，本专利技术的抗IL-36R抗体对人类IL-1R1或IL-36R阴性细胞是具有高选择性、例如大于1000倍的选择性。在又一方面中，本专利技术的抗IL-36R抗体不与人类IL-1R1或IL-36R阴性细胞是结合。在实施方案一中，本专利技术提供抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其以等于或<0.1nM的KD与人类IL-36R结合。在实施方案二中，本专利技术提供根据实施方案一的抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其中该抗体或抗原结合片段是单克隆抗体或其抗原结合片段。在实施方案三中，本专利技术提供根据实施方案一或二的抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其中该抗体或抗原结合片段是人类化的抗体或其抗原结合片段。在实施方案四中，本专利技术提供根据实施方案三的抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其以等于或<50pM的KD与人类IL-36R结合。在实施方案五中，本专利技术提供根据实施方案一至实施方案四中任一者的抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其不与人类IL-1R1结合。在实施方案六中，本专利技术提供根据实施方案一的抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其中该抗体或其抗原结合片段包含：a)轻链可变区，其包含氨基酸序列SEQIDNO:26(L-CDR1)；氨基酸序列SEQIDNO:35、102、103、104、105、106或140(L-CDR2)；氨基酸序列SEQIDNO:44(L-CDR3)；及b)重链可变区，其包含氨基酸序列SEQIDNO:53(H-CDR1)；氨基酸序列SEQIDNO:62、108、109、110或111(H-CDR2)；氨基酸序列SEQIDNO:72(H-CDR3)。在实施方案七中，本专利技术提供根据本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种抗IL‑36R抗体或其抗原结合片段，其以等于或<0.1nM之KD与人类IL‑36R结合。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2011.11.16 US 61/560,554;2012.05.08 US 61/644,111;1.抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其包含：I：a)轻链可变区，其包含氨基酸序列SEQIDNO:26(L-CDR1)；氨基酸序列SEQIDNO:35(L-CDR2)；氨基酸序列SEQIDNO:44(L-CDR3)；及b)重链可变区，其包含氨基酸序列SEQIDNO:53(H-CDR1)；氨基酸序列SEQIDNO:62(H-CDR2)；氨基酸序列SEQIDNO:72(H-CDR3)；或II：a)轻链可变区，其包含氨基酸序列SEQIDNO:26(L-CDR1)；氨基酸序列SEQIDNO:103(L-CDR2)；氨基酸序列SEQIDNO:44(L-CDR3)；及b)重链可变区，其包含氨基酸序列SEQIDNO:53(H-CDR1)；氨基酸序列SEQIDNO:62(H-CDR2)；氨基酸序列SEQIDNO:72(H-CDR3)；或III：a)轻链可变区，其包含氨基酸序列SEQIDNO:26(L-CDR1)；氨基酸序列SEQIDNO:104(L-CDR2)；氨基酸序列SEQIDNO:44(L-CDR3)；及b)重链可变区，其包含氨基酸序列SEQIDNO:53(H-CDR1)；氨基酸序列SEQIDNO:62(H-CDR2)；氨基酸序列SEQIDNO:72(H-CDR3)；或IV：a)轻链可变区，其包含氨基酸序列SEQIDNO:27(L-CDR1)；氨基酸序列SEQIDNO:36(L-CDR2)；氨基酸序列SEQIDNO:45(L-CDR3)；及b)重链可变区，其包含氨基酸序列SEQIDNO:54(H-CDR1)；氨基酸序列SEQIDNO:63(H-CDR2)；氨基酸序列SEQIDNO:73(H-CDR3)；或V：a)轻链可变区，其包含氨基酸序列SEQIDNO:27(L-CDR1)；氨基酸序列SEQIDNO:36(L-CDR2)；氨基酸序列SEQIDNO:45(L-CDR3)；及b)重链可变区，其包含氨基酸序列SEQIDNO:107(H-CDR1)；氨基酸序列SEQIDNO:63(H-CDR2)；氨基酸序列SEQIDNO:73(H-CDR3)；或VI：a)轻链可变区，其包含氨基酸序列SEQIDNO:27(L-CDR1)；氨基酸序列SEQIDNO:36(L-CDR2)；氨基酸序列SEQIDNO:45(L-CDR3)；及b)重链可变区，其包含氨基酸序列SEQIDNO:107(H-CDR1)；氨基酸序列SEQIDNO:64(H-CDR2)；氨基酸序列SEQIDNO:73(H-CDR3)；或VII：a)轻链可变区，其包含氨基酸序列SEQIDNO:21(L-CDR1)；氨基酸序列SEQIDNO:30(L-CDR2)；氨基酸序列SEQIDNO:39(L-CDR3)；及b)重链可变区，其包含氨基酸序列SEQIDNO:48(H-CDR1)；氨基酸序列SEQIDNO:57(H-CDR2)；氨基酸序列SEQIDNO:67(H-CDR3)。