一种检测仙台病毒的荧光定量PCR试剂盒及应用制造技术

本发明专利技术公开了一种检测仙台病毒的荧光定量PCR试剂盒及应用，该试剂盒含有：a)RNA提取液、b)逆转录酶反应液、c)逆转录酶、d)RNA酶抑制剂、e)引物、f)标准阳性DNA模板、g)SYBRGreenI实时荧光定量PCR反应液，其特征在于：引物序列分别为正义引物：5’-ACCTATGGTCAACAAGAGTCCGCT-3’，反义引物：5’-CGTGATTGCCTTCACCAGCACAAT-3’，扩增子大小为142bp，标准阳性DNA模板由已插入仙台病毒保守的NP蛋白编码区142bp的pTA2载体转化大肠杆菌DH5α，增殖后提取质粒，并于紫外分光光度计测A260定量并10倍梯度稀释。结果更加准确、可靠、稳定性好、重复性好，灵敏度高、定量快速准确、检测范围广。也可以为相关基础研究提供技术支持，应用前景十分广泛。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
，更具体涉及一种检测仙台病毒的SYBR Green I实时荧光定量PCR试剂盒，同时还涉及SYBR Green I实时荧光定量PCR试剂盒的应用，该SYBR Green I实时荧光定量PCR试剂盒可高效方便的对小鼠细胞制品进行定量检测和质量监控，也可以进行仙台病毒的流行病学调查，还可以为相关基础研究提供技术支持，应用前景十分广泛。
技术介绍
仙台病毒(Sendai virus, SeV)属副粘病毒科副粘病毒亚科、呼吸道病毒属病毒，呈多形性，主要为球形，直径约200 μ m。SeV是一种单股负链RNA病毒，基因组大小为15kb。SeV是引起啮齿类动物呼吸系统疾病的主要病原，可影响幼鼠发育成长和降低成年鼠的繁殖率，且很难从鼠群中清除。SeV甚至可感染灵长类动物及人类，它主要引起婴幼儿下呼吸道严重疾病及较大儿童的上呼吸道感染，以发热、咳嗽、气喘或胸闷胸痛为主，甚至造成致死性感染。但对较大儿童和成人一般只引起普通感冒症状的上呼吸道感染，很少导致感染死亡。SeV广泛分布于世界各地，其流行或散发常与流感病毒伴发流行。因此《中华人民共和国药典》规定对鼠源性生物制品必须检本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测仙台病毒的荧光定量PCR试剂盒，该试剂盒含有：a)RNA提取液、b)逆转录酶反应液、c)逆转录酶、d)?RNA酶抑制剂、e)?引物、f)?标准阳性DNA模板、g)?SYBR?Green?I实时荧光定量PCR反应液，其特征在于：引物序列分别为正义引物：5’?ACCTATGGTCAACAAGAGTCCGCT?3’，反义引物：5’?CGTGATTGCCTTCACCAGCACAAT?3’，扩增子大小为142bp，标准阳性DNA模板由已插入仙台病毒保守的NP蛋白编码区142bp的pTA2载体转化大肠杆菌DH5α，增殖后提取质粒，并于紫外分光光度计测A260定量并10倍梯度稀释。

【技术特征摘要】
1.一种检测仙台病毒的荧光定量PCR试剂盒，该试剂盒含有:a)RNA提取液、b)逆转录酶反应液、c)逆转录酶、d) RNA酶抑制剂、e)引物、f)标准阳性DNA模板、g) SYBR Green I实时荧光定量PCR反应液，其特征在于:引物序列分别为正义引物:5’ -ACCTATGGTCAACAAGAGTCCGCT-3’，反义引物:5’ -CGTGATTGCCTTCACCAGCACAAT-3’，扩增子大小为142bp，标准阳性DNA模板由已插入仙台病毒保守的NP蛋白编码区142bp的pTA2载体转化大肠杆菌DH5 α，增殖后提取质粒，并于紫外分光光度计测A26tl定量并10倍梯度稀释。2.根据权利要求1所述的一种检测仙台病毒的荧光定量PCR试剂盒，其特征在于:所述的RNA酶抑制剂提取液是由细胞裂解液、氯仿、异丙醇、75%质量体积比乙醇、灭菌...

【专利技术属性】
技术研发人员：肖庚富，张哲，郑从义，
申请(专利权)人：武汉珈创生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：