抗CA242单克隆抗体产生的杂交瘤及化学发光免疫分析试剂盒的制备制造技术

抗CA242单克隆抗体产生的杂交瘤及化学发光免疫分析试剂盒的制备，属于免疫分析医学领域。本发明专利技术提供了一种特异性识别CA242的单克隆抗体，产生该单克隆抗体的杂交瘤，以及使用该单克隆抗体检测CA242的高灵敏度的方法；还提供了CA242化学发光免疫分析检测试剂盒及其制备方法，该试剂盒包括：CA242检测反应板、酶结合物、发光底物、标准品、质控品、浓缩洗涤液。本发明专利技术用细胞融合和杂交瘤技术研发出灵敏度高、特异性好的抗体；同时用自主研发抗体将免疫学与化学发光技术相结合，研制出检测范围宽、灵敏度高、操作方便、生产成本低的试剂盒。本试剂盒通过体外测定血清中CA242的浓度，用于肿瘤的辅助诊断、对确诊的恶性肿瘤患者进行动态监测以辅助判断疾病的进程等。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及CA242单克隆抗体产生的杂交瘤及检测血清中CA242含量的试剂盒，可广泛应用在医学和及生物化学
 【背景知识】 CA242抗原是一种新的糖类肿瘤标志物，在恶性肿瘤患者血清中CA242都有较高的阳性检出率。正常人体胆管细胞、胰管细胞中含少量CA242。但CA242主要存在于胰腺和结肠的恶性肿瘤细胞中，胰腺肿瘤细胞CA242免疫荧光明显强于邻近正常胰腺细胞。CA242对胰腺癌和直肠癌是一种有价值的新的肿瘤标志物。但CA242对肝癌和胃癌的诊断率较低。至今也没有一种标志物能对某种肿瘤完全特异，所以仅仅通过某一种单项肿瘤标志物检测诊断肿瘤的准确率较低，不能广泛应用于肿瘤的早期检测，但是有研究表明，采用多种肿瘤标志物的联合检测，可以弥补上述不足。如同其他肿瘤标志物CEA、CA199、CA50、CA125等联合应用，有助于提高阳性诊断率，减少临床的漏诊率。 临床研究表明，在胰腺癌及晚期结直肠癌患者血清中，CA242普遍有显著的升高，对结直肠癌而言，CA242显示出比CA50及CA199具有更高的灵敏性；在CA50的对照研究中显示，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.抗CA242的杂交瘤细胞株，其保藏号分别为CCTCC NO:C201419和CCTCC NO:C201420。 
2.抗CA242的单克隆抗体，分别由保藏号为CCTCC NO:C201419和CCTCC NO:C201420的杂交瘤细胞系所分泌，所述单克隆抗体命名为4-1和4-5。 
3.如权利要求2所述的抗CA242单克隆抗体的应用，即利用所述的单克隆抗体的双抗体夹心法ELISA检测CA242，夹心法两两配对的抗体来源于保藏号为CCTCC NO:C201419杂交瘤分泌的抗体4-1和保藏号为CCTCC NO:C201420杂交瘤分泌的抗体4-5，其步骤包括： 
（1）以所述的两两配对的单克隆抗体4-1包被； 
（2）加入待测样品孵育； 
（3）以所述的两两配对的HRP标记的另一株单克隆抗体4-5作为二抗，加入反应体系； 
（4）洗涤后加入酶反应底物，以450nm读取OD值； 
（5）结果表明检测的灵敏度很高。 
4.一种检测血清中CA242含量的试剂盒，包括:包被有抗CA242单克隆抗体4-1的不透明聚苯乙烯板；CA242抗原系列标准品；酶标记的CA242单克隆抗体4-5；上述酶所作用的化学发光底物A液和B液以及洗涤液。 
5.如权利要求4所述的试剂盒，其特征在于：不透明聚苯乙烯板采用直接物理吸附法包被单克隆抗体4-1，包被液是磷酸盐缓冲液；另一株CA242单克隆抗体4-5和辣根过氧化酶偶联形成酶标记抗体，采用的是改良的过碘酸钠法进行标记；CA242抗原系列标准品以小牛血清为基质，加入CA242抗原纯品配置而成；发光底物A、B为HRP-Luminol发光体...

【专利技术属性】
技术研发人员：李玉花，蓝兴国，张兰兰，魏德强，张天沛，
申请(专利权)人：东北林业大学，东北林业大学大庆生物技术研究院，李玉花，
类型：发明
国别省市：