2.如权利要求1的抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其中该抗体或其抗原结合片段包含：a)轻链可变区，其包含氨基酸序列SEQIDNO:26(L-CDR1)；氨基酸序列SEQIDNO:103(L-CDR2)；氨基酸序列SEQIDNO:44(L-CDR3)；及b)重链可变区，其包含氨基酸序列SEQIDNO:53(H-CDR1)；氨基酸序列SEQIDNO:62(H-CDR2)；氨基酸序列SEQIDNO:72(H-CDR3)。3.如权利要求1的抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其中该抗体或其抗原结合片段包含：a)轻链可变区，其包含氨基酸序列SEQIDNO:26(L-CDR1)；氨基酸序列SEQIDNO:104(L-CDR2)；氨基酸序列SEQIDNO:44(L-CDR3)；及b)重链可变区，其包含氨基酸序列SEQIDNO:53(H-CDR1)；氨基酸序列SEQIDNO:62(H-CDR2)；氨基酸序列SEQIDNO:72(H-CDR3)。4.如权利要求1的抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其中该抗体或其抗原结合片段包含：轻链可变区，其包含氨基酸序列SEQIDNO:27(L-CDR1)；氨基酸序列SEQIDNO:36(L-CDR2)；氨基酸序列SEQIDNO:45(L-CDR3)；及重链可变区，其包含氨基酸序列SEQIDNO:107(H-CDR1)；氨基酸序列SEQIDNO:63(H-CDR2)；氨基酸序列SEQIDNO:73(H-CDR3)。5.如权利要求1的抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其中该抗体或其抗原结合片段包含：轻链可变区，其包含氨基酸序列SEQIDNO:27(L-CDR1)；氨基酸序列SEQIDNO:36(L-CDR2)；氨基酸序列SEQIDNO:45(L-CDR3)；及重链可变区，其包含氨基酸序列SEQIDNO:107(H-CDR1)；氨基酸序列SEQIDNO:64(H-CDR2)；氨基酸序列SEQIDNO:73(H-CDR3)。6.如权利要求1的抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其中该抗体或其抗原结合片段包含：包含氨基酸序列SEQIDNO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQIDNO:87的重链可变区。7.如权利要求1的抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其中该抗体或其抗原结合片段包含：包含氨基酸序列SEQIDNO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQIDNO:88的重链可变区。8.如权利要求1的抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其中该抗体或其抗原结合片段包含：包含氨基酸序列SEQIDNO:77的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQIDNO:89的重链可变区。9.如权利要求1的抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其中该抗体或其抗原结合片段包含：包含氨基酸序列SEQIDNO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQIDNO:87的重链可变区。10.如权利要求1的抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其中该抗体或其抗原结合片段包含：包含氨基酸序列SEQIDNO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQIDNO:88的重链可变区。11.如权利要求1的抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其中该抗体或其抗原结合片段包含：包含氨基酸序列SEQIDNO:80的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQIDNO:89的重链可变区。12.如权利要求1的抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其中该抗体或其抗原结合片段包含：包含氨基酸序列SEQIDNO:85的轻链可变区；及包含氨基酸序列SEQIDNO:100的重链可变区。13.如权利要求1的抗IL-36R抗体或其抗原结合片段，其中该抗体或其抗原结合片段包含：包含氨基酸序列SEQIDNO:85的轻链可变区；及包含氨基酸序列...

【专利技术属性】
技术研发人员：SE布朗，K卡纳达，L科勒维基，M豪威尔，D曼纳里克，小约瑟夫R沃斯卡，
申请(专利权)人：勃林格殷格翰国际有限公司，
类型：发明
国别省市：德国;DE