【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】编码甘油醛3-磷酸脱氢酶的GAP基因的启动子的变体本专利技术涉及使用遗传修饰的微生物来制备精细化学品的方法,在所述微生物中编码甘油醛3-磷酸脱氢酶的gap基因的启动子的变体使各种基因能够过表达。现有技术精细化学品(特别是指氨基酸、有机酸、维生素、核苷和核苷酸)被用于人类医学,用于药物、化妆和食品工业以及用于动物营养。许多这些化合物是通过发酵棒状杆菌的菌株来制备的,特别是谷氨酸棒状杆菌(Corynebacterium glutamicum)。由于非常重要,一直有努力在改善其生产方法。所述方法可以针对发酵相关的手段来进行改善,如例如,搅拌和氧气供应,或者针对营养培养基的组成如例如发酵期间的糖浓度,或者针对产物形式的建立例如通过离子交换层析的手段,或者针对微生物本身的内在性能特征。通过利用诱变、突变体的选择和挑选的方法来改善这些微生物的性能特征。以此方式获得了对于抗代谢物具抗性并产生化合物的菌株,所述抗代谢物如例如赖氨酸类似物S-(2-氨乙基)-半胱氨酸或者缬氨酸类似物2-噻唑丙氨酸,所述化合物例如L-氨基酸如L-赖氨或L-缬氨酸。多年来,重组DNA技术的方法已同样被用于改善产L-氨基酸的谷氨酸棒状杆菌菌株,其中通过例如 增强或减弱个体氨基酸生物合成基因,以及研究对所述化合物生产的作用。关于谷氨酸棒状杆菌的生物学、遗传学和生物技术的总结可以参见“Handbook ofCorynebacterium glutamicum,,(Eds.:L.Eggeling和M.Bott,CRC Press,Taylor&Francis,2005), Journal of B ...
【技术保护点】
具有启动子活性的分离的多核苷酸,其包含具有SEQ?ID?NO:3或SEQ?ID?NO:34所示核苷酸序列的多核苷酸。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2011.06.28 DE 102011118019.61.具有启动子活性的分离的多核苷酸,其包含具有SEQID N0:3*SEQ ID NO:34所示核苷酸序列的多核苷酸。2.权利要求1的多核苷酸,特征在于其基本由具有SEQID N0:3或SEQ ID N0:34所示核苷酸序列的多核苷酸组成。3.权利要求1或2的多核苷酸,特征在于其由SEQID NO: 3或SEQ ID NO: 34所示的序列组成。4.权利要求3的多核苷酸,特征在于其在其3,端功能性地连接至第二多核苷酸,其中所述连接是直接连接或者通过接头寡核苷酸的方式连接、或者通过接头多核苷酸的方式连接,优选通过接头多核苷酸的方式连接,其中所述第二多核苷酸在其5,端含有ATG或GTG起始密码子并且编码疑惑多个多肽。5.权利要求4的多核苷酸,特征在于所述SEQID N0:3或SEQ ID N0:34的多核苷酸,经在其3’端位置461处的腺苷核苷酸,由长度1、2、3、4、或5个核苷酸的接头寡核苷酸连接至所述第二多核苷酸起始密码子的第一个核苷酸。6.权利要求4的多核苷酸,特征在于所述SEQID N0:3或SEQ ID N0:34的多核苷酸,经在其3’端的腺苷核苷酸,由长度从6至不超过(<)600个核苷酸、优选长度20、21、22、23、24、或25个核苷酸的接头多核苷酸,连接至所述第二多核苷酸起始密码子的第一个核苷酸。7.权利要求6的多核苷酸,特征在于所述接头多核苷酸包含确保所合成的RNA的翻译的核苷酸序列。8.权利要求6-7的多核苷酸,特征在于所述接头多核苷酸的序列基本上由SEQIDNO: 12或SEQ ID NO: 13中所示的核苷酸序列组成。9.权利要求6-8的多核苷酸,特征在于所述接头多核苷酸的序列由SEQID NO: 14,SEQID NO: 15、SEQ ID NO: 16、S`EQ ID NO: 17或SEQ ID NO: 18中所示的任何核苷酸序列组成。10.权利要求3的多核苷酸,特征在于其经过在SEQID NO: 3或SEQ ID NO:34的3’端位置461处的腺苷核苷酸,功能性地连接至接头寡核苷酸、或连接至接头多核苷酸,优选连接至确保RNA的翻译的接头多核苷酸。11.权利要求4-9的多核苷酸,特征在于编码一或多个多肽的第二多核苷酸由一或多个选自下列的多核苷酸组成:a)编码葡萄糖-6-磷酸1-脱氢酶的Zwf亚基(Zwf,ECN0.: 1.1.1.49)的多核苷酸(zwf基因),b)编码葡萄糖-6-磷酸1-脱氢酶的OpcA亚基(OpcA,ECN0.: 1.1.1.49)的多核苷酸(opcA 基因),c)编码6-磷酸葡糖酸内酯酶(DevB,EC N0.:3.1.1.31)的多核苷酸(devB基因),d)编码转酮醇酶(Tkt,ECN0.:2.2.1.1)的多核苷酸(tkt基因),e)编码转醛醇酶(Tal,ECN0.:2.2.1.2)的多核苷酸(tal基因),f)编码6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(Gnd,ECN0.: 1.1.1.44)的多核苷酸(gnd基因),g)编码核酮糖磷酸3-差向异构酶(Rpe,ECN0.:5.1.3.1)的多核苷酸(rpe基因),h)编码核糖-5-磷酸异构酶B(Rpi,ECN0.:5.3.1.6)的多核苷酸(rpi基因),i)编码磷酸烯醇丙酮酸羧化酶(Ppc,ECN0.:4.1.1.31)的多核苷酸(ppc基因),j)编码果糖1,6- 二磷酸酶(Fbp, EC N0.:3.1.3.11)的多核苷酸(fbp基因),k)编码丙酮酸羧化酶(Pyc,EC N0.:6.4.1.1)的多核苷酸(pyc基因),I)编码二氢吡啶二羧酸合酶(DapA,ECN0.:4.2.1.52)的多核苷酸(dapA基因),m)编码天冬氨酸-半醛脱氢酶(Asd,EC N0.:1.2.1.11)的多核苷酸(asd基因),η)编码内消旋-二氨基庚二酸脱氢酶(Ddh,EC N0.:1.4.1.16)的多核苷酸(ddh基因),ο)编码二氨基庚酸脱羧酶(LysA,EC N0.:4.1.1.20)的多核苷酸(lysA基因),P)编码天冬氨酸氨基转移酶(Aat,EC N0.:2.6.1.1)的多核苷酸(aat基因),q)编码具有L-赖氨酸输出活性的多肽(LysE,赖氨酸流出通透酶)的多核苷酸(lysE基因),r)编码二氢吡啶二羧酸还原酶(DapB, EC N0.:1.3.1.26)的多核苷酸(dapB基因),s)编码天冬氨酸激酶(LysC,EC N0.:2.7.2.4)的多核苷酸(lysC基因),t)编码琥珀酰二氨基庚二酸氨基转移酶,AT I类(DapC,EC N0.:2.6.1.17)的多核苷酸(dapC基因),u)编码四氢吡啶二羧酸琥珀酰酶(DapD,EC N0.:2.3.1.117)的多核苷酸(dapD基因),v)编码琥珀酰二氨基庚二酸脱琥珀酰酶 (DapE,EC N0.:3.5.1.18)的多核苷酸(dapE基因),w)编码二氨基庚二酸差向异构酶(DapF,EC N0.:5.1.1.7)的多核苷酸(dapF基因),X)编码乙酰乳酸合酶的亚基(IlvBN,EC N0.:4.1.3.18)的多核苷酸(ilvB基因和ilvN基因),y)编码还原异构酶(IlvC,EC N0.:1.1.1.86)的多核苷酸(ilvC基因),z)编码二羟酸脱水酶(IlvD,EC N0.:4.2.1.9)的多核苷酸(ilvD基因),aa)编码转氨酶(IlvE,EC N0.:2.6.1.42)的多核苷酸(ilvE基因),bb)编码苏氨酸脱水酶(IlvA,EC N0.:4.3.1.19)的多核苷酸(ilvA基因),cc)编码高丝氨酸脱氢酶(Horn, EC-N0.:1.2.1.11)的多核苷酸(hom基因),dd)编码高丝氨酸激酶(ThrB, EC-N0.:2.7.1.39)的多核苷酸(thrB基因),ee)编码苏氨酸合酶(ThrC,EC-N0.:4.2.3.1)的多核苷酸(thrC基因),ff)编码异丙基苹果酸合酶(LeuA,EC-N0.:2.3.3.13)的多核苷酸(leuA基因),gg)编码异丙基苹果酸脱氢酶(LeuB, EC-N0.:1.1.1.85)的多核苷酸(leuB基因),hh)编码异丙基苹果酸异构酶的大亚基(LeuC,EC-N0.:4.2.1.33)的多核苷酸(leuC基因),?)编码异丙基苹果酸异构酶的小亚基(LeuD,EC-N0.:4.2.1.33)的多核苷酸(leuD基因),jj)编码赖氨酸/鸟氨酸转运蛋白(DE申请号102010003419.3)的多核苷酸(lysE基因),kk)编码N-乙酰谷氨酸激酶(ArgB,EC-N0.:2.7.2.8)的多核苷酸(argB基因),II)编码谷氨酸脱氢酶(Gdh,EC-N0.: 1.4.1.3)的多核苷酸(gdh基因),mm)编码谷氨酸N-乙酰基转移酶(ArgJ,EC-N0.:2.3.1.35和EC_N0.:2.3.1.1)的多核苷酸(argj基因),nn)编码N-乙酰基-y-谷氨酰...
【专利技术属性】
技术研发人员:A·雷特,B·巴特,S·汉斯,W·克莱斯,
申请(专利权)人:赢创德固赛有限公司,
类型:
